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西藏發現重要外來入侵害蟲——西花薊馬

2013-09-28 01:33:58王海鴻雷仲仁代安國陳翰秋
植物保護 2013年1期

王海鴻, 雷仲仁*, 李 雪, 代安國, 陳翰秋

(1.中國農業科學院植物保護研究所,植物病蟲害生物學國家重點實驗室,北京 100193;2.西藏農牧科學院蔬菜研究所,拉薩 850032)

西花薊馬[Frankliniellaoccidentalis(Pergande)]屬纓翅目(Thysanoptera)、薊馬科(Thripidae)、花薊馬屬(Frankliniella),是蔬菜和觀賞植物上的一種重要害蟲。西花薊馬通過直接取食和傳播番茄斑萎病毒等多種病毒造成嚴重的經濟損失[1-3]。西花薊馬起源于北美洲,由于其廣泛的寄主范圍、較高的生殖能力和極強的抗藥性[4]等原因,目前已擴散至許多國家和地區,成為一種經濟重要的世界性害蟲。我國大陸于2003年6月在北京郊區的大棚辣椒上首次發現西花薊馬[5],之后其迅速擴散至浙江、云南、山東、江蘇、貴州和新疆等地[6-9],造成了嚴重的經濟損失。研究人員分別利用地理信息系統Arc View GIS[10]和 CLIMEX 模型[11]分析預測了西花薊馬在中國的潛在適生范圍,認為西藏自治區等地屬于其不適宜生存區。然而,作者在對西藏自治區拉薩市區及堆龍德慶縣崗德林村蔬菜上的薊馬進行調查研究時,肉眼觀察到薊馬的體色和形態與西花薊馬相似。為確定薊馬的種類,作者進行了標本采集,帶回實驗室進行了形態學及分子生物學鑒定。

1 形態學特征

該種薊馬雌蟲體長2 mm左右,體色淺褐色至褐色,觸角8節,第1節淺黃色,第2節褐色,第3~5節黃色,但端部稍褐,第6~8節褐色。第3、4節上有叉狀感覺錐。單眼3個,紅色,月牙形,呈三角形排列,三角區內一對長鬃與復眼后方的長鬃等長。前胸背板有4對長鬃,分別位于前緣(1對),左右前角(1對),左右后角(2對),后緣中央有5對鬃,其中從中央向外第2對鬃最長。中后胸背板愈合,后胸背板中央有不規則的網狀紋,靠近后方有一對鐘狀感覺器(呈亮點狀),后胸背板前緣中央有2對長鬃。前翅淡黃色,上脈鬃20根,下脈鬃15根。腹部第5~8節背板兩側有微彎梳,第8背板后緣有梳狀毛13根。第9節背板有2對鐘狀感覺器。第3~7節腹板后緣有鬃3對,無附鬃。

雄蟲體長1.75 mm左右,體黃色,腹部第3~7腹板前部有小的橫橢圓形腺室。第8節背板后緣無梳狀毛。

上述形態學特征與西花薊馬[12]一致,因此,拉薩市區及堆龍德慶縣崗德林村蔬菜上薊馬鑒定為西花薊馬。

2 分子生物學鑒定

為了進一步驗證該種薊馬是否為西花薊馬,作者利用分子生物學方法進行了鑒定。試驗方法:用DNA提取試劑盒(TIANamp Genomic DNA Kit DP304-02,天根生化科技(北京)有限公司)提取單頭薊馬總DNA做模板,利用鑒定西花薊馬COI(細胞色素C氧化酶亞基I)基因片段的特異性引物(F.OL2:5′-TCCCTTCATTTAGCAGGT-3′和 F.OR:5′-CGGATCAAAGAAGGATGTA-3′)[13]進 行PCR擴增。反應總體系為50μL,其中含10×PCR Buffer 5μL、2.5μmol/L d NTPs 4μL、10μmol/L引物各1μL、Taq酶0.64μL,模板DNA 5μL,用雙蒸水補充至50μL。擴增條件為95℃變性30 s,55℃退火30 s,72℃延伸1 min,共35個循環;最后72℃延伸10 min,4℃保存。擴增產物用1%瓊脂糖凝膠電泳檢測,并送博邁德科技發展有限公司測序。

瓊脂糖凝膠電泳結果表明,在250 bp處有一條特異性的條帶(圖1),測序結果在GenBank數據庫(http:∥www.ncbi.nlm.nih.gov/)中進行BLAST比對。比對結果顯示與GenBank中的西花薊馬COI(JN835456)的序列相同,從分子生物學上進一步確定了西藏自治區拉薩市及堆龍德慶縣崗德林村蔬菜上的薊馬為西花薊馬。

圖1 西藏薊馬COI基因PCR擴增結果Fig.1 PCR amplification of COI gene in the thrips from Tibet

3 討論

利用地理信息系統Arc View GIS和CLIMEX模型,根據昆蟲耐受溫、濕度的極限值以及發生地的溫、濕度等氣象條件,能較準確地預測昆蟲可能擴散發生的區域。但大部分昆蟲經過溫濕度鍛煉后,其耐受溫濕度的極限值能夠發生改變[14-15],因此,可能導致其實際適生區比預測區域更為廣闊。西花薊馬在預測為不適生區域的西藏自治區出現可能基于此類原因。

傳統的形態學可將特征比較明顯的薊馬種類進行區分,然而,形態學難以鑒別的薊馬則需要通過分子生物學鑒定。不同的研究人員分別用COI基因全序列或片段準確地鑒定了西花薊馬等多種薊馬種類[16-20]。在對西藏自治區拉薩市區及堆龍德慶縣崗德林村蔬菜上的薊馬進行形態學鑒定的基礎上,輔助以分子生物學鑒定,兩者鑒定結果一致,可以確定該薊馬為西花薊馬。

青藏高原的環境極為嚴酷,西花薊馬是近年來入侵我國的一種重要農業害蟲,該蟲能于較短的時間內在高原上成功地建立起種群,表明了其生物學的特殊性[4]。同時由于在新入侵地存在其天敵種類和數量匱乏等因素,該蟲在較短時間內大暴發的危險不容忽視。這是西花薊馬在西藏自治區發生的首次報道,其適應青藏高原低氧、干燥及其他不利環境的生理生化機制有待于進一步研究。

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