類風濕性關節炎患者血清白介素-33、腫瘤壞死因子-α、C反應蛋白的水平變化及意義

黃文輝,陳瑞林,曾穎瑜,林澤英

(廣州醫科大學附屬第二醫院風濕免疫科,廣東廣州,510260)

類風濕性關節炎(RA)是自身免疫性慢性炎性疾病,外周對稱性多關節炎是其主要臨床特征。細胞因子隨著細胞分子水平的發展,對多種免疫性疾病發病機制有重要作用。Baekkevold 2005年從內皮細胞中分離的血清白介素-33(IL-33)的分子與犬DVS27蛋白序列相似,通過刺激肥大細胞分泌白介素-6(IL-6)、白介素-13(IL-13)、巨噬細胞炎性蛋白-1a(MIP-1a)等多種炎癥因子而促進RA的發病[1]。由單核巨噬細胞分泌合成的腫瘤壞死因子-α(TNF-α)可參與 RA自身免疫的炎性反應,是一種多功能因子[2]。C反應蛋白(CRP)是急性期反應蛋白,物種進化后保留在脊椎動物中,主要在炎性細胞活素IL-6刺激下產生,包括肝細胞,或巨噬細胞和平滑肌細胞,是目前最好的臨床指標,可反映和參與全身或局部炎癥反應[3]。本研究通過檢測RA患者血清IL-33、TNF-α、CRP 水平,探討RA 患者血清 IL-33、TNF-α、CRP水平的變化與RA發病機制。

1 資料與方法

選擇2010年7月—2012年7月本院收治的RA患者50例(RA組),入選患者均符合美國風濕病學會(ACR)1987年修訂的 RA診斷標準。其中男16例,女34例;年齡26～ 72歲,平均(46.5±5.1)歲。入選標準:參考中華醫學會風濕病學分會制定的RA活動期判定標準。排除標準:排除患有高血壓、糖尿病、腫瘤、急性感染、肝腎疾病和其他自身免疫性疾病的患者。RA組分為活動期RA組和非活動期RA組,每組25例。2組年齡、性別等一般資料無顯著差異,具有可比性(P>0.05)。另選擇本院體檢中心接受體檢的健康成年人30例為對照組。各組受試者在研究前3個月內均未服用免疫抑制劑或激素。

各組患者清晨空腹采集肘靜脈血5 mL,常溫保存30 min后,3000 r/min離心10 min,分離血清,-20℃冰箱保存待測。免疫比濁法測定血清中CRP水平,雙抗體夾心酶聯免疫吸附實驗(Elisa)檢測血清中IL-33、TNF-α水平。比較各組血清中IL-33、TNF-α、CRP水平;分析 RA 組患者血清IL-33與TNF-α水平的相關性,及血清IL-33、TNF-α水平與CRP水平間的相關性。

2 結 果

由表1可見,RA組患者(活動期/非活動期)血清中IL-33、TNF-α、CRP水平均明顯高于對照組,經比較差異有顯著統計學意義(P<0.05);活動期RA組患者血清 IL-33、TNF-α、CRP水平均明顯高于非活動期RA組患者,經比較差異有顯著統計學意義(P<0.05)。

表1 各組血清中IL-33、TNF-α、CRP水平比較()

表1 各組血清中IL-33、TNF-α、CRP水平比較()

與對照組比較,＊＊P<0.01;與活動期 RA組比較,##P<0.01。

觀察指標 對照組(n=30) RA組(n=50) 活動期RA組(n=25) 非活動期RA組(n=25)IL-33/(pg/mL) 77.40±7.54 298.01±27.34＊＊ 335.34±31.47＊＊ 225.50±26.47＊＊##TNF-α/(pg/L) 1.85±0.14 7.56± 0.65＊＊ 10.26± 1.44＊＊ 5.34± 0.56＊＊##CRP/(mg/L) 2.10±0.24 11.14± 1.34＊＊ 15.47± 1.69＊＊ 7.78± 0.80＊＊##

表2 RA組患者血清IL-33與TNF-α水平相關性分析()

表2 RA組患者血清IL-33與TNF-α水平相關性分析()

觀察指標 RA組 r P IL-33/(pg/mL) 298.01±27.34 0.65 <0.05 TNF-α/(pg/L) 7.56± 0.65

由表2可見,RA組患者血清IL-33與TNF-α水平的相關性回歸分析表明,IL-33與TNF-α水平呈顯著正相關(P<0.05)。

表3 RA組患者血清IL-33、TNF-α與CRP水平間相關分析()

表3 RA組患者血清IL-33、TNF-α與CRP水平間相關分析()

觀察指標 RA組 r P CRP/(mg/L) 11.14±1.34 IL-33/(pg/mL) 298.01±27.34 0.51 <0.05 TNF-α/(pg/L) 7.56± 0.65 0.66 <0.05

由表3可見,RA組患者血清IL-33、TNF-α與CRP相關性回歸分析表明,CRP與IL-33、TNF-α水平均呈顯著正相關(P<0.05)。

3 討 論

RA是自身免疫性疾病,其主要診斷特征外周對稱性慢性多關節炎,可并發關節外系統損害,關節滑膜炎是其病理損害特征[4]。RA系多基因疾病,具有遺傳性。其患病率在發達國家約為1.0%,在中國為0.32%～0.36%。

RA的發病機制與細胞免疫和體液免疫失衡相關,細胞因子在其間發揮了重要作用,IL-1家族部分細胞因子都具有很強大的促炎作用[5]。IL-33是近年來新發現的一個IL-1家族的細胞因子,IL-33可促進肥大細胞分泌巨噬細胞炎性蛋白-1a(MIP-1a)、IL-6、IL-13、血管內皮生長因子(VEGF)和粒細胞集落刺激因子(GM-CSF),還可刺激小鼠成纖維細胞分泌嗜酸粒細胞趨化因子(CCL11)和IL-6[6]。動物實驗證明,IL-33能夠加重小鼠的關節炎,用重組IL-33注入小鼠體內,可引起血清IgE、IgA、IL-5和IL-13水平的增高,提示IL-33的致炎作用[7]。本研究表明,IL-33在RA活動組患者的血清中高表達,RA活動組血清IL-33水平高于RA緩解組及對照組,提示IL-33促發了RA的發病,其可能作為一種促炎細胞因子參與了RA病情活動。

CRP是一種急性時相反應蛋白,也是風濕類疾病活動的重要參考指標,由肝臟合成,在機體發生惡性腫瘤、組織損傷或壞死及炎癥時升高。研究顯示[8-9],風濕性疾病患者血清CRP含量較高。雖然CRP水平在疾病診斷方面無特異性,但其水平上升與組織損傷程度成正比,可有效反映各種原因引起的組織損傷和炎癥。本研究結果表明,CRP水平在RA患者血清中明顯高于對照組,而活動期RA患者CRP水平又高于非活動期患者,符合上述研究結果。

TNF-α是公認的促炎因子,可促進骨破壞和RA炎癥發生。其參與的發病機制包括細胞因子的誘導、內皮細胞的激活、白細胞的聚集、軟骨的破壞和破骨細胞的活化等[10-12],可引起軟骨與骨的漸進性破壞及炎癥反應的持續發生。TNF-α及其可溶性受體在RA患者血清中水平較高。研究[13]證實,TNF-α與多種病情活動的指標相關。有學者用ELISA法分別測定了TNF-α和IL-1的表達水平,結果顯示二者的表達水平與患者病情嚴重程度成正比[14]。而且,關節滑液中 TNF-α和IL-1水平對膝骨性關節炎的發病和發展過程有重要影響作用,可有效評估病情的嚴重程度[15]。本研究結果證實,與RA非活動期組和對照組相比,RA活動期組患者血清TNF-α水平明顯升高,提示TNF-α參與了 RA的炎性病理過程。

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