幾種HBsAg檢測方法的比較與分析

李小毓

幾種HBsAg檢測方法的比較與分析

李小毓

目的分析電化學發光法(ECLIA)、酶聯免疫法(ELISA)和膠體金免疫層析法(GICA)在不同水平乙肝病毒表面抗原(HBsAg)檢測中的結果差異，并進行定量分析與評價。方法選取138例HBsAg低濃度(介于0.5～1.0ng/ml)和214例高濃度(>1.0ng/ml)臨床樣本，分別用ECLIA、ELISA、GICA進行檢測，并與162例非乙肝患者正常血清檢測結果對照，對結果進行統計分析。結果低濃度樣本中，ECLIA、ELISA、GICA檢測HBsAg為陽性的分別為125、133、121例；高濃度樣本中，三種方法靈敏度分別為99.1%、99.5%、98.6%，差異不明顯。結論ELISA和GICA的敏感度和特異度均低于ECLIA。在HBsAg低濃度情況下，ECLIA與ELISA及GICA的靈敏度差異有統計學意義。在HBsAg值高濃度情況下，ECLIA與ELISA的靈敏度差異無統計學意義，ECLIA與GICA的靈敏度差異有統計學意義。

乙肝病毒表面抗原；電化學發光法；酶聯免疫法；膠體金免疫層析法

乙型肝炎是我國目前流行最廣泛、危害最嚴重的病毒性肝炎之一。HBsAg檢測是臨床診斷和治療乙肝病毒感染者病程和傳染性的重要指標[1]。許多高靈敏度的檢測方法先后應用于臨床免疫學檢驗[2]，為定量分析和比較這些方法的差異，我們分別從高水平和低水平HBsAg樣本進行幾種方法的比較，結果如下。

1 資料與方法

1.1樣本來源 收集我院2008年～2011年臨床新鮮血清樣品，分別取HBsAg低水平樣本138例，高濃度樣本214例，并取162例非乙肝患者正常血清樣本作為對照。

1.2試劑和儀器 ECLIA法采用POCHEE601型全自動免疫分析儀及配套試劑(德國羅氏)；ELISA試劑采用北京萬泰生物藥業有限公司產品；GICA法采用美國雅培藥業有限公司提供全自動發光免疫儀器。

1.3方法 在嚴格按試劑盒說明書及儀器操作規程進行操作基礎上，首先對352例乙肝病毒感染者樣本采用時間分辨免疫熒光(TRFIA)檢測確定其HBsAg濃度，確定低濃度和高濃度兩個分組。再分別用ECLIA、ELISA和GICA法對兩個分組及健康對照組進行檢測，確定各組樣本的陽性或陰性。

1.4統計學方法 檢測結果采用SPSS 13.0軟件進行分析處理，結果差異比較采用成對檢驗，為差異具有統計學意義。

2 結果

2.1檢測結果 三種方法檢測低水平組、高水平組和對照組的血清HBsAg結果如表1所示。

表1 三種方法檢測514血清樣本HBsAg結果(例)

2.2結果比較與評價 對三種檢測方法的檢測結果進行統計處理。對于低水平組，三種方法檢測出的陽性樣本分別為125例、133例和121例；對于高水平組，三種方法分別檢測出212例、213例和211例陽性樣本。根據表1數據計算，可以得到三種方法血清HBsAg檢測的靈敏度與特異度，具體如表2所示。

2.3統計學方法 將ECLIA法檢測結果分別與ELISA法和GICA法進行統計分析，通過數據資料的檢驗和差異性分析，得到檢驗結果如表3所示。

表2 HBsAg三種檢測方法的靈敏度與特異度 (%)

表3 ECLIA與ELISA和GICA的結果比較

3 分析與討論

乙肝是我國最常見的感染性疾病之一，HBsAg是乙肝病毒感染后最早出現的血清標志物之一，因此應用免疫技術和方法測定HBsAg是診斷肝炎病毒感染的重要手段[3,4]。隨著免疫學技術的不斷發展，對HBsAg檢測靈敏度要求越來越高。比較現有幾類常見的HBsAg檢測方法在不同HBsAg濃度水平的檢測靈敏度與特異度，對于臨床掌握乙肝病毒感染發生、發展及治療效果等具有重要的意義。

經過檢測結果比較與統計分析可知，ELISA和GICA的敏感度和特異度均低于ECLIA。在HBsAg值低水平情況下，ECLIA與ELISA及GICA的靈敏度差異有統計學意義。在HBsAg值高水平情況下，ECLIA與ELISA的靈敏度差異無統計學意義，ECLIA與GICA的靈敏度差異有統計學意義。ECLIA與ELISA的特異度差異有統計學意義，ECLIA與GICA的特異度差異無統計學意義。ELISA法和GICA發操作簡便，成本較低，尤其是在HBsAg高濃度情況下的檢測靈敏度也較高，適宜于普通患者的乙肝病毒感染情況篩查及確診乙肝患者的臨床檢查。ECLIA法雖然試劑和儀器成本較高，但是在低水平HBsAg情況下，其靈敏度和特異度較高。因此，在實際工作中，應根據不同的環境或需求，選用最優的檢測方法。

[1] 陸再英，鐘南山.內科學.北京：人民衛生出版社，2008:253-254.

[2] 張敏.HBsAg三種檢測方法的實驗室評價.實用醫技雜志，2006,13(18)：3204-3205.

[3] 王利杰，許東亞.電化學發光法和酶聯免疫法檢測低水平HBsAg.中國輸血雜志，2011,24(9)：767-768.

[4] 刑福軍，楊巧林，田衛花.酶聯免疫法與電化學發光法檢測AFP腫瘤標志物結果的對比分析.國際檢驗醫學雜志，2011,32(17)：1997-1998.

473000 南陽市張仲景醫院檢驗科