標本溶血對生化檢驗結果的影響

李明宏

（甘肅省靖遠縣中醫院檢驗科 730600）

筆者在日常工作中經常會遇到各種原因導致的標本溶血，了解標本溶血對部分檢驗結果的影響，可以更好地預防標本溶血，并提高檢驗結果的準確性和可信性。為了能及時客觀地分析生化指標的變化是否具有臨床意義，應當詳細了解標本溶血對各項血液生化指標的影響。本文觀察了部分常用生化指標在標本溶血前后檢測結果的變化，目的在于為標本溶血時血液生化結果分析提供一定的參考依據，盡量增加生化測定數據的可靠性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 儀器與試劑 邁瑞BS-400全自動生化分析儀。

1.2 生化指標的測定 分別測定總蛋白（TP）、天門冬氨酸氨基轉移酶（AST）、乳酸脫氫酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、α-HBD、γ-谷胺 酰 轉 肽 酶 （γ-GT）、總 膽 紅 素 （TBIL）、直 接 膽 紅 素（DBIL）、丙氨酸氨基轉移酶（ALT）、清蛋白（ALB）、總膽固醇（TC）、三酰甘油（TG）、高密度脂蛋白（HDL）、低密度脂蛋白（LDL）生化分析試劑盒，試劑全部用邁瑞原裝試劑。

1.3 溶血的血清標本的制備 健康體檢者50例，禁食不禁水12h，各抽取靜脈血4mL，分別注入兩支干燥試管各2mL。其中一支讓其自然凝固，另一支在血液凝固前用金屬棒攪拌使其溶血，然后以3 000r／min離心10min，去上清液分別為未溶血和溶血的血清標本。

1.4 統計學方法 所有數據均采用SPSS14.0統計學軟件進行處理分析，P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結 果

研究結果顯示，由于標本出現溶血現象，會使得TP、AST、ALT、LDH、CK、γ-GT幾項指標發生顯著的改變，差異有統計學意義（P＜0.05）。而 TBIL、DBIL、ALB、TC、TG、HDL、LDL幾項指標無顯著改變，差異無統計學意義（P＞0.05），具體生化檢驗結果見表1、2。

表1 溶血前后有明顯變化的生化檢驗結果比較（x±s）

表2 溶血前后無明顯變化的生化檢驗結果比較（x±s）

3 討 論

3.1 AST 人紅細胞中AST活性約為血漿中的40倍。當標本溶血時，勢必引起血清中AST活性的升高，從而使溶血標本的結果明顯高于未溶血標本［1］。AST主要是作為肝損傷的敏感指標，測定結果的偏高會導致假陽性的產生。故出現溶血標本應當在報告中注明。

3.2 ALT 細胞內ALT含量比血漿中高約7倍，因此溶血后ALT含量的增高主要來源于細胞內ALT的大量釋放。可見與AST相比，ALT受溶血影響小些，故對標本的要求低一些，但在分析結果時要注意考慮溶血的影響。

3.3 TBIL 筆者使用的試劑盒是用重氮法測定總膽紅素的，最后生成紫紅色的耦氮膽紅素，主要在波長540～560nm處有光吸收。而血紅蛋白在波長540～550nm處有光吸收［2］，恰與耦氮膽紅素的比色波長相近。因此溶血后紅細胞破裂時大量血紅蛋白進入血清，勢必造成總膽紅素測定值的升高，是總膽紅素的正向干擾因素。此外，由于血紅蛋白與重氮試劑反應形成的產物可破壞耦氮膽紅素，溶血對重氮法測定膽紅素同時存在負向干擾，使測定結果偏低，但該作用較輕微［3］，因此溶血后由于血紅蛋白對測定結果的干擾，膽紅素的測定結果往往偏高。

3.4 TP 用雙縮脲法進行TP的測定，其測量的主波長是540nm。在555nm處血紅蛋白會出現吸收峰，紅細胞溶血破裂以后，大量血紅蛋白會釋放到血清導致測量結果偏高［4］。

3.5 α-HBDH、LDHE LDHE在紅細胞內的濃度是紅細胞外的160倍，輕微的溶血會引起結果偏高。LDHE的活力主要由α-HBDH來進行反映，他們產生差異的原理一樣。

3.6 CK 采用連續監測速率法對CK進行測定。在紅細胞內以及幾乎全部組織中都含有腺苷酸激醇（AK），對三磷酸肌酸和二磷酸腺苷（ADP）生成肌酸和三磷酸腺苷（ATP）的反應產生催化作用，反應過程中產生的ATP會引起CK的活性增加致使結果偏高。

3.7 γ-GT 其溶血標本 Hb在500mg／L以上會導致γ-GT的活性降低，致使結果降低。

3.8 對肝炎病毒檢測結果的影響 溶血可造成假陽性的檢測結果。有作者報道，當濃度大于25%的紅細胞發生破裂溶血，即可導致乙型肝炎病毒表面抗原檢測的假陽性。

3.9 對人類免疫缺陷病毒（HIV）抗體檢測的影響 據朱同華對100份標本抗-HIV的檢測結果（OD值）的研究，發現92%的溶血標本的OD值高于對應的非溶血標本的OD值，溶血可以使抗-HIV檢測結果的OD值平均升高0.011，可能造成假陽性的檢測結果。

3.10 防范對策 標本溶血是指在采集、運送、分離和保存血液的過程中，由于各種原因，尤其是操作不當引起的紅細胞在體外破裂，紅細胞的破裂會造成大量的細胞內物質進入血漿以及血清稀釋等系列變化，而造成的溶血現象。造成標本溶血的因素有：（1）現在大部分醫院都采用真空管采血，有時因真空采血管負壓太大，血液進入采血管后由于血細胞之間的激烈碰撞，導致細胞破裂發生溶血［5］。（2）因為試管質量不過關，真空采血管在制造過程中，試管內壁處理不好導致血細胞掛壁而造成血細胞破裂導致溶血。（3）現在的真空采血管多由于硅化或加入促凝劑后，殘留的有機溶液對血細胞的破壞作用，導致血細胞破裂造成溶血［6］。（4）采血器具不合格，臨床所用采血器具均為一次性塑料制品，某些產品的增型穩定劑不合格，并因聚合不完全而有毒性，可引起血液標本溶血。（5）另外塑料材質的促凝管促凝劑的配方跟血液標本的質量有很大關系。由于塑料管的凝血功能不如玻璃管理想，在正常情況下，血液標本放置在無促凝劑的塑料管中，血液徹底凝固需要2h以上，如此漫長的時間已無法滿足臨床檢測的需要，所以必須在塑料管內加入適量的促凝劑。除某些促凝劑配方不當，影響檢測結果外，血液與促凝劑快速接觸導致血液急劇凝固也可引起血細胞破裂而產生溶血現象。（6）分離操作不當，用破裂的玻璃管盛放血標本，離心時細胞破裂，標本溶血；離心時提速太快，離心管和套管底部有硬物，使紅細胞過度擠壓，產生溶血。文獻報道因分離操作不當導致標本溶血占41.2%［7－8］。（7）護士采血不規范也容易造成標本溶血，如：操作者采血時將止血帶扎得太緊，時間過長，采血時負壓過大，將血液從注射器中推到試管中，紅細胞受外力而溶血；采血時定位進針不準針尖在靜脈中探來探去，造成血腫和血樣溶血；血液與抗凝劑混勻時，試管用力過猛或運輸時動作過大；相對試管中的抗凝劑來說采血量不足，由于滲透壓的改變發生溶血；靜脈穿刺處用乙醇消毒，乙醇未干即開始采血也會發生溶血；注射器和針頭連接不緊，采血時空氣進入，產生泡沫，發生溶血；皮膚穿刺時，為增加血流而擠壓穿刺部位或從皮膚上直接吸血，都可以造成溶血。

以上諸多原因都會造成標本溶血，提示必須做好檢驗前工作，具體到護士的規范采血、采血管的選擇以及檢驗工作者做血液分離等等。溶血后AST、TBIL、ALT比溶血前高；CRE比溶血前低。血液標本檢驗前的諸多因素均可使紅細胞成分遭到破壞產生溶血，從而使檢驗結果失去真實性和準確性，影響疾病的診斷和治療。（1）應掌握采集血液標本的正確方法：臨床采血多選用肘正中靜脈或貴要靜脈，嬰幼兒多選用頸外靜脈或股靜脈，避免選擇過細的靜脈，更不要從輸液管處采血；遇到采血困難的患者，扎止血帶時間不可過長，亦不要反復拍打穿刺部位，以防機械刺激造成溶血。正確的靜脈采血方法是熱敷穿刺部位，等血管充盈后再采血，無法采集合格標本時，將采集的帶泡沫的血液標本立即送檢，不要使其干燥而影響檢測。（2）嚴格按照操作規程辦事：采血時要選擇好穿刺部位，常規消毒待消毒液干燥后，找準血管，爭取一針見血，并徐徐轉動針栓采集血液，向試管注血時，要沿著試管壁緩慢注入，不得將泡沫注入試管。（3）妥善保存標本：標本送入檢驗科后，應放在室溫下保存，以防止發生溶血。在血液標本的運輸過程中，防止過度振蕩而發生溶血。（4）嚴把注射器及試管的質量關：嚴格把握一次性注射器、一次性試管的進貨渠道，保證檢驗結果的準確性，減少患者不必要的經濟負擔和痛苦。因此，在采血、檢驗過程中必須注意細心操作，并注意注射器、針頭和試管的質量。在報告檢測結果時要注意溶血的影響，并在數據中加以標注。

綜上所述，造成標本溶血的原因是多方面的，為了避免標本溶血對檢驗結果造成的影響，應做好從選擇采血器械到護士采血規范各方面工作。標本溶血會對部分檢驗結果造成嚴重影響，在測定中應盡量避免標本溶血，如標本溶血應充分考慮對部分檢驗項目的影響，并報告臨床醫生，如果必要建議重新采集樣本。

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