系統性紅斑狼瘡患者外周血淋巴細胞亞群分析

潘誠志 施宗明 楊國宗

福建省漳州市中醫院檢驗科，福建漳州 363000

系統性紅斑狼瘡（SLE）系一種自身免疫性疾病，表現為免疫系統紊亂，其病因和發病機制尚不明確。國外的Besedovsky等認為SLE發病機制可能是內外因素激發存在遺傳易感性個體，致機體免疫系統紊亂而發病，紊亂以產生自身抗體為主要特征，還包括免疫系統、細胞因子的免疫異常。為深入了解外周血淋巴細胞亞群變化規律，我院采用特異性熒光抗體標記流式細胞術，探討SLE患者不同階段T淋巴細胞亞群、B淋巴細胞數變化，旨在為探討SLE發病機制提供一些的參考。現將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2011年11月—2012年9月該院內科收治的33例SLE患者，其中男10例，女23例；年齡16～55歲，平均28.3歲。全部病例均符合1997年美國風濕病學會修訂的關于SLE診斷標準[1]。采用1992年歐洲SLE活動性評分標準判定SLE病情活動性。其中18例為活躍期，15例為緩解期（非活動期）。同時選取前來檢查的健康體檢者13例作為對照組。2組在年齡、性別等方面差異無統計學意義，具有可比性（P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 主要試劑及儀器 選用美國BD公司生產的FACS Calibur流式細胞儀，FACS溶血素。

1.2.2 實驗方法 抽取樣本外周血2 mL保存于肝素鈉抗凝管。在TrueCount管內分別添入20 μL抗體和50 μL抗凝全血，充分搖勻后避光放置15 min。添入FACS溶血素2 mL，混勻后室溫避光10 min,1000 rpm/min離心5 min，離去上清，再加入2 mL PBS洗一次；1000 rpm/min離心5 min，離去上清。最后采用流式細胞儀上機檢測CD3+、CD4+、CD8+、CD19+等細胞。

1.3 統計學處理

2 結果

SLE活動期、緩解組與健康對照組外周淋巴細胞亞群表達情況比較，活動期CD4+細胞數明顯少于健康對照組（P＜0.05），CD4+/CD8+比值也明顯降低（P＜0.05）；而CD4+、CD8+T淋巴細胞對對照組比較則無統計學意義（P＞0.05），CD19+（B）細胞數則均高于緩解組和對照組（P＜0.05），見表1.

表1 SLE活動期、緩解組與健康對照組外周淋巴細胞亞群檢測結果比較

3 討論

SLE典型表現是免疫調節紊亂，導致體內產生大量自身抗體和多系統受累，體內T、B細胞異常活化[1]。一般情況下，正常免疫應答是基于各種免疫細胞，尤其是T、B、NK等細胞亞群間的互相協作及制約。有研究證實[3]，淋巴細胞亞群在參與SLE發生、發展過程中起著重要的促進作用。其中作為T細胞亞群的CD3+用于表達所有成熟T細胞表面，而其他的CD4+與CD8+細胞間的相互平衡和制約則主要調節對機體的免疫應答。若某一個T細胞亞群數量和功能出現異常，則可能就會出現免疫紊亂，隨即產生一系列病理變化。

關于淋巴細胞亞群異常與SLE發病之間存在的關系，目前成為國內外臨床界研究的熱點。曾經多數認為CD4+或CD8+細胞增減變化會使CD4+/CD8+細胞比例失調，就此得出了SLE系CD8+細胞亞群數量減少而導致免疫功能亢進所致這一結論。但本組資料顯示，SLE活動期CD4+細胞數明顯減少，引起CD4+/CD8+比值隨之明顯降低（P＜0.05），而其他細胞亞群，除CD19+外，則在活動期、緩解期和對照組間對比均無差異（P＞0.05）。Filaci G等[2]關于CD8+細胞數減少后果的研究報道認為，SLE活動期CD8+Ts細胞抑制功能受損，以至機體無法生成CD8+Ts細胞，而由于CD8+Ts細胞抑制功能受損屬可逆反應，故SLE緩解期機體又會重新生成CD8+Ts細胞，這或許就是為何緩解組與健康對照組在CD8+對比差異不明顯的原因所在。

綜上所述，SLR在活動期存在明顯的T細胞及其亞群數量分布異常現象，而T、B細胞亞群異常變化在SLE發病機制中起著重要的作用。檢測外周血淋巴細胞亞群對了解機體免疫狀態，并作出病情準確判斷和治療意義重大。

[1] 張琳，張偉.系統性紅斑狼瘡相關的生物標志[J].中國免疫學雜志，2010，23(9):783-785.

[2] 許坤，張永亮，張敬然.系統性紅斑狼瘡患者外周血T淋巴細胞亞群的變化[J].實用醫技雜志，2010，14(29):391-393.

[3] 張福江.系統性紅斑狼瘡患者外周血中淋巴細胞亞群變化[J].臨床和實驗醫學雜志，2010，9(14):1097-1098.