去白細胞懸浮紅細胞與懸浮紅細胞儲存期內溶血率的比較

徐 忠，邱穎婕，龔裕春，金魏名，周筱嫣，陸 赟

（上海市血液中心 200051）

采用過濾方式去除血液中的白細胞，可有效預防某些輸血后不良反應的發生，如非溶血性發熱反應（NHFR）、白細胞抗原（HLA）同種免疫和巨細胞病毒（CMV）傳播等［1］，因此去白細胞血液在國內、外采供血機構中已得到廣泛的應用。但是，也有報道認為白細胞濾除過程可能會引起紅細胞發生不能接受的溶血現象。目前國內對于去白細胞血液的白細胞清除率和紅細胞回收率等質量要求研究較多，對血液的溶血率變化研究較少，而且國家標準也未對紅細胞類制品的溶血率進行規定。因此，為了觀察去白細胞懸浮紅細胞在儲存期內的溶血率變化，本文對使用去白細胞濾器血袋制備的去白細胞懸浮紅細胞制品和從未經過濾全血中分離出的懸浮紅細胞制品，取樣檢測儲存期內紅細胞溶血率，考核是否符合AABB標準和歐盟標準并進行比較分析，以期探討白細胞過濾過程對于紅細胞溶血率的影響。

1 資料與方法

1.1 材料 一次性使用200mL去白細胞濾器血袋（全血過濾）、一次性使用去白細胞濾器（懸浮紅細胞過濾）、一次性使用普通四聯血袋各40套。

1.2 去白細胞懸浮紅細胞制備

1.2.1 懸浮紅細胞過濾（以下簡稱去白1組） 應用一次性使用普通四聯血袋采集ACD－B抗凝全血40袋（每袋200mL），采集后儲存于（4±2）℃冰箱過夜。第2天3 820r／min離心20 min，去除上層血漿，添加 MAP制備成懸浮紅細胞。在（4±2）℃環境中按照去白細胞濾器血袋操作規程進行過濾，濾后即成去白細胞懸浮紅細胞。

1.2.2 全血過濾（以下簡稱去白2組） 應用一次性使用去白細胞濾器血袋采集ACD－B抗凝全血40袋（每袋200mL），采集后儲存于（4±2）℃冰箱過夜。第2天在（4±2）℃環境中按照去白細胞濾器血袋操作規程進行全血過濾，濾后全血3 820 r／min離心20min，去除上層血漿，添加MAP制備成去白細胞懸浮紅細胞。

1.3 懸浮紅細胞制備（以下簡稱紅懸組） 應用一次性使用普通四聯血袋采集ACD－B抗凝全血40袋（每袋200mL），采集后儲存于（4±2）℃冰箱過夜。第2天3 820r／min離心20 min，去除上層血漿，添加MAP制備成懸浮紅細胞。

1.4 樣品留取和檢測 3組血液制備后置于（4±2）℃冰箱中儲存，分別于第14、21、28、35天留取血液標本，用全自動血細胞計數儀（Beckman-Coulter AC-T diffⅡ）直接測定血紅蛋白（Hb）和紅細胞比容（Hct），用鄰甲聯苯胺法測定游離血紅蛋白（FHb），計算兩組的紅細胞溶血率。紅細胞溶血率（%）＝

1.5 統計學方法 用SPSS13.0軟件處理數據，數據以x±s表示，采用t檢驗對數據進行統計分析，以P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

去白組游離血紅蛋白絕對值和溶血率均高于同期紅懸組，且去白1組與紅懸組，去白2組與紅懸組相比較，差異有統計學意義（P＜0.05）。但兩組不同方法過濾組（去白1組和去白2組比較）溶血率的差異無統計學意義（P＞0.05），詳見表1、表2。紅懸組和去白1、2組儲存期末的溶血率均小于0.8%，符合歐洲標準和AABB標準。

表1 紅懸組和去白組儲存期上清液游離血紅蛋白結果的比較（x±s，g／L）

表2 紅懸組和去白組儲存期溶血率結果的比較（%）

3 討 論

由于去白細胞血液能降低多種輸血不良反應的發生，許多發達國家采用血液全面白細胞去除（universal leukocyte-reduction，ULR）策略以提高血液安全［2］。但在臨床應用時，有血站接到報告有去白細胞血液出現肉眼可見溶血現象，認為可能和血液過濾過程中紅細胞機械性損傷有關，而加拿大學者Gyongyossy-Issa等認為白細胞濾除后，避免了白細胞死亡后細胞內水解酶的釋放，降低了儲存期內紅細胞的溶血率［3］。由于紅細胞溶血影響著輸血的有效性和安全性，歐盟和AABB均規定以儲存期末溶血率小于0.8%作為血液的溶血程度標準。去白細胞血液的溶血結果還受到獻血者個體差異、過濾器類型、原始白細胞濃度、過濾時血液儲存時間和過濾溫度等因素的影響［4］。

實驗結果表明，兩種不同制備流程的去白組和紅懸組在儲存期間的紅細胞溶血率均符合歐盟和AABB標準的要求（＜0.8%），兩種不同制備流程過濾的去白組溶血率結果高于同期未過濾組（紅懸組），但采用全血濾除白細胞和制備成懸浮紅細胞后再濾除白細胞，二者溶血程度差異無統計學意義（P＞0.05）。采用懸浮紅細胞過濾的方式，主要是為確保血站在6h內制備新鮮冰凍血漿的需求，但采用這種方式，需使用無菌連接器將去白細胞濾器與懸浮紅細胞血袋連接，成本較高。采用全血直接濾除白細胞成本較低，其缺點是整個操作流程耗時較長，有部分血液無法制備成新鮮冰凍血漿（6h內無法制備完成）。以上兩種濾除白細胞的模式，血站可以根據自己工作流程的需要，做相應選擇。根據實驗結果，作者認為過濾組同期溶血率較高的現象可能和過濾過程的機械擠壓作用有關，但是過濾過程對于儲存期間溶血變化影響很小，而且溶血結果對照國外標準都處于可以接受的范圍內。

但是也要看到，有部分血液保存期末溶血率接近0.8%時，上清液的游離血紅蛋白檢測值已達到了2.1g／L左右。這種上清液的顏色較深，可能會引起用血醫院關于血液溶血的投訴，因此在全面推行去白細胞懸浮紅細胞時，一是要結合國外標準與醫院做好宣教工作，二是制備后盡早發往臨床，同時可建議臨床適當縮短去白細胞懸浮紅細胞的保存期，根據本文的實驗數據，可建議臨床盡量在28d內將去白細胞懸浮紅細胞輸注入患者體內，以更好地確保輸血的有效性。

［1］ Beckman N，Sher G，Masse M，et al.Review of the quality monitoring methods used by countries using or implementing universal leukoreduction［J］.Transfus Med Rev，2004，18（1）：25-35.

［2］ Bassuni WY，Blajchman MA，Al-Moshary MA.Why implement universal leukoreduction？［J］.Hematol Oncol Stem Cell Ther，2008，1（2）：106-123.

［3］ Gyongyossy-Issa MI，Weiss SL，Sowemimo-Coker SO，et al.Prestorage leukoreduction and low-temperature filtration reduce hemolysis of stored red cell concentrates［J］.Transfusion，2005，45（1）：90-96.

［4］ Masse M.Universal leukoreduction of cellular and plasma components：process control and performance of the leukoreduction process［J］.Transfus Clin Biol，2001，8（3）：297-302.