4種梅毒血清學(xué)檢測方法的比較與分析

沈 樟，洪清瑜

(湖州市疾病預(yù)防控制中心，浙江 湖州 313000)

·基礎(chǔ)與臨床研究·

4種梅毒血清學(xué)檢測方法的比較與分析

沈 樟，洪清瑜

(湖州市疾病預(yù)防控制中心，浙江 湖州 313000)

目的：探討梅毒的4種檢測方法的敏感性和特異性，建立適合實驗室的梅毒檢測流程和報告系統(tǒng)，為臨床提供快速可靠的參考結(jié)果。方法采用TP-ELISA、RPR、TRUST、TPPA法對經(jīng)臨床癥狀及病歷資料確診為梅毒陽性的標(biāo)本528份和健康者血清108份血清學(xué)進(jìn)行檢測。結(jié)果ELISA、RPR、TRUST及TPPA法檢測梅毒患者血清敏感性分別為97.93%,64.96%,64.02%及98.67%；特異性分別為98.15%,94.44%,95.37%及99.07%。結(jié)論TPPA和ELISA都有較高的敏感性和特異性，梅毒患者檢測陽性率高，同時假陽性率低。TRUST和RPR方法比較簡單，結(jié)果易觀察，但敏感性較低。而ELISA 同樣具有較高的敏感性和特異性，與TPPA相關(guān)性好，同時ELISA試劑成本低，操作方便，是大批量樣本篩查的理想方法。

梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗； 梅毒螺旋體明膠凝集試驗； 甲苯胺紅不加熱血清試驗； 梅毒快速血漿反應(yīng)素； 梅毒抗體

Abstract：[Objective] To compare the specificity and sensitivity of four kinds of commonly used clinical tests of TP and to discuss application value of these four screening method. [Method] 528 serum samples from syphilis patients and 108 serum samples from control group were tested with ELISA, RPR, TRUST, TPPA methods. [Result]The sensitivities of ELISA, RPR, TRUST, TPPA are 97.93%, 64.96%, 64.02% and 98.67%, respectively. The specificities of ELISA, RPR, TRUST, TPPA are 98.15%, 94.44%, 95.37% and 99.07%, respectively. [Conclusion] These four methods have different advantages. They should be used in conjunction with the situation in practice, to maximize the detection rate and reduce the misdiagnosis rate of misdiagnosis.

Keywords:TP-ELISA； TPPA； TRUST； RPR； TP

梅毒是由蒼白密螺旋體感染所引起的一種慢性經(jīng)典的性傳播疾病，幾乎可引起人體全身所有組織和器官的損害和病變，乃至死亡[1]。近年來，我國梅毒的發(fā)病人數(shù)呈急劇上升趨勢[2]，嚴(yán)重危害了人類健康。而且現(xiàn)在人群對抗生素的廣泛使用，使得部分患者呈隱形感染，并無臨床表現(xiàn)，在診斷時很容易造成漏診和誤診。選擇一種靈敏度高、特異性強(qiáng)的檢測方法對梅毒的診斷、治療和控制至關(guān)重要。現(xiàn)臨床上常用的實驗室檢測方法有TP-ELISA、RPR、TRUST、TPPA法等，但如何選擇或聯(lián)合檢測各實驗室不盡相同。本文就此進(jìn)行實驗研究，現(xiàn)將研究結(jié)果報告如下。

1 資料與方法

1．1 一般資料

收集2009年1月至2011年10月本中心皮膚性病科門診就診患者經(jīng)臨床癥狀及病歷資料確診為梅毒陽性的血清標(biāo)本528份。健康者血清108份來自本實驗室，經(jīng)查甲、乙、丙型肝炎及梅毒、艾滋病毒均為陰性樣本。

1．2 試劑

TP-ELISA試劑盒由北京華大吉比愛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，RPR和TRUST試劑盒是由上海榮盛生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)， TPPA試劑盒是由日本富士瑞必歐株式會社生產(chǎn)。所有的試劑均在有效期內(nèi)使用。

1．3 方法

標(biāo)本均采用TP-ELISA、RPR、TRUST、TPPA法進(jìn)行梅毒血清學(xué)檢測，具體操作方法嚴(yán)格按照標(biāo)準(zhǔn)作業(yè)程序進(jìn)行。結(jié)果應(yīng)用SPSS 17.0 軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)處理，采用χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 4種方法檢測636份血清結(jié)果

TPPA檢測梅毒患者血清檢出率最高，達(dá)98.67%，檢出率最低的是TRUST，為64.02%；在108份對照血清中，檢測率最低的是TPPA方法，僅為0.93%，檢出率最高的是RPR方法，為5.56%。具體檢出情況見表1。

表1 528例梅毒患者與108例對照組4種方法檢測結(jié)果

2.2 4種檢測方法的敏感性、特異性結(jié)果

4種檢測方法特異性均較高，達(dá)95%左右；其中TPPA最好，達(dá)99.07%；敏感性中，TPPA最好，達(dá)98.67%； RPR和TRUST敏感性相對較低。具體情況見表2。

表2 4種檢測方法的敏感性、特異性(%)

注：敏感性=梅毒患者陽性例數(shù)/梅毒患者總檢測數(shù)。特異性=非梅毒患者陰性例數(shù)/非梅毒患者總檢測數(shù)；陽性預(yù)測值= 梅毒患者中陽性例數(shù)/陽性結(jié)果總例數(shù)；陰性預(yù)測值=非梅毒患者中陰性例數(shù)/陰性結(jié)果總例數(shù)

3 討論

梅毒螺旋體感染后，機(jī)體可產(chǎn)生特異性的梅毒螺旋體抗體。TPPA可檢測血清中梅毒特異性抗體，靈敏度高，特異性好；并且由于梅毒螺旋體感染后，此抗體可在體內(nèi)持續(xù)存在，檢測結(jié)果不隨病情發(fā)展和治療而變化[3]。TPPA是將純化的致病性梅毒的精制菌株成分包被在人工載體明膠粒子上，減少了生物學(xué)假陽性的發(fā)生，很少發(fā)生非特異凝集，故TPPA作為梅毒的檢測方法，對梅毒的檢測結(jié)果都有較好的穩(wěn)定性。本組TPPA檢測敏感性98.67%，特異性達(dá)到99.07%。

酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)是利用基因重組梅毒螺旋體的特異性抗原TP47和TP17包被酶標(biāo)板孔，采用雙抗原夾心法檢測梅毒螺旋體的特異性IgG和IgM抗體，在梅毒各期均有較高的敏感性，且假陽性率低，其檢測靈敏度和特異性均在98%左右，是一種適合大規(guī)模篩查和臨床診斷的新方法[4]。本組TPPA與ELISA比較，敏感性和特異性差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，ELISA敏感性高達(dá)97.93%，特異性98.15%。梅毒螺旋體感染后機(jī)體可產(chǎn)生非特異性的類脂質(zhì)抗體。TRUST和RPR是一種非特異性的血清學(xué)方法，檢測的是血清反應(yīng)素。TRUST法只對二期梅毒有較高的診斷價值，對治療期間或處于非活動期的梅毒檢出率低，易出現(xiàn)假陰性，對一、三期梅毒檢出率也較低，故TRUST對梅毒的檢出敏感性也相對降低。本組TRUST檢測敏感性僅有64.02%，可能與以上原因有關(guān)。RPR主要檢測梅毒患者血液中的非特異性反應(yīng)素，該反應(yīng)素一般在軟性下疳出現(xiàn)4周后才能檢出，經(jīng)治療后滴度迅速下降，在疾病非活動期和治療后容易消失。對二、三期梅毒和治療后梅毒的檢出率均低，結(jié)果易受試驗條件及梅毒之外疾病的影響[5]。表2顯示本組RPR檢測敏感性僅有64.96%。而且陽性血清滴度各不相同，為臨床明晰提示現(xiàn)癥梅毒的狀態(tài)及傳染性的強(qiáng)弱。所以該方法對疾病嚴(yán)重程度的判斷、療效觀察、是否復(fù)發(fā)或再感染的判斷有非常重要的意義。

本研究發(fā)現(xiàn)TPPA和ELISA都有較高的敏感性和特異性，梅毒患者檢測陽性率高，同時假陽性率低。TRUST和RPR方法比較簡單，結(jié)果易觀察，但敏感性較低。然而TPPA雖具有很高的敏感性和特異性，但不利于大批量樣本篩查，而ELISA同樣具有較高的敏感性和特異性，與TPPA相關(guān)性好，同時ELISA試劑成本低，操作方便，是大批量樣本篩查的理想方法，而且結(jié)果和原始數(shù)據(jù)易于保存，可作為早期梅毒檢測較理想的方法，梅毒患者在治愈后相當(dāng)長的時間內(nèi)梅毒抗體IgG仍可為陽性，所以梅毒抗體陽性只能說明正處于感染期或曾經(jīng)感染過，不能判斷梅毒疾病活動與否，更不能作為療效監(jiān)測手段。如果將TPPA和ELISA聯(lián)合用于梅毒血清的檢測，將會進(jìn)一步提高梅毒檢測的敏感性和特異性。

綜上所述，4種方法在臨床上的意義不同， ELISA法是梅毒篩查的理想方法。對于陽性標(biāo)本應(yīng)做TP-PA確認(rèn)。用于評價療效可選用TRUST和RPR法，也可幾種方法聯(lián)合使用。值得重視的是梅毒的血清學(xué)檢查并不是梅毒診斷的唯一依據(jù)，對梅毒檢驗結(jié)果的最后解釋，還必須結(jié)合患者的病史、臨床表現(xiàn)及抗梅毒治療情況等進(jìn)行綜合分析，才能作出正確的判斷。

[1]陳志強(qiáng)，王千秋. 性病臨床手冊[M]. 上海：上海科學(xué)技術(shù)出版社， 2004，8.

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TheComparisonStudyandanalysisoffourserologicaltestsforsyphilis

SENZhang，HONGQinyu

(Huzhou Center for Disease Control and Prevention，Zhejiang 313000，China)

R446

B

1672-0024(2013)02-0056-03

沈 樟(1980-)，女，浙江湖州人，本科，主管技師。研究方向：皮膚性病檢驗