Micro Scan W/A96全自動分析儀對創(chuàng)傷感染細(xì)菌進(jìn)行鑒定及藥敏分析

盧少華 張 旻 蔡恒洋

遼寧省東港市中心醫(yī)院檢驗科，遼寧東港 118300

突發(fā)的交通事故、高層墜落、機(jī)械操作和跌倒等會造成人體創(chuàng)傷，創(chuàng)傷又分為閉合性創(chuàng)傷和開放性創(chuàng)傷，其中開放性創(chuàng)傷多伴有皮膚黏膜破裂及外出血，使細(xì)菌易從創(chuàng)口侵入，引起感染。近年來由于抗生素的廣泛使用及細(xì)菌變異的頻發(fā)，使細(xì)菌對廣譜抗生素的耐藥性越來越高，引起人們的重視[1-2]。在本研究中，我們將對開放性創(chuàng)傷感染傷口的膿液和分泌物進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)、鑒定和藥敏試驗，以明確創(chuàng)傷感染中細(xì)菌對抗生素的敏感性和耐藥性，為臨床合理使用抗生素提供依據(jù)。

1 材料和方法

1.1 標(biāo)本采集

收集我院從2010年6月～2013年1月期間266例開放性創(chuàng)傷患者傷口膿液和分泌物，送往我院檢驗科細(xì)菌室?；颊呤軅糠职ㄉ媳邸⑶氨?、手、股部、小腿和足。收集標(biāo)本時注意無菌操作，避免其他外來細(xì)菌對實驗結(jié)果造成影響。

1.2 細(xì)菌培養(yǎng)

將標(biāo)本用生理鹽水稀釋為一定濃度的菌群，配制瓊脂培養(yǎng)基，然后置入BACTEC 9120全自動培養(yǎng)儀（BD，USA）進(jìn)行細(xì)菌培養(yǎng)。

1.3 細(xì)菌鑒定和藥敏試驗

將培養(yǎng)分離得到的菌株用Micro Scan Walkaway96全自動微生物分析儀（Siemens，German）及其配套的試劑（鑒定與藥敏復(fù)合板）進(jìn)行細(xì)菌鑒定和藥敏分析。

1.4 質(zhì)量控制

用衛(wèi)生部臨床檢驗中心提供的大腸埃希菌（ATCC 25922）和金黃色葡萄球菌（ATCC 25923）作質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)參考菌株。

2 結(jié)果

從266例標(biāo)本中共分離出228株細(xì)菌，陽性率高，達(dá)85.7%；其中革蘭陽性菌131株（57.4%），革蘭陰性菌87株（38.2%），真菌10株（4.4%）。通過Micro Scan W/A 96儀器軟件分析，我們發(fā)現(xiàn)分離率占前6位的細(xì)菌分別為大腸埃希菌、凝固酶陰性葡萄球菌（CNS）、金黃色葡萄球菌（SA）、甲種溶血性鏈球菌、甲型副傷寒沙門菌和肺炎克雷伯菌，百分比分別為 28.5%、19.3%、15.8%、10.5%、6.1%、4.8%，具體病原菌的分布見表1。在凝固酶陰性葡萄球菌中，耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）占80.23%；而在金黃色葡萄球菌中，耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）占30.60%；除此之外，產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）的大腸埃希菌和肺炎克雷伯菌分別占其38.67%和46.21%。從藥敏分析結(jié)果可以看出，革蘭陽性球菌對青霉素耐藥率最高，可能與青霉素開發(fā)早，應(yīng)用多有關(guān)，而其對萬古霉素耐藥率最低；革蘭陰性桿菌對氨芐西林耐藥率最高，而對亞胺培南和哌拉西林耐藥率最低。結(jié)果提示在臨床上選用抗生素時，不應(yīng)隨意使用青毒素和氨芐西林這些廣譜抗生素，而應(yīng)針對具體感染選用特殊的抗生素。

表1 228株病原菌種類和構(gòu)成比

3 討論

本實驗采用自動化儀器完成了對創(chuàng)傷感染細(xì)菌的培養(yǎng)、鑒定及藥敏分析，實驗結(jié)果和大部分研究報道結(jié)果相同[3-4]，證明自動化儀器不僅操作方便簡單，而且實驗結(jié)果穩(wěn)定可靠。大腸埃希菌是人腸道中的正常棲居菌，其致病物質(zhì)之一是血漿凝固酶，因此其在大多數(shù)感染中都是最主要的病原菌，如尿路感染、血液感染等[5-6]。凝固酶陰性葡萄球菌是在大量頭孢菌素和免抑制劑的廣泛使用后才成為醫(yī)源性感染的常見病原菌，特別是MRCNS，其檢出率和多重耐藥性呈逐年上升趨勢，且感染后癥狀不典型，給臨床診斷和治療帶來困難[7]。通過Micro Scan W/A96全自動微生物分析儀，可準(zhǔn)確鑒定MRCNS，合理使用抗生素。金黃色葡萄球菌是革蘭陽性球菌的代表，是一種常見的病原菌，最早用青霉素治療SA感染，但由于MRSA逐漸增多，現(xiàn)臨床上不使用青霉素，而用紅霉素、慶大霉素或萬古霉素代替[8]；這和我們的藥敏實驗結(jié)果相一致，我們的研究發(fā)現(xiàn)SA對青霉素的耐藥率為100%，而對萬古霉素的耐藥性最低，只有13.2%。超廣譜β-內(nèi)酰胺酶（ESBLs）主要由大腸桿菌和肺炎克雷伯桿菌產(chǎn)生，這類菌株對青霉素、第三代頭孢菌素（頭孢噻肟、頭胞他啶、頭孢哌酮、頭孢曲松等）以及單環(huán)β-內(nèi)酰胺類抗生素（氨曲南）耐藥[9]，并且ESBLs由質(zhì)粒介導(dǎo)，容易在細(xì)菌中傳播，因此快速地篩選出ESBLs菌對治療感染有重要作用。Micro Scan W/A96全自動微生物分析儀可以快速準(zhǔn)確的鑒定并檢出ESBLs菌，幫助抑制創(chuàng)傷感染，使患者創(chuàng)傷得以早日恢復(fù)。

我們的實驗結(jié)果表明不同的菌株其耐藥性有明顯的不同，常用的抗生素已不能滿足抗感染治療的需求，隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，醫(yī)院應(yīng)多采用現(xiàn)代化的全自動分析儀器，節(jié)約患者等待病情確診的時間，保證實驗結(jié)果的穩(wěn)定性和準(zhǔn)確性。在臨床工作中，醫(yī)生應(yīng)重視感染細(xì)菌的培養(yǎng)、鑒定和藥敏試驗，從而合理的使用抗生素，而不能按照經(jīng)驗亂用、濫用抗生素[10-12]。

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