全自動生化儀日立7600與羅氏c311的比對分析

陳 勛，張伍鳳，李榮海，沈麗琴，尚曉泓△（.中國中醫科學院西苑醫院檢驗科，北京 0009；.河北北方學院檢驗系，河北張家口 075000）

由于臨床標本量的逐漸增多，中國中醫科學院西苑醫院先后引進了日立7600－020全自動生化儀（日立7600）與羅氏c311全自動生化儀（羅氏c311）各1臺，2臺分析儀檢測項目有交叉。為驗證兩臺分析儀檢測結果的可比性，參照美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）EP15－A、EP6－A、EP9－A2文件的要求，以美國臨床實驗室修正法規（CLIA′88）規定的允許總誤差范圍的1／3為標準，本科室通過分別在兩臺生化分析儀上進行血清葡萄糖濃度（Glu）檢測，參照此模式以期達到不同生化儀間相同檢測項目比對的目的，現將研究情況報道如下。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑 日立7600所用Glu試劑購自中生北控生物科技股份有限公司；羅氏c311試劑為羅氏廠家配套試劑；水平1、水平2質控品均為羅氏產品。

1.2 精密度測定 參考 NCCLS EP15－A 文件［1］，選用 Glu 2個醫學決定水平（7.00mmol／L和11.00mmol／L）的血清標本。廠家聲明的批內精密度（σwithin）和總精密度（σtotal）分別應小于2%、5%。由于σwithin≤2／3倍的σtotal，因此在日立7600上常規檢測Glu，每天重復測定4次，共檢測5d。判定各水平的批內精密度（s within）和批間精密度（s total）是否低于廠家聲明值。

1.3 線性分析 參照 NCCLS EP6－A文件［2］，選用 Glu濃度近似于廠家聲稱線性范圍的低限（1.00mmol／L）和高限（41.00mmol／L）的新鮮血清標本各1份。按比例將這兩份血清稀釋，使其預期濃度分別為1.00、2.80、7.00、11.10、22.20、41.00mmol／L。用日立7600測定此6批Glu，同一批重復測定2次。將結果進行多元線性分析。

1.4 比對實驗 參照 NCCLS EP9－A2文件［3］，取40例新鮮血清標本，按Glu濃度水平分為Ⅰ組（＜2.80mmol／L，4例），Ⅱ組（2.80～6.11mmol／L，16例），Ⅲ組（6.12～8.30mmol／L，12例），Ⅳ組（8.31～14.00mmol／L，4例），Ⅴ組（14.01～44.20mmol／L，4例）。分別用日立7600和羅氏c311每天測定8個標本，每個標本重復檢測2次，共測定5d。第1次測定按照1→8的順序，第2次按照8→1的順序，記錄測定結果。以日立7600為比對系統，羅氏c311為實驗系統。參照文件檢查離群值，繪制散點圖，進行回歸分析。以CLIA′88允許總誤差的1／3為標準，計算給定的醫學決定水平處的可接受限（Xc）、預估偏倚值（Bc）以及Bc的95%可信區間。通過比較Xc和Bc的95%可信區間的關系，判定實驗系統是否與比對系統具有一致性。

1.5 統計學處理 采用SPSS17.0軟件進行統計學分析，數據采用F檢驗，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

2.1 精密度評價 日立7600檢測Glu濃度在7.00mmol／L處的s within（0.08mmol／L）＜σwithin（0.14mmol／L），s total（0.09mmol／L）＜σtotal（0.35mmol／L）；Glu濃度在11.00 mmol／L處的s within（0.14mmol／L）＜σwithin（0.55mmol／L），s total（0.17mmol／L）＜σtotal（0.22mmol／L）。2個醫學水平濃度均符合廠家給定的標準。

在日立7600上評價的線性分析數據無明顯離群值，3種多項式的相關系數的平方（決定系數，r2）均大于0.99。一次多項式和二次多項式的P＝0.001，三次多項式的P＝0.001，3種多項式比較均差異有統計學意義（P＜0.05）。線性分析的F值分別為4 031.500、1 531.800、1 377.400，但其中一次多項式的F值最大，說明一次多項式對數據的擬合程度最好（圖1，表1）。

圖1 曲線擬合圖

2.2 儀器比對及偏倚性評估 數據經過匯總，先進行離群點檢查。Glu檢測結果在日立7600和羅氏c311上的絕對偏差限值分別為0.30、0.20，相對偏差限值分別為0.04、0.02；兩系統間的絕對偏差限值為1.36，相對偏差限值為0.17。本實驗中均無離群點數據存在。

表1 相關分析結果

在整個測量范圍內，Glu結果的均值在比對方法與實驗方法r2為0.999 9，r2＞0.95說明相關性很好，而實驗方法相對比對方法的偏倚也較小（圖2A、B）。兩方法個體值間的r2也達到0.999 9，并且實驗方法相對比對方法個體值間的偏倚也很小（圖2C、D）。可以認為比對方法取值范圍合適。

圖2 比對分析圖

分析了線性和偏倚之后，作者選擇了Glu的3個醫學決定水平濃度2.80、7.00、11.10mmol／L，分別進行Bc分析。其Bc的95%可信區間分別為2.68～2.73mmol／L、6.72～6.80 mmol／L、10.59～10.63mmol／L，均小于相應的允許濃度范圍（表2）。

表2 比對分析結果（mmol／L）

3 討 論

糖尿?。―M）的早期診斷和良好的干預治療是減少患者嚴重并發癥，提高患者生活質量，減少醫保支出方面的關鍵。而作為其診斷性指標的血清Glu在臨床檢測中的重要性就顯得尤為重要。因此，本實驗室通過在不同生化分析儀上檢測血糖項目，以構建一個模式，為其他項目的比對分析奠定基礎。

NCCLS EP15－A、EP6－A、EP9－A2文件作為性能驗證的指導性文件，近年來被實驗室廣泛應用［4－7］。而在進行比對實驗前，先要保證比對系統具有良好的精密度，這樣檢測結果才具有可比的前提。同時為比對系統選擇合適濃度的標本，需要檢測比對儀器測定的線性范圍。因試劑廠家已明確給出性能參數，故實驗室只需要進行驗證［8］。目前EP15－A提供了用戶驗證精密度方案，此方案只需5d，每天每個濃度重復測定4次，而EP5－A2方案則需20d［9］?？紤]到標本保存的不穩定性可能對實驗的影響以及成本問題，所以選用EP15－A方案。

美國糖尿病協會（ADA）糖尿病最新的診斷標準：空腹血糖（FPG）大于或者等于7.00mmol／L；或口服葡萄糖耐量（OGTT）2h血糖大于或等于11.10mmol／L；或隨機血糖大于或等于11.10mmol／L。參照此標準，筆者在進行精密度、線性范圍評價及隨后比對分析的Bc時均選擇Glu濃度為7.00 mmol／L和11.00mmol／L 2個醫學決定水平的標本用來檢測，以期更加貼近臨床工作的需要。

在精密度和線性范圍評價過程中，作為比對系統的日立7600的s within、s total及線性范圍均達到廠家聲明的檢測性能，綜合分析日立7600實驗結果數據可靠，可作為比對系統進行進一步的比對實驗。

本實驗在評價兩種檢測系統可對性的過程中，并未檢測到離群值。結果表明，羅氏c311的Glu結果較日立7600結果均有所偏低，說明存在一定的負偏倚，但兩系統相關性很好（圖2）。進一步的回歸分析表明，Glu濃度在2.80、7.00、11.10 mmol／L 3個醫學決定水平處Bc的95%可信區間均小于1／3 CLIA′88的總誤差?？梢哉J為，羅氏c311就Glu檢測項目而言，與日立7600具有較好的一致性。此項研究為本實驗室全面開展檢測項目儀器間的比對分析工作奠定了基礎。

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［2］National Committee for Clinical Laboratory Standards.E－valuation of the linearity of quantitative measurement procedures：a statistical approach；approved guideline EP6－A［S］.Wayne，PA：NCCLS，2003.

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［8］畢波，呂元.定量檢測方法學性能驗證的系統設計［J］.中華檢驗醫學雜志，2007，30（2）：143－145.

［9］National Committee for Clinical Laboratory Standards.E－valuation of precision performance of quantitative measurement methods；approved guideline EP5－a2［S］.2nd ed.Wayne，PA：NCCLS，2004.