直腸癌組織中TP表達(dá)及其臨床意義

胡從兵，謝建平，鄧 黎

（長(zhǎng)江大學(xué)臨床醫(yī)學(xué)院）

（荊州市第一人民醫(yī)院普外科，湖北荊州 434000）

直腸癌是消化道常見惡性腫瘤，中老年患者發(fā)病率最高，其發(fā)病率逐漸增加。直腸癌患者術(shù)后5年生存率約60%左右。患者就診時(shí)已屬中晚期是術(shù)后5年生存率低的原因之一。在人體正常組織細(xì)胞中廣泛分布胸苷磷酸化酶 (TP)［1］，但是在直腸癌組織里面其表達(dá)要明顯高于癌旁組織［2］。該酶具有誘導(dǎo)血管生成的功能［3］，又叫血小板衍生內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子 (PD-ECGF)［4］。

實(shí)體腫瘤生長(zhǎng)離不開血管生成。新生血管給腫瘤細(xì)胞提供生長(zhǎng)所必須的營(yíng)養(yǎng)，而且新生的毛細(xì)血管基底膜不完整，因此腫瘤細(xì)胞更容易進(jìn)入脈管系統(tǒng)然后發(fā)生轉(zhuǎn)移［5］。因此，腫瘤組織中TP的表達(dá)可能與腫瘤的惡性行為有關(guān)。為了解直腸癌組織中TP陽(yáng)性率并評(píng)估TP與臨床病理參數(shù)之間的聯(lián)系及其臨床意義，我們選擇了免疫組化方法檢測(cè)直腸癌組織中TP表達(dá)情況。

1 對(duì)象與方法

1.1 對(duì)象

選取2010年1月至2013年7月間直腸癌手術(shù)病人124例，其中男性79例，女性45例。年齡20～88歲，平均 (55.7±12.2)歲。全部經(jīng)組織病理學(xué)證實(shí)為直腸癌。入組標(biāo)準(zhǔn):根治術(shù)或者姑息性手術(shù)切除實(shí)體腫瘤;術(shù)后病理為腺癌:分為高、中、低分化腺癌3組，其中粘液腺癌歸為低分化腺癌組。排除標(biāo)準(zhǔn):未切除實(shí)體腫瘤，僅取組織活檢，或造瘺手術(shù);組織類型為腺癌以外其他類型，如神經(jīng)內(nèi)分泌癌，淋巴瘤，間質(zhì)瘤等。

1.2 方法

標(biāo)本經(jīng)過(guò)石蠟包埋，切片，HE染色后，在40×10倍光學(xué)顯微鏡下觀察。然后使用免疫組化方法染色:一抗為鼠抗人TP單克隆抗體 (1∶100)，以及通用型二抗。最后在顯微鏡下觀察、拍照并對(duì)陽(yáng)性染色細(xì)胞計(jì)數(shù)。TP免疫染色評(píng)估標(biāo)準(zhǔn):高倍鏡下陽(yáng)性染色細(xì)胞計(jì)數(shù)小于5%為TP陰性;高倍鏡下陽(yáng)性染色細(xì)胞計(jì)數(shù)達(dá)到5%為TP陽(yáng)性［6］。計(jì)數(shù)直腸癌中TP在不同分組中，如不同年齡段、不同性別、不同浸潤(rùn)深度、不同分化程度、不同淋巴分期、有無(wú)遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移、以及不同解剖學(xué)分期各組中陽(yáng)性情況。癌組織分級(jí)采用Dixon標(biāo)準(zhǔn)［7］。直腸癌TNM分期參考2012年直腸癌NCCN指南。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

采用統(tǒng)計(jì)軟件SPSS17.0，計(jì)量資料用獨(dú)立樣本t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

圖1 直腸癌組織中TP陽(yáng)性表達(dá) (HE，×400)

2 結(jié)果

2.1 免疫組化結(jié)果

本組直腸癌組織中TP陽(yáng)性率為50%(62/124)，圖1中細(xì)胞核染藍(lán)色，胞漿中染為黃色顆粒的是胸苷磷酸化酶(TP)。

2.2 直腸癌組織中TP陽(yáng)性表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

直腸癌組織中TP陽(yáng)性表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)深度以及解剖學(xué)分期相關(guān) (P＜0.05)，與年齡、性別、分化程度、是否有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)關(guān)聯(lián)。見表1。

表1 TP表達(dá)與臨床病理特征的關(guān)系

3 討論

TP又被稱為血小板源性內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng)因子［1］，可以誘導(dǎo)血管生成，它在人體正常組織細(xì)胞中廣泛分布:膀胱、脾臟、大腦、消化道，膠質(zhì)細(xì)胞、基質(zhì)細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、上皮細(xì)胞等等［1，8-9］。而在直腸癌等腫瘤組織中TP表達(dá)高于正常組織［10-121］，TP可能與腫瘤的生物學(xué)行為密切相關(guān)。本組結(jié)果表明，直腸癌組織中TP陽(yáng)性率50%;直腸癌中TP表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)深度以及解剖學(xué)分期存在著關(guān)聯(lián)。

在腫瘤浸潤(rùn)深度組中，TP陽(yáng)性率:T4(62.7%) ＞T3(55.6%)＞T2(38.7%)＞T1(22.2%)，可以看出，腫瘤浸潤(rùn)越深，TP陽(yáng)性表達(dá)率越高;由于腫瘤晚期而不能手術(shù)切除腫瘤的患者無(wú)法獲得標(biāo)本，因此本研究中僅有1例遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的標(biāo)本，且TP陰性，無(wú)法判斷TP與腫瘤遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的聯(lián)系，這樣對(duì)解剖學(xué)分期的分析可能也存在誤差。盡管如此，我們?nèi)绻麑ⅱ?、Ⅳ期和Ⅰ、Ⅱ期組合起來(lái)比較就會(huì)發(fā)現(xiàn)，直腸癌患者中TP陽(yáng)性比例:Ⅲ、Ⅳ期 (61.1%)＞Ⅰ、Ⅱ期 (41.4%)，即分期靠后，TP陽(yáng)性率更高，似乎提示TP表達(dá)陽(yáng)性預(yù)示預(yù)后不良。

日本學(xué)者Yukihiko等研究報(bào)道，結(jié)直腸癌患者術(shù)后預(yù)后、腫瘤分期，以及有無(wú)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、靜脈侵犯與腫瘤組織中TP表達(dá)密切相關(guān)［13］。Takebayashi等研究的結(jié)論則是:TP表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)侵犯、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、血管侵犯存在聯(lián)系［14］。這些研究跟我們結(jié)果部分吻合。

總之，直腸癌組織中TP陽(yáng)性率約50%，其表達(dá)與腫瘤浸潤(rùn)深度、分期存在關(guān)聯(lián)，且趨勢(shì)是癌組織侵犯越深，分期越晚，TP陽(yáng)性率越高。TP陽(yáng)性可能提示預(yù)后不良。

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