陳召金,黃敏輝,姚慧梅(廣東省東莞市企石醫院兒科 523500)
小兒腎臟疾病治愈快,但存在病情反復、病程加重的特點。因此小兒腎臟疾病的診斷與救治一直是腎臟疾病研究的重點。腎小管損傷標志物是腎損傷的常用檢測指標之一,在臨床應用廣泛[1-3]。因此,本課題組擬探討多種腎小管標志物聯合檢測對于小兒腎臟疾病的價值,并做相應研究,現報道如下。
1.1 一般資料
1.1.1 腎小管損傷組(Ⅰ組) 從本院2011年10月1日至2012年10月1日收治確診為腎小管損傷的患兒中隨機抽取30例,其中男16例,女14例;年齡2~11歲,平均(6.81±3.25)歲;該組患者無腎功能異常,并排除其他并發癥。
1.1.2 腎病綜合征組(Ⅱ組) 從本院同期收治確診為腎病綜合征的患兒中隨機抽取30例,其中男17例,女13例;年齡1~12歲,平均(6.51±2.86)歲;該組患者排除其他并發癥。
1.1.3 過敏性紫癜組(Ⅲ組) 從同期來本院確診為過敏性紫癜的患兒中抽取30例,其中男15例,女15例;年齡1~10歲,平均(7.24±3.48)歲;該組患者無腎功能異常,并排除其他并發癥。
1.1.4 健康組(Ⅳ組) 標本從同期來本院體檢的健康兒童中隨機抽取30例,其中男16例,女14例;年齡1~12歲,平均(6.93±3.47)歲。四組標本在性別、年齡等方面比較差異無統計學意義,具有可比性。
1.2 方法
1.2.1 酶聯免疫吸附法(ELISA)測定β2微球蛋白(β2-MG)和視黃醇結合蛋白(RBP) 取各組兒童新鮮尿液,采用ELISA測定(酶標儀為BM公司ELX-800型,試劑盒為上海德波生物技術有限公司生產)。于酶標儀490nm處測吸光度,參比波長630nm。陽性判斷標準:β2-MG<300μg/L,RBP<300μg/L;檢測值高于正常值+2倍標準差為陽性。
1.2.2 直接顯色法測定 N-乙酰-β-D氨基酸核苷酶(NAG)取各組患兒新鮮尿液,采用酶-底物直接顯色法,722RS型分光光度儀,波長400nm處讀取吸光值。陽性判斷標準:NAG<16U/L;檢測值高于正常值+2倍標準差為陽性。
1.2.3 速率散射比濁法測定尿胱抑素C(Cys C) 取各組兒童新鮮尿液,在HIT A CHI7600-120全白動生化分析系統上完成。陽性判斷標準:Cys C范圍是0.115~0.141mg/L。
1.3 觀察指標
1.3.1 比較4組兒童尿液中β2-MG、Cys C、RBP、NAG水平。
1.3.2 比較聯合應用β2-MG、Cys C、RBP、NAG檢測4組兒童腎小管損傷的陽性率。
1.4 統計學處理 采用SPSS 17.0統計學軟件進行處理,計量數據以表示,采用t檢驗,計數資料采用χ2檢驗,以P<0.05為差異有統計學意義。
2.1 4組尿中β2-MG、Cys C、RBP、NAG水平比較 Ⅰ組與Ⅱ組、Ⅲ組、Ⅳ組β2-MG、Cys C、RBP、NAG水平差異有統計學意義(P<0.05);Ⅱ組與Ⅳ組β2-MG、Cys C、RBP、NAG水平差異有統計學意義(P<0.05);Ⅲ組與Ⅳ組β2-MG、Cys C、RBP、NAG水平差異有統計學意義(P<0.05);Ⅱ組與Ⅲ組β2-MG、Cys C、RBP、NAG水平差異無統計學意義(P>0.05)。見表1。
表1 4組尿中β2-MG、Cys C、RBP、NAG水平比較(n=30,)

表1 4組尿中β2-MG、Cys C、RBP、NAG水平比較(n=30,)
組別 β2-MG(μg/L) RBP(μg/L) NAG(U/L) Cys C(mg/L)Ⅰ組 497.23±260.07 515.64±293.55 54.53±30.85 3.452±0.371Ⅱ組 248.16±192.92 198.20±113.74 23.83±11.28 1.564±0.382Ⅲ組 244.91±186.43 203.85±106.54 21.24±13.06 1.825±0.296Ⅳ組 91.58±63.73 35.79±17.28 5.33±2.87 0.823±0.147
2.2 β2-MG 、Cys C、RBP、NAG聯合檢測陽性率 Ⅰ組、Ⅱ組、Ⅲ組聯合檢測陽性率分別為100%(30例)、90%(27例)、86.67%(26例),均遠遠高于Ⅳ組5%(1例)。
腎損傷是多種疾病的常見并發癥,因其臨床癥狀隱蔽,故難以及時發現,導致患者病程貽誤。因此,國際上采取了多種標志物來檢測腎損傷[4-5]。自20世紀80年代以來,腎小管損傷日漸受到人們的廣泛重視[6]。針對這種情況,本課題組提出了聯合檢測的設想,選取了較為常用準確的腎小管損傷標志物[7-8]:β2-MG、RBP、NAG和 Cys C。β2-MG的尿液水平增高體現腎小管重吸收功能障礙;RBP反映腎小管間質受損[9];NAG含量的增高反映腎小管實質損害;Cys C則體現了腎小管壞死的嚴重程度[10]。選取這4個指標,較為全面的概括了腎小管損傷的各種類型,聯合應用其檢測,經過試驗驗證,陽性率達到100%,這表明本文設想是合理、正確的。
為了探究腎小管標志物的特異性,本課題組設計了無腎功能異常的過敏性紫癜組。比較此組與其他組的數據,表明即使通過其他的檢測手段反映病患無腎功能異常,腎小管依然存在一定程度的損傷。而事實表明,60%~80%的過敏性紫癜患者后期均患有腎臟疾病,明確反映了腎小管標志物在早期診斷疾病的重要作用。腎功能不全組的設計,表明腎臟患者不僅具有腎小管損傷,也伴有腎小球損傷,這二者的病變過程往往是相輔相成的。因此,提示腎小管損傷,對腎小球病變也有一定指導作用。
兒童的體質健康決定了國家的發展前途,我國小兒腎臟疾病的現狀并不樂觀。如何提高早期腎病的診斷率對于治愈疾病有著不可忽視的作用。發現更多的標志物,提高檢測手段的靈敏性,都是未來研究的方向。
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