腫瘤壞死因子－α檢測對結核性胸膜炎的診斷價值

李國周，吳潔貞，周志梅，諸秋霞

（廣東省東莞市慢性病防治院：1.實驗室；2.院感部 523008）

結核性胸膜炎（tuberculous pleurisy，TP）是臨床常見病、多發病，由于其缺乏特異性臨床表現，影像學檢查亦無特異性改變，胸腔積液部位、年齡及性別構成對TP診斷也無意義，因此難以根據臨床表現和影像學檢查診斷TP。而胸腔積液病原學檢查，包括胸腔積液涂片找抗酸分枝桿菌、胸腔積液結核桿菌培養等，因陽性率低或耗時過長而使其臨床應用受到限制。目前國內外學者著力于研究新的特異性強與敏感性高的指標，以期提高TP的診斷水平。一些研究表明，胸腔積液中細胞因子和免疫分子的異常表達，可以鑒別胸腔積液的性質。而在常規檢驗工作中，經常接收到不明原因的胸腔積液標本，根據患者臨床表現和胸腔積液性質和生化特點，大部分胸腔積液的性質是可以明確，但仍有20%～30%胸腔積液患者難以確診。本試驗檢測分析結核性胸膜炎并發胸腔積液中的TNF-α水平變化，對于了解結核性胸膜炎并發胸腔積液具有重要意義，并探討結核性胸膜炎并發胸腔積液患者的胸腔積液、外周血和健康對照組中TNF-α水平比較，為臨床診斷提供實驗數據。

1 資料與方法

1.1 一般資料 250例標本均來自于2005年5月至2011年12月在本院肺科門診及呼吸內科住院患者，其中男145例，女105例，年齡23～65歲，平均年齡（32±3）歲，健康對照組50例，男35例，女15例，年齡20～55歲，平均年齡（29±3）歲。

1.2 方法 采用酶聯免疫吸附試驗（ELISA）檢測外周血及胸腔積液TNF-α濃度，分別靜脈抽取健康對照組及結核性胸膜炎患者血液2～4mL，再抽取結核性胸膜炎患者胸腔積液10 mL，離心半徑10cm，2 500r／min離心10min，吸取上清液2 mL。實驗操作步驟嚴格按試劑盒要求。同一患者其血清及胸腔積液同步測試TNF-α濃度，并每次檢測健康對照組血清TNF-α濃度。

1.3 試劑 TNF-α檢測試劑由廣東省珠海麗珠生物有限公司生產提供。

1.4 統計學方法 實驗數據全部通過SPSS 11.0統計軟件方法分析齊性檢驗后，再進行t檢驗，進行組間比較，以P＜0.05為差異具有統計學意義。

2 結 果

采用ELISA法檢測結核性胸膜炎并發胸腔積液患者血清及胸腔積液TNF-α濃度，并同步檢測健康人血清TNF-α濃度作對照。經統計學數據處理分析，結核性胸膜炎患者胸腔積液中TNF-α濃度顯著高于健康對照組，二者差異具有統計學意義（t＝38.38，P＜0.01）。結核性胸膜炎患者與健康對照組血清TNF－α濃度比較，二者差異有統計學意義（t＝5.38，P＜0.01），而同一患者胸腔積液TNF－α濃度明顯要高于血清水平。見表1。

表1 結核性胸膜炎患者與健康對照組TNF-α濃度比較

3 討 論

TNF-α是一種多肽類物質，具有157個氨基酸殘基，為前炎細胞因子，由單核巨噬細胞和淋巴細胞所產生，它不僅是一種腫瘤細胞殺傷因子，而且是機體炎癥反應、免疫應答的重要調節因子，其生物學活性主要有：（1）刺激單核細胞，激活巨噬細胞發揮免疫調節作用；（2）上調黏附因子表達，促進巨噬細胞活化，增強其吞噬功能；（3）上調機體T、B淋巴細胞免疫功能；（4）激活白細胞介素-8（IL-8）等細胞因子，形成相互協調作用的細胞因子網絡系統。國內外有研究表明，適量的TNF-α濃度對保護機體是非常必要的，可刺激單核巨噬細胞系統，增強其吞噬結核桿菌能力，能使原發性病灶自愈［1－2］。但經過國外部分學者及一定數量分析表明，過量的TNF-α濃度則可導致組織嚴重損傷及干酪樣改變，臨床上出現發熱、盜汗、惡病質等癥狀，從而使肺結核病情進一步加重［3］。同時，若局部肺組織缺氧情況下亦可刺激肺泡巨噬細胞導致TNF-α水平增加。此外，結核桿菌入侵機體后造成機體局部損傷以及其釋放的內毒素脂多糖（LPS）除能激活單核巨噬細胞系統和淋巴細胞產生TNF-α以外，還釋放白細胞介素-6（IL-6）、IL-8等多種細胞因子，并一起參與到肺結核局部免疫反應和炎癥發生。肺結核活動期時，結核感染病灶常引起肺組織較為嚴重的局部損傷，刺激單核巨噬細胞系統和淋巴細胞釋放高水平的TNF-α、IL-6、IL-8等多種細胞因子，但過高的 TNF－α、IL-6、IL-8等多種細胞因子水平又通過各種效應途徑激活免疫細胞，加重局部炎癥反應及肺組織損傷，繼而形成一個惡性循環，使活動性肺結核病情趨向惡化［4］。有文獻報道，結核性胸膜炎患者胸積液中TNF-α水平明顯要高于惡性胸腔積液［5］。可能與惡性胸腔積液中存在一種TNF-α抑制物有關，它可以抑制TNF-α活性。它通過抑制TNF－α分泌和釋放或加速其分解，致使胸腔積液中TNF－α活性與含量降低。也有文獻報道TNF－α可促進胸膜間皮細胞釋放1型纖維蛋白溶酶激活抑制劑（PAI-1），使結核性胸腔積液的纖維蛋白溶解活性比惡性胸腔積液中的水平明顯降低，從而更易因纖維蛋白沉積導致胸膜增厚［6－7］。本實驗采用ELISA法檢測患者胸腔積液及健康人血清TNF－α水平，經統計學分析，TNF-α水平在結核性胸膜炎患者血清（13.88±2.33，P＜0.01）及胸腔積液（38.38±3.73，P＜0.01）中明顯要高于健康人血清（11.75±2.94），二者差異具有統計學意義。

另外，本實驗統計了250例結核性胸膜炎患者中，痰涂片陽性和痰涂片陰性患者的TNF－α水平差異無統計學意義（P＞0.05），而本試驗還發現TNF－α在肺結核中的表達強度，肺部伴有空洞結核性胸膜炎患者中，其TNF－α水平值明顯高于沒有空洞患者，與文獻報道一致［8－9］。其中有2例結核性胸膜炎合并胸腔積液患者因治療欠佳而轉化為結核性膿胸，其TNF－α水平值明顯高于其他患者（t＝44.21），提示病情惡化可使TNF-α水平值進一步提升。

由此可見，肺結核的病情變化與TNF－α有關，TNF-α在結核性胸腔積液中具有高水平，肺結核的患者胸腔積液和外周血中TNF-α水平檢測具有一定意義，可作為診斷及鑒別診斷的一種有效指標。

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