CyclinD1、Cdk4在子宮內膜癌中的表達與意義

馮玉華 林宇靜

CyclinD1、Cdk4在子宮內膜癌中的表達與意義

馮玉華 林宇靜

目的探討CyclinD1、Cdk4在子宮內膜癌中的表達與意義。方法應用免疫組織化學，檢測20例正常子宮內膜及20例不典型增生子宮內膜和40例子宮內膜癌中的CyclinD1與Cdk 4蛋白的表達情況。結果CyclinD1與Cdk 4的陽性表達在正常子宮內膜、不典型增生子宮內膜和子宮內膜癌中依次增加，組間差異具有統計學意義(P<0.05)，與子宮內膜癌的分化程度，Dukes分期及淋巴結轉移呈正相關關系(P<0.05)。結論CyclinD1與Cdk 4蛋白的過度表達可能在子宮內膜癌的發生、發展、浸潤及轉移中起重要作用，對判斷子宮內膜癌的惡性程度具有一定的臨床意義，還可能作為一種有價值的腫瘤標志物。

子宮內膜癌; CyclinD1; Cdk 4;免疫組織化學

子宮內膜癌起源于子宮內膜腺體的惡性腫瘤，是最常見的女性生殖系統腫瘤之一，是導致死亡的第三位常見婦科惡性腫瘤，其發病率亦逐年升高，目前僅次于宮頸癌，居女性生殖系統惡性腫瘤的第二位。人體腫瘤是一種細胞周期性疾病，其中細胞周期素D1(CyclinD1)和細胞周期依賴激酶4(cyclindependent kinase 4，Cdk 4)被認為是重要的細胞周期因子。CyclinD1可以和Cdk 4結合形成CyclinD1/ Cdk 4復合物，作為細胞周期的正向調節因子，促進了腫瘤細胞的增殖，從而參與腫瘤的發生、發展。本研究擬檢測cyclinD1和Cdk 4蛋白在子宮內膜癌的表達變化，以探討兩者在子宮內膜癌的發生、發展、浸潤及轉移中的作用。

1 資料與方法

1.1組織標本 選取2005年6月至2012年6月中山大學附屬第五醫院病理科保存的資料完整的40例子宮內膜癌為實驗組，同時選同期20例正常子宮內膜及20例不典型增生子宮內膜作為對照組，全部病例均經手術切除和常規病理證實。

1.2方法 CyclinD1單抗、Cdk4單抗、SP試劑盒及DAB顯色試劑盒均購自武漢博士德公司。采用標準化的SP法進行免疫組織化學染色, 同時以PBS代替一抗作空白對照,以已知的結腸癌作陽性對照。

1.3結果判斷 以細胞中相應部位出現棕黃色顆粒為陽性細胞。Cdk4、CyclinD1陽性著色定位于細胞核。兩名病理醫生隨機抽取20個高倍視野，按陽性細胞所占百分比并參考著色強度分級如下：(-)：陽性細胞數<10%；(+)：陽性細胞數10%～24%；(++)：陽性細胞數25%以上。

1.4統計學方法 實驗數據應用SPSS 13.0軟件包, 采用χ2檢驗,P<0.05有統計學意義。

2 實驗結果

CyclinD1在子宮內膜癌組織中陽性表達率24/40(60.0%)與正常子宮內膜組織中陽性表達率2/20(10.0)及不典型子宮內膜組織中陽性表達率7/20(35.0) 對比有顯著性差異(P<0.05)。Cdk4在子宮內膜癌組織中陽性表達率26/40(65.0%)與正常子宮內膜組織中陽性表達率2/20(10.0)及不典型子宮內膜組織中陽性表達率8/20(40.0) 對比有顯著性差異(P<0.05)。(見表1)

CyclinD1陽性表達與子宮內膜癌分化程度低，Dukes分期晚及淋巴結轉移顯著相關(P<0.05)，Cdk4陽性表達與子宮內膜癌分化程度低，Dukes分期晚關系密切(P<0.05)，與淋巴結轉移關系密切(P<0.05)。見表2。

表1 cyclinD1和Cdk 4蛋白在不同的子宮內膜中的表達情況(例，%)

表2 CyclinD1、Cdk4的表達與臨床病理學特征的關系(例，%)

3 討論

腫瘤被認為是一種細胞周期性疾病，細胞周期存在G1/S期和G2/M期兩個關鍵的調節位點，其中以G1/S位點尤為重要，他可以決定細胞是繼續增殖抑或進入G0期還是永久的離開細胞周期進入終末分化及死亡。

Cdk4蛋白是CDKS蛋白家族中重要一員，其含量及活化程度在細胞增殖周期由G1期向S過渡過程中起限速作用。同時Cdk4是一種癌基因[1]，其異常表達可促進腫瘤的發展，與在良惡性腫瘤組織中的表達有明顯的差異，提示有作為腫瘤標志物的可能性，為腫瘤的早期診斷提供依據。有研究表明Cdk4在其他腫瘤中有過表達，如膀胱癌，皮膚癌，食管癌，乳腺癌，胰腺癌，肺小細胞癌，脂肪肉瘤，黑色素瘤等。有學者報道，Cdk4能促進乳腺癌的發生，持續高水平的Cdk4蛋白的表達使癌細胞的增殖活性維持在較高的水平，并認為乳腺癌患者有可能從抑制Cdk4蛋白的治療中獲益[2]。Cdk4能特異地與CyclinD1結合形成CyclinD1/Cdk4復合物，引起一系列的G1-S轉變和S期行進有關的靶分子的表達，促進細胞完成DNA復制[3]。促進細胞從G期向S期的轉化，促進細胞的增殖，從而參與腫瘤的發生、發展，并影響腫瘤的生物學行為。有學者應用免疫組織研究CyclinD1、Cdk4在喉癌中過表達，且陽性表達與腫瘤大小及臨床分期明顯相關[4]。有報道:CyclinD1和Cdk4不僅參與胰腺癌的發生、發展，且和胰腺癌的臨床病理參數及預后有密切的關系[5]。

本研究Cdk4、CyclinD1的表達呈現出明顯的趨勢性，子宮內膜癌組最高,子宮內膜不典型增生組次之,正常內膜組最低，且差異有統計學意義,表明Cdk4、CyclinD1的過度表達與子宮內膜癌的惡性轉化有關，Cdk4、CyclinD1蛋白可能參與子宮內膜由良性演變為惡性的過程。Cdk4、CyclinD1陽性表達與子宮內膜癌分化程度，Dukes分期、與淋巴結轉移呈正相關關系，表明Cdk4、CyclinD1的過度表達與子宮內膜癌的惡性轉化及侵襲行為有關。從而可以認為CyclinD1和Cdk4不僅參與子宮內膜癌的發生、發展，且和子宮內膜癌的臨床病理參數及預后有密切的關系。推測CyclinD1的表達參與子宮內膜癌的發生、發展、侵襲與轉移,可以作為早期診斷子宮內膜癌的生物學指標。而Cdk4的高表達,則通過Cdk4途徑在子宮內膜癌的發生、發展、侵襲與轉移過程中起重要的協同作用，兩者相互促進，相互協同，共同影響子宮內膜癌生物學行為。所以,通過連續觀測子宮內膜組織中Cdk4、CyclinD1的表達,可能對子宮內膜病變的監測起到一定的作用，可作為臨床早期診斷和科學評論腫瘤預后、指導臨床治療的指標。

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[5] 喬文輝, 勝利.Cyclin D1、P53和CDK4蛋白與胰腺癌的相關性, 世界華人消化雜志,2008，16(30): 3460-3463.

CyclinD1andCdk4ProteinsExpressioninEndometrialCarcinomaanditssignificance

FENGYu-hua,LINYu-jing.

PopulationandFamilyplanningservicestationTheFifthHospitalAffiliatedtosunYat-senUniversity,zhuhai,Guangdong519000,China

ObjectiveTo study the expression of CyclinD1and Cdk 4 proteins in endometrial carcinoma and its significance.MethodsThe expression of CyclinD1and Cdk 4 proteins were tested by S-P immunohistochemistry on tissues of normal endometrium (20 cases)，atypical endometrial hyperplasia (20 cases) and endometrial carcinoma (40 cases).ResultsThe positive expression of CyclinD1and Cdk 4 in normal endometrial atypical endometrial hyperplasia and endometrial cancer in turn increase.A statistically significant difference between groups(P<0.05)，And the differentiation of endometrial carcinoma.Dukes staging and lymph node metastasis were positively related(P<0.05).ConclusionCyclinD1、 Cdk 4 and excessive protein expression may be in endometrial cancer occurrence, development, invasion and metastasis plays an important role, the judgment of the endometrial carcinoma malignant degree has a certain clinical significance, but also may be as a valuable tumor markers.

Endometrial cancer； CyclinD1； Cdk 4； Immunohitochemistry

519000 廣東珠海斗門區人口和計劃生育報務站(馮玉華)；珠海市中山大學附屬第五醫院病理科(林宇靜)

林宇靜