基于logistic回歸模型的乳腺浸潤性導管癌腋窩淋巴結轉移情況的預測*

孫長青，袁 媛，王 蒙，李 真，劉秀瑋，李 君，孟 新，賈曉燦，張衛東#

1)鄭州大學公共衛生學院社會醫學與衛生事業管理教研室 鄭州 450001 2)鄭州市衛生學校 鄭州 450052 3)鄭州大學公共衛生學院流行病學教研室 鄭州 450001 4)河南省人民醫院病理科 鄭州 450003 5)河南省疾病預防控制中心免疫規劃與預防科 鄭州450016

目前乳癌已成為女性中最為常見的惡性腫瘤之一，且其發病率逐年升高，發病年齡也趨于年輕化[1]。預計至2021年，我國55～69歲的女性乳癌發病率將會達到100/10萬[2]。研究[3-5]表明，遠處轉移是影響乳癌患者治療效果及預后情況的重要因素和主要致死原因，而其中淋巴道播散為乳癌最重要的轉移途徑。該研究采用免疫組化方法測定了105例乳腺浸潤性導管癌組織中雌激素受體(ER)、孕激素受體(PR)、表皮生長因子受體(C-erbB-2)、拓撲異構酶Ⅱ(TopoisomeraseⅡ)及nm23的表達，建立預測乳腺浸潤性導管癌腋窩淋巴結轉移的多因素 logistic回歸模型，力求為患者的預后判斷及診療方案選擇提供理論依據。

1 對象與方法

1.1研究對象收集2010年6月至2011年6月于河南省人民醫院就診并接受乳癌改良根治術的乳癌患者。研究對象篩選標準：病理類型為乳腺浸潤性導管癌；病理診斷項目及臨床相關資料完整。共納入105例患者，均為女性，發病年齡28～85歲，中位數50.4歲。患者均經術后病理檢查確診，其中有淋巴結轉移者68例，無淋巴結轉移者37例。

1.2實驗試劑即用型鼠抗人ER、PR、C-erbB-2、nm23、TopoisomeraseⅡ單克隆抗體均購自北京中杉金橋生物技術有限公司，酶標羊抗兔或鼠IgG聚合物(二抗)購自福州邁新生物技術開發有限公司。

1.3癌組織中ER、PR、C-erbB-2、nm23、TopoisomeraseⅡ蛋白的檢測105例患者標本均為手術切除的乳癌組織。切片經脫蠟水化，然后高壓組織抗原修復約10 min，冷卻后取出切片，蒸餾水洗滌，PBS沖洗后，滴加一滴一抗(11 000稀釋)工作液，置于4 ℃冰箱內過夜。PBS沖洗后，依次滴加快捷型酶標羊抗鼠IgG試劑和辣根酶標記鏈酶卵白素工作液，各自在電熱恒溫培養箱內37 ℃孵育30 min。DAB顯色，蘇木素復染。脫水、透明、封片后，光鏡下觀察。ER、PR、C-erbB-2、TopoisomeraseⅡ、nm23蛋白表達的結果判定參照文獻[6-9]評分標準。綜合評分標準為：0～分為陰性，2～分為弱陽性，4～分為中度陽性，5～分為強陽性[10]。≥2分為陽性。由2名及以上病理科主任醫師在多頭顯微鏡下閱片、打分。

1.4統計學處理采用SPSS 13.0對數據進行統計分析。乳腺浸潤性導管癌組織中相關蛋白的表達與腋窩淋巴結轉移的關系采用χ2檢驗進行分析，定義腋窩淋巴結轉移與否為因變量Y，其他單因素分析篩選出的有意義的影響因素為自變量進入多因素logistic 回歸分析，計算其OR值及95%CI，通過logistic回歸分析尋找高危因素,建立預測模型并采用配對χ2檢驗進行分析，logistic回歸方程建立后，以內樣本進行回代分析。檢驗水準α=0.05。

2 結果

2.1不同淋巴結轉移情況癌組織中ER、PR、C-erbB-2、nm23、TopoisomeraseⅡ蛋白的表達結果見表1。由表1可知，ER、PR與腋窩淋巴結轉移無關，但ER和PR雙陽性、C-erbB-2、Topoisomerase Ⅱ、nm23與腋窩淋巴結轉移有關。

表1 乳腺浸潤性導管癌組織中相關蛋白的表達與腋窩淋巴結轉移的關系 例

2.2影響乳腺浸潤性導管癌患者腋窩淋巴結轉移的因素及其賦值見表2。

表2 影響乳腺浸潤性導管癌患者腋窩淋巴結轉移的因素及其賦值

2.3多因素logistic回歸分析及模型構建模型擬合優度檢驗，χ2=70.495，P<0.001，即模型有統計學意義。Logistic回歸分析結果見表3。由表3可知，C-erbB-2、TopoisomeraseⅡ為乳腺浸潤性導管癌腋窩淋巴結轉移的危險因素，而nm23為保護因素。Logistic回歸方程為：轉移概率(P)=-1.645+2.447X4+1.648X5-2.093X6。

表3 乳腺浸潤性導管癌腋窩淋巴結轉移影響因素的多因素logistic 回歸分析結果

2.4模型效果分析結果顯示該模型判斷68例腋窩淋巴結轉移與實際診斷總符合率為97.1%(66/68)，見表4。回代分析結果顯示，模型 ROC曲線下面積為0.837，面積的標準誤為0.048，面積的95%CI為0.743～0.930，靈敏度為0.971，特異度為0.297。

表4 模型判別分類結果

3 討論

乳癌腋窩淋巴結的轉移與否不僅影響手術方式的選擇,且對患者術后5 a生存率也有很大影響[11]。腋窩淋巴結的轉移情況也一直被視為影響乳癌患者預后最重要的指標。但目前國內有關乳癌預后評估工具的研究較少，所以利用臨床病理的多個參數進行聯合分析，繼而從中得出對乳癌預后判斷有意義的模型，無論對患者或是醫生均有利。

Logistic回歸屬概率型非線性回歸，是一種研究二分類的觀察結果和其影響因素間關系的多變量分析方法。目前不僅應用于流行病學領域，也適于臨床試驗評價和疾病預后因素的分析等。該研究中，首先應用單因素分析篩選變量后再進行多因素logistic回歸分析，從6項臨床病理參數中“挑選”變量，以篩選出“最優”組合 。利用多因素logistic回歸模型分析，逐步篩選出了3項具有統計學意義的建模因子C-erbB-2、TopoisomeraseⅡ、nm23。C-erbB-2、TopoisomeraseⅡ陽性表達是乳腺浸潤性導管癌腋窩淋巴結轉移的較強危險因素，而nm23陽性表達則可認為是保護因素。亦有國外的相關文獻[12-14]支持上述因素與乳腺浸潤性導管癌預后關系的結果。

該研究所建立的logistic回歸方程靈敏度、判對率較高，為判斷患者是否發生腋窩淋巴結轉移提供了具體的數量化依據，進而為制定患者個體化治療方案提供參考。Logistic回歸模型穩定性較高，表達較為簡便，也便于在實踐中結合患者的個體情況進行危險性評估，所以該模型在乳腺浸潤性導管癌腋窩淋巴結轉移的預測評估研究中不失為一種較佳模型，對臨床制定綜合治療方案也有重要提示。但同時應注意樣本例數愈大，模型愈穩健，該研究樣本例數仍有待補充，所以在實際應用中應盡可能收集較多樣本。

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