余 波 譚詩文 冉懋韜 徐景峨
(貴州省畜牧獸醫研究所,貴州貴陽 550005)
2012年9月,貴州省都勻市某養豬場存欄母豬42頭,經產和初產懷孕母豬出現產死胎、木乃伊和弱仔的現象。弱仔豬產出7天后死亡。仔豬體溫突然升高至41~42℃,精神不振,后軀站立不穩或臥地不起,運動失調,食欲減退,糞便稀黃。隨即用青霉素和長效土鏈霉素、黃芪多糖治療,患病豬在治療過程中陸續死亡,發病率約為70%~80%,患病仔豬死亡率達100%。
對病死豬進行病理剖檢,其結果如下:死胎、木乃伊胎有充血、出血、水腫和體腔積液的現象,而實質臟器無明顯病理變化。仔豬腦充血、出血;肝、脾有散在灰白色壞死灶;腎有點狀出血;全身淋巴結充血,腫大;胃底部胃壁增厚,有膠凍樣液體、條狀出血斑和出血點。
取死亡仔豬肝、肺、淋巴結等處的病料接種于普通瓊脂平板、麥康凱瓊脂,于37℃培養24小時。普通瓊脂平板上有菌落生成,為圓形、邊緣整齊光滑、灰白色。麥康凱培養基上有紅色菌落。
該菌株能分解發酵甘露醇、麥芽糖、葡萄糖、乳糖,產生靛基質,不產生硫化氫,不分解尿素,M.R.試驗陽性,V-P試驗陰性。
取病死豬的肝、肺、腎、淋巴結等處的組織病料,應用TIAN amp病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒分別提取總DNA/RNA,應用本研究室余波等建立的豬偽狂犬病毒(PRV)、豬細小病毒(PPV)、豬圓環病毒 2型(PCV2)多重PCR診斷方法[1]檢測PRV、PPV、PCV2這3種病毒,PRV目的片段大小為300bp,PCV2目的片段大小為420b p,PPV目的片段大小為680bp,結果見圖1,樣品于300bp、420b p處分別表達出了條帶,與PRV、PCV2目的條帶大小相符。同時應用豬瘟病毒(CSFV)RT-PCR檢測試劑盒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒 (PRRSV) 系列RT-PCR檢測試劑盒分別檢測CSFV和PRRSV,試劑盒為北京世紀元亨動物防疫技術有限公司產品(批號:20120214),CSFV和 PRRSV目的片段大小均為278b p,無明顯條帶表達,結果見圖2、圖3,說明存在PRV與PCV-2混合感染。

圖1 PRV、PCV-2和PPV多重PCR結果

圖2 CSFV RT-PCR結果

圖3 PRRSV RT-PCR結果
進一步對送檢母豬和瀕死仔豬血清分別用豬瘟病毒(CSFV)、豬藍耳病病毒(PRRSV)、豬偽狂犬病毒(PRV)、豬圓環病毒2型(PCV2) 的ELISA抗體診斷試劑盒進行檢測,試劑盒為北京世紀元亨動物防疫技術有限公司產品(批號:20111202)。檢測結果可驗證3.2中的鑒定結果,見表1。

表1 豬血清學ELISA抗體檢測結果
通過臨床癥狀、病理變化和實驗室檢測,綜合確診該疫情為豬偽狂犬病毒、豬圓環病毒2型和豬黃痢的混合感染。
病情確診后,立即用生石灰對豬舍進行徹底消毒,對發病豬進行嚴格隔離與治療。未感染豬群應緊急注射豬偽狂犬病毒g E基因缺失疫苗(Bartha-K61株)。對該場的豬圓環病毒2型抗體檢測分析以后,結合實際情況,未建議該場使用豬圓環病毒2型弱毒疫苗。同時,在飼料中加喂氟苯尼考,飲水中添加黃芪多糖、電解多維、葡萄糖,增加豬群的抗病能力,連用7天,30天后疫情得到有效控制。
豬場中發病情況常為多種因素導致的數種病菌并發感染或繼發感染,同時許多病原體發生變異以及新病原體出現,從而造成一些豬傳染病以非典型或綜合征的形式出現,使豬病的診斷和防治難度增加[2-4]。
豬偽狂犬病毒和豬圓環病毒直接危害畜體,嚴重時造成機體免疫抑制,多種疫病繼發感染,使病情加重,藥物的有效性降低以及疫苗接種失敗。病例中仔豬沒有豬瘟、豬藍耳病毒的母源抗體,可能是由豬偽狂犬病毒、豬圓環病毒引起的免疫抑制。對該場的豬圓環病毒2型抗體檢測分析以后,結合實際情況,未建議該場使用豬圓環病毒2型弱毒疫苗,避免大規模免疫后加大了圓環病毒2型的凈化難度。
針對目前規模化豬場疫病的復雜情況,樹立保健和預防觀念,采取合理的免疫程序,建立完善的預防機制,同時對患病豬制定科學的用藥方案,正確配伍,協同用藥,辨證施治,綜合治療。
[1]余波,譚詩文,冉懋韜,等.檢測PRV野毒株、PCV-2及PPV多重PCR方法的建立及初步應用.畜牧與獸醫,42(5):15-18.
[2]殷震,劉景華.動物病毒學(第2版).北京:科學出版社,1997:631-640.
[3]陳鐘鳴,張定東,方光遠,等.PRRSV、CSFV和JEV混合感染的多聯PCR診斷.動物醫學進展,2008,29(12):23-27.
[3]郝昭遠,孔令芳.當前規模化養豬場豬病流行特點及防治對策.山東畜牧獸醫,2009,30(7):46-47.
[4]仇華吉,童光志.病毒性繁殖障礙:養豬業面臨的新課題.中國獸醫雜志,2007,37(3):49-50.