獐牙菜苦苷的衍生化研究

黃飛燕，李干鵬，吳健君，唐榮平，張應紅

（1.臨滄師范高等專科學校 人事處，云南 臨滄 677000；2.云南民族大學 化學與生物技術學院 民族藥資源化學重點實驗室，云南 昆明 650500；3.臨滄市鎮康縣忙丙中學，云南 臨滄 677000）

獐牙菜苦苷屬于裂環烯醚萜類氧糖苷，是龍膽科獐牙菜屬植物中的主要有效成分之一［1］，獐牙菜苦苷為藥物前體，在體內并不直接發揮藥效，其藥效的主體為經葡萄糖苷酶水解后生成的苷元的進一步代謝產物。經研究，該化合物具有抗膽堿、解痙、鎮痛等作用［2］，日本學者在對獐牙菜苦苷的藥理研究中證實該化合物能擴張毛細血管，激活和促進皮膚細胞的酶系統，提高皮膚的生化功能，還可以治療脫發癥和用于皮膚美容劑，同時獐牙菜苦苷還具有抗癌作用。常軍，胡娜等［3］以獐牙菜苦苷為前體化合物，利用微生物細胞對獐牙菜苦苷進行結構修改，轉化得到紅百金花內酯和（Z）-5-Ethylidene-8-hydroxy-3，4，5，6，7，8-hexahydro-1H—pyrano ［3，4-c］pyridine–1– one。有關獐芽菜苦苷化學轉化的研究未見報道，為研究獐牙菜苦苷的化學活性，對從西南獐芽菜中分離純化的獐牙菜苦苷進行乙酰化反應，分別以乙酸酐及酰氯為反應物在不同條件下對同獐牙菜苦苷進行反應，對反應后的產物進行分離提純及結構鑒定，確定反應主產物為2''，3''，4''，6''-四乙酰基獐牙菜苦苷。

1 實驗部分

1.1 材料與儀器

Agilent 1200型高效液相色譜，艾杰爾半制備 柱［Venusil XBP-C18（10×250 mm）］；VG Autospec-3000型質譜儀；Bruker DRX-400型超導核磁共振儀，TMS為內標；MCI（Merck公司）；甲醇為工業純，重蒸，娃哈哈純凈水，酰氯、乙酸酐、吡啶等溶劑均為分析純；西南獐牙菜采自云南玉溪新平縣哀牢山，經云南中醫學院楊禮攀博士鑒定為西南獐牙菜。

1.2 獐芽菜苦苷的分離鑒定

花期采集的西南獐牙菜全草在室內陰干，稱重（4.5 kg）后粉碎至80目，用80 %的甲醇（料液比1∶2）加熱超聲提取，共8次，每次4 h，提取液過濾、濃縮后（甲醇回收）合并得棕色浸膏約880 g，加水至懸浮狀，用二氯甲烷多次萃取。水溶部分過MCI脫色（甲醇洗脫）后合并，再用打孔樹脂脫糖（甲醇∶水）洗脫，得到水部分156 g、甲醇∶水部分273 g、甲醇部分45 g；水部分及甲醇∶水部分分別用HPLC制備色譜進行制備（溶劑為甲醇∶水為2∶3）分離得到的化合物經核磁共振波譜分析及質譜分析，與參考文獻對照后為獐芽菜苦苷，純度達到98%。

1.3 反應和產物分離

獐牙菜苦苷與酰氯反應：

獐牙菜苦苷與乙酸酐反應：

筆者將反應后的溶液倒入50 mL分液漏斗，加入10 mL純凈水，以氯仿為溶劑反復萃取5次，每次15 mL，合并氯仿；濃縮至20 mL，再用10 mL水進行反萃取；濃縮得到油狀物，運用安捷倫制備色譜，溶劑∶甲醇∶水、乙睛∶水，進行純化。

2 結果與討論

2.1 結構鑒定

產物 無色油狀，分子式為C25H32O13;1H-NMR（400MHz，CD3OD）：δH：1.68 （1H，d，J=14.0Hz，H-6a），1.80 （1H，dt，J=4.8，14.0Hz，H-6b），2.85 （1H，dd，J=1.2，8.8Hz，H-9），4.62 （1H，d，J=8.0Hz，H-1’），5.60 （1H，s，H-1），7.58 （1H，s，H-3）.13C-NMR（100MHz，CD3OD）：δC：99.1 （C-1），155.0（C-3），108.5（C-4），64.5（C-5），33.2（C-6），66.0 （C-7），133.8 （C-8），51.9 （C-9），122.1（C-10），168.0 （C-11），100.8 （C-1’），74.5 （C-2’），77.8 （C-3’），71.4 （C-4’），78.2 （C-5’），62.8 （C-6’），170.6 （C-2’’），171.0（C-3’’），170.0 （C-4’’），169.4 （C-6’’），20.8 （C-2’’’），20.6（C-3’’’），20.6 （C-4’’’），20.6 （C-6’’’）以上數據與文獻［4］對照后，化合物1鑒定為2''，3''，4''，6''-四乙酰基獐牙菜苦苷。

2.2 討論

獐牙菜屬植物種類數量很多，但列入藥典作為藥用和保健的品種很少，因此很有必要加大利用該屬植物資源的力度。本論文以西南獐牙菜為研究對象，對分離得到的獐牙菜苦苷進行乙酰衍生化反應，研究表明獐牙菜苦苷與乙酸酐、酰氯反應均能得到產物2''，3''，4''，6''-四乙酰基-獐牙菜苦苷，反應物結構中-D-glc上的4個羥基上的氫都被乙酰基取代，雖然采用活性較強的酰氯，C-5上的羥基氫仍未被取代，原因可能是空間結構導致C-5上的羥基穩定性較好。反應產物的活性及藥理作用如何，需要進一步的探究。

［1］何廷農，劉尚武，吳慶如.中國植物志（62卷）［M］.北京：科學出版社，1988：408.

［2］馬麗娜，田成旺，徐曉宏，等.獐牙菜屬植物中環烯醚萜類成分及其藥理作用研究進展［J］.中草藥，2008（5）：790-795.

［3］常軍，胡娜，周斌.獐芽菜苦苷的生物轉化研究［J］.化學與生物工程，2011（1）：33-36.

［4］張建勝，王雪梅，董秀華，楊海英，李干鵬.川西獐牙菜化學成分研究［J］.中藥材，2009（4）：511-514.