陳錦龍 白少偉 胡 娟,2 龐文生
1.福建中醫藥大學藥學院,福建 福州 350122;2.福建中醫藥研究院,福建 福州 350003
太子參多糖具有增強機體免疫、潤肺鎮咳、降低血糖、改善胰島素抵抗等作用,是太子參重要的一類活性成分[1-3]。通過考察閩產柘榮“柘參2號”太子參總多糖含量,為開發閩產柘榮太子參多糖有效部位積累科學數據。
中藥材提取罐中試設備 (武漢中大制藥設備有限公司);冷凍干燥儀 (德國CHRIST公司);TU-1800PC紫外可見分光光度計 (北京普析通用儀器有限公司)。
無水葡萄糖對照品 (中國藥品生物制品檢定所,批號110833-200302);濃硫酸、苯酚等試劑均為分析純;水為超純水;“柘參2號”太子參,由福建省閩東力捷迅藥業有限公司GAP種植基地提供。
2.1 太子參多糖提取與精制 將太子參粉碎 (20目),置于中藥提取罐中,按料液比1∶5,加85%乙醇溶液,室溫下浸泡1h,加熱提取2次,1.5h/次,過濾,殘渣揮干乙醇,按料液比1:5加入水,浸泡1h;100℃加熱,提取2次,2h/次,過濾,合并濾液,減壓濃縮至為0.5g/ml生藥量。用Sevage法除去蛋白,離心,上清液用終濃度90%乙醇沉淀,靜置24h,4000r/min離心15min,沉淀用無水乙醇,丙酮,乙醚依次洗滌多次,冷凍干燥,即得精制太子參多糖。
2.2 樣品供試液的制備 精密稱取太子參粉末0.10g,置于100ml圓底燒瓶中,加85%乙醇100ml于100℃溫度回流提取1.5h,過濾,藥渣加入100ml蒸餾水100℃溫浸提取2h,趁熱過濾,藥渣加熱蒸餾水洗滌數次,洗液并入濾液,冷卻后移入100ml容量瓶中,蒸餾水定容備用。
2.3 標準曲線 精密稱取10mg經過105℃減壓干燥至恒重的D-無水葡萄糖,加水溶解,定容至100ml量瓶中,作為對照品貯備液。采用苯酚硫酸法[4],以葡萄糖濃度(μg/ml)為橫坐標,吸光度為縱坐標繪制標準曲線,得回歸方程 y=0.019x+0.0272,r=0.9991,在10~50μg/ml線性關系良好。
2.4 換算因子測定 精密稱取干燥至恒重的精制太子參多糖10mg,加蒸餾水溶解,定容至100ml量瓶中,搖勻,精密吸取溶液1.0ml,照標準曲線制備項下的方法,測定多糖供試液中葡萄糖的濃度,按f=W/(C×D)計算換算因子。式中W為多糖的重量 (μg),C為多糖溶液中葡萄糖濃度 (μg/ml)測定值,D為稀釋后多糖溶液體積 (ml);測得換算因子f=1.692。
2.5 樣品多糖含量測定 精密吸取10個批次太子參供試液各0.5ml于具塞試管中,按標準曲線制備項下方法操作,測定葡萄糖的含量。按下式計算多糖含量:多糖含量=為樣品溶液中葡萄糖濃度測定值 (μg/ml);D為稀釋后樣品溶液體積,f為換算因子,W為樣品溶液中太子參重量。

表1 10個批次閩產柘榮太子參多糖含量測定結果
據文獻報道,江蘇產的太子參多糖含量在3.69%~24.47%,貴州產的太子參多糖含量在7.83%~22.39%,福建產的太子參多糖在10.50% ~23.93%[4-9];本文測定10個批次“柘參2號”太子參多糖含量在18.67%~25.43%之間,平均含量為21.76%。柘榮縣太子參種植面積3.2萬畝,年產量4900多噸,產銷量占全國三分之二,2005年太子參GAP基地通過認證。閩產柘榮太子參多糖含量較高并相對穩定,對其研究及開發具有廣闊的前景。
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