坎地沙坦酯速釋及緩釋固體分散體的制備研究

張戈輝 范長春 朱燕妮 徐飛瑤 傅璐仙

臺州職業技術學院生化制藥研發中心，浙江臺州 318000

坎地沙坦酯（Candesartan Cilexetil，CC）是一種前體藥，是一種非肽型的血管緊張素Ⅱ（ATⅡ）受體阻斷劑，與血管緊張素（AT1）受體有高度的親和力[1-2]。CC降壓效果強，使用劑量低；對各種程度的腎功能不全及輕中度肝功能受損患者的藥代動力學參數無明顯變化[3-4]。CC不溶于水，絕對生物利用度僅為15%；CC口服后3～4 h血藥濃度達峰，起效慢；消除半衰期為7～9 h；用藥24 h后，血藥濃度為峰值的15%～20%，仍具降壓效果，但抑制作用只有均值的50%[5-6]。速釋SD具有提高藥物釋放速度和生物利用度的作用；緩釋SD具有緩釋和提高藥生物利用度的效果。CC目前的用法都是1天1次，但高血壓發作有晝夜節律的特點，清晨是心血管意外發生的高峰[7]，即所謂的清晨高壓現象，這時藥物降壓作用的大幅降低對患者是非常不利的。本課題用固體分散體技術制備坎地沙坦酯速釋和緩釋固體分散體，將制備方法對體外釋放度的影響進行分析，得到優化工藝條件，以期最后得到釋放性能滿意的速釋及緩釋SD。CC速釋和緩釋固體分散體可以在固體制劑中單獨使用或組合使用，有利于提高CC的生物利用度，同時也可調節藥劑的釋放速度。若將兩種SD以一定的比例組合，既能使藥物快速溶出以利快速起效又能持續穩定釋放藥物提高藥物使用的有效性，這對現有制劑在起效時間長和用藥周期后期降壓作用下降兩方面起到良好的改進作用。

1 儀器與試藥

溶出度儀（RC-8D，天津光學儀器廠），旋轉蒸發儀（RE-52AA，上海亞榮生物儀器廠），紫外分光光度計（UV-1801，北京瑞利分析儀器有限公司）。

坎地沙坦酯（浙江永寧藥業股份有限公司，批號：20110402），坎地沙坦酯標準品（中國藥品生物制品檢定所，批號：100685-201101），乙基纖維素（EC 10cp、EC 20cp、EC 45cp，EC 100cp，美國 Dow），聚乙二醇（PEG）6000（上海強順化學品有限公司），泊洛沙姆188（德國BASF）。

2 方法與結果

2.1 固體分散體與混合物的制備

采用溶劑熔融法和溶劑法[8]制備CC速釋和緩釋固體分散體。速釋SD以PEG6000和泊洛沙姆188為載體，緩釋SD以EC加PEG延緩藥物釋放。

2.1.1 坎地沙坦酯速釋固體分散體的制備 精密稱取一定量的 CC，加入 4 倍量（W/V，g/mL）的丙酮-無水乙醇（2∶1，V/V）的混合溶劑，溶解至澄清；精密稱取一定量的混合載體，加入4倍量（W/V，g/mL）的無水乙醇，適當加熱（低于50℃）并攪拌溶解；將溶解后的CC溶液加入已溶解的載體溶液中，將上述混合液攪拌充分混勻并加熱至60℃；在旋轉蒸發儀中減壓回收溶劑至溶劑充分揮發，冷卻至室溫；將所得固體粉碎至粗顆粒，放入真空干燥器中（壓強5 kPa以下，溫度30℃）干燥24 h，干燥后取出粉碎后過40目篩，置干燥器避光保存。

2.1.2 坎地沙坦酯緩釋固體分散體的制備 精密稱取一定量的 CC，加入 4 倍量（W/V，g/mL）的丙酮-無水乙醇（2∶1，V/V）的混合溶劑，溶解至澄清；精密稱取一定量的混合載體，加入 5～8 倍量（W/V，g/mL）的無水乙醇，適當加熱（低于50℃）并攪拌溶解；將將溶解后的CC溶液加入已溶解的載體溶液中，將上述混合液攪拌充分混勻并加熱至65℃；在旋轉蒸發儀中減壓回收溶劑至溶劑充分揮發，冷卻至室溫；將所得固體粉碎至粗顆粒，放入真空干燥器中（壓強5 kPa以下，溫度30℃）干燥24 h，干燥后取出粉碎，取顆粒尺寸在40～80目之間的粉末置干燥器避光保存。

2.1.3 坎地沙坦酯物理混合物的制備 按制備固體分散體的藥物與載體的比例分別稱取藥物與載體，研磨混勻，過40目篩即得。

2.2 體外溶出度試驗

溶出度的測定方法參照《中國藥典》2010年版附錄XC第二法操作。精密稱取含CC 16 mg的固體分散體粉末，參照上述藥典中的溶出度槳法進行測定，釋放介質為0.5%的十二烷基硫酸鈉（SDS）溶液，轉速 50 r/min，介質溫度（37.0±1.0）℃，依法操作。 速釋性固體分散體，在 1、2、5、10、15、20、30、45、60 min 取樣；緩釋性固體分散體的取樣時間為 0.5、1、2、4、6、8、10、12。 分別抽取溶液 6 mL，同時補充6 mL溶出介質，用0.8μm微孔濾膜濾過，以空白溶劑（含0.5%SDS）對照，在256 nm的波長處分別測定吸光度值，繪制溶出曲線。

2.3 速釋固體分散體的篩選與優化

2.3.1 載體的選擇及比較 單一載體將CC與載體總量之間的比例固定在1∶5，制備固體分散體，并將其溶出曲線與同樣比例的PEG6000與CC的物理混合物、泊洛沙姆188與CC的物理混合物進行比較。由圖1可以看出兩種載體所制備的SD均對溶出度有較大的改進，但效果基本接近。

2.3.2 混合載體比例的選擇 從單一載體比較看，PEG6000與泊洛沙姆188效果非常相近，從成本角度應優先考慮使用PEG6000，而泊洛沙姆作為出色的表面活性劑有較強的助溶作用可適當添加，提高溶出效果。

通過單因數考察，在藥物與載體的比例為1∶2～1∶7時SD均有較好的溶出。為考察PEG中添加泊洛沙姆后SD的效果，以溶出曲線中達到75%累積溶出百分率所需時間為響應值，進行二因素實驗設計，并用響應面軟件Design-Expert 7.0分析。以CC原料用量為1；因素X1為PEG6000用量，范圍：2～7；因素 X2為泊洛沙姆 188 用量，范圍：0～4。因素與水平劃分見表1。

表1 因素與水平劃分

經實驗數據處理得到回歸方程：R1=4.01800+0.020797X1+0.037 249X2+0.025 000X1X2+1.242 25X12+0.437 25X22。PEG與泊洛沙姆用量對溶出速度的影響見圖2，優化后SD的溶出曲線見圖3。

用軟件分析，得到最優點X1=4.48，X2=1.94，按優化條件制備3批SD，進行溶出度測試，結果75%累計溶出所需時間為4.3 min左右，與預測的4.0 min接近。

2.4 緩釋CC固體分散體的篩選與優化

由于緩釋效果難以用單一指標考察效果，所以根據SD制備通常的配方比例范圍，用單因素方法加以考察。2.4.1載體的選擇及比較 CC與載體總量之間的比例固定為1∶5，釋放調節劑PEG6000與EC的比例固定為1∶2，考察 10cP、20cP、45cP、100cP 4 種 EC 制備的 SD 的緩 釋效果。從結果看，各種EC所得SD均有緩釋效果，但黏度較高的45cP、100cP在14 h內不能完全釋放藥物。不同黏度EC制得SD的溶出曲線見圖4。

2.4.2 釋放調節劑的比例選擇 通過載體選擇，發現緩釋SD中以用黏度為10cP或20cP的EC均有較好的釋放效果，而10cP的EC效果更好。將CC與混合載體總量的比例保持在1∶5，選用10cP的EC為緩釋SD載體，以不同比例的PEG6000為釋放調節劑，考察SD的緩釋溶出情況。可見，PEG在載體中的含量低于30%時會使SD的釋放不完全；而PEG含量在50%或更高時，釋放速度過快；PEG在30%～40%之間，緩釋效果較好，12 h內有持續釋放。不同比例PEG制得SD的溶出曲線見圖5。

2.4.3 藥物與載體的比例選擇 根據上述結果，將釋放調節劑PEG在載體中的比例固定在35%，調整藥物與載體量之間的比例，考察緩釋SD的溶出效果。結果表明當載體用量較少，會使溶出不完全；載體用量大較大時，會因溶出阻力大，導致14 h內溶出不全；而載體用量適中（藥物與載體比例為 1∶4、1∶5、1∶6）時，12 h 內緩釋效果較好。不同藥物-載體比例制得SD的溶出曲線見圖6、7。

3 討論

國內已有采用PVP K30為載體，甲醇和二氯甲烷為混合溶劑的CC固體分散體的制備研究[9]，但由于采用毒性大的溶劑和吸濕性高載體，不利于實際應用。

速釋SD以PEG6000、泊洛沙姆188或兩者的混合物為載體制備，均能達到快速的釋放效果，且釋放完全；在PEG6000中添加30%左右的泊洛沙姆188，可以使溶出速率有一定提高。

對緩釋SD制備，藥物與緩釋載體及水溶性調節劑（致孔劑）之間的比例，直接影響SD的溶出速度、溶出總量及溶出曲線的形狀[10]。各種黏度EC為載體主要成分制得的SD均有較好的緩釋效果，但高黏度會使釋放不完全。EC載體中與水溶性的PEG6000比例過高，會使釋放過快；比例過低，釋放偏慢且釋放不完全；PEG600在載體中的量以30%～40%比較合理。載體與藥物的比例過小，不容易形成有效的分散作用，導致釋放不完全；載體比例過大，會使釋放速度變慢。藥物與載體比例在1∶4～1∶6之間時，緩釋SD在12 h內有連續且較為穩定的釋放。

[1]Noda M，Shibouta Y，Inada Y，et al.Inhibition of rabbit aortic angiotensin Ⅱ（AⅡ）receptor by CV-11974，a new nonpeptide AII antagonist[J].BiochenPharmacol，1993，46（2）：311-318.

[2]Sever P，Michel J，Voet B.Candesartan cilexetil（CC）：a meta-analysis of time-to-effect relationship[J].Am J Hypertens，1998，11（4）：79.

[3]Buter H，Naris G，de Zeeuw D，et al.Pharmacokinetics and pharmacodynamics of candesartan cilexetil in patients with normal to severely impaired renal function[J].Eur J Clin Pharmacol，1999，54（12）：953-958.

[4]Hoogkamer JF，Kleinbloesem CH，Ouwerkerk M，et al.Pharmacokinetics and safety of candesartan cilexetil in subjects with normal and impaired liver function[J].Eur J Clin Pharmacol，1998，54（4）：341-345.

[5]Bonner G，Fuchs W.Long-acting blood pressure reduction by candesartan cilexetil in patients with hypertension[J].Curr Med Res Opin，2005，21（6）：935-940.

[6]Meineke I，Feltkamp H，Hogemann A，et al.Pharmacokinetics and pharmacodynamics of candesartan after administration of its pro-drug candesartan cilexetil in patients with mild to moderate essential hypertension-a population analysis[J].Eur J Clin Pharmacol，1997，53（3-4）：221-228.

[7]Weber MA，Fodera SM.Circadian variations in cardiovascular disease：chronotherapeutic approaches to the management of hypertension[J].Rev Cardiovasc Med，2004，5（3）：148.

[8]陸彬.藥物新劑型與新技術[M].北京：人民衛生出版社，2003：12-15.

[9]王美榮，王利珍，林建英.坎地沙坦固體分散體的制備及溶出度、穩定性研究[J].中國現代應用藥學，2011，28（7）：654-658.

[10]王美榮，吳小青，許海龍，等.曲美他嗪固體分散體的制備及緩釋性能研究[J].中國新藥雜志，2012，21（12）：1401-1406.