胃癌分型研究進展

【摘 要】本文綜述了近年來胃癌分型的研究進展，期望能有指導(dǎo)臨床及有助于判斷預(yù)后的分子分型出現(xiàn)，使疾病治療模式轉(zhuǎn)向個體化治療。

【關(guān)鍵詞】胃癌；分型；進展

胃癌是消化系統(tǒng)的常見惡性腫瘤，為全世界范圍內(nèi)發(fā)病率最高的癌癥之一，根據(jù)世界衛(wèi)生組織癌癥研究中心2002年的統(tǒng)計，我國胃癌發(fā)病率僅次于日本，位于全球第2位。2007年中國腫瘤登記提示：我國胃癌的發(fā)病居第二位，僅次于肺癌，死亡據(jù)第三位，僅次于肺癌、肝癌。胃癌在演進過程中隨著附加的基因突變會產(chǎn)生不同的亞克隆，使其不斷異質(zhì)化導(dǎo)致其侵襲和轉(zhuǎn)移能力不斷加強，而這是胃癌治療困難和致死的主要原因。國內(nèi)外學(xué)者都在尋求能指導(dǎo)臨床方案選擇及判斷預(yù)后的胃癌分型，傳統(tǒng)的癌癥診斷對病理學(xué)依賴性較大，有時會因為腫瘤的不典型或臨床信息的不完整而造成診斷困難。應(yīng)用基因分析技術(shù)所產(chǎn)生的信息，特別是應(yīng)用高通量芯片技術(shù)所產(chǎn)生的信息可以為胃癌分型提供更多的參考，因此對目前胃癌相關(guān)的分型予以綜述。

1 胃癌的傳統(tǒng)分型

胃癌病理分型是以組織形態(tài)結(jié)構(gòu)和細胞生物學(xué)特性為基礎(chǔ)，不同類型的胃癌，其形態(tài)結(jié)構(gòu)和生物學(xué)行為各異，流行病學(xué)和分子機制亦不同，以致現(xiàn)有的胃癌分型系統(tǒng)眾多。目前，常用的是WHO型、Lauren分型，大體分型主要使用Borrmann分型。

1.1 WHO胃癌包括以下常見組織學(xué)類型

乳頭狀腺癌、管狀腺癌、黏液腺癌、印戒細胞癌、腺鱗癌、鱗癌、小細胞癌、未分化癌。此外，胃內(nèi)還可以發(fā)生類癌。WHO分型將Lauren分型的腸型、彌漫型納入腺癌之下。其管狀腺癌還可進一步分成高分化、中分化與低分化腺癌。少見類型或特殊類型胃癌有：實體型變異、肉瘤樣變異等。

1.2 1923年德國病理學(xué)家Borrmann提出的一種胃癌大體形態(tài)分型方法，此分型主要根據(jù)癌瘤在黏膜面的形態(tài)特征和在胃壁內(nèi)的浸潤方式進行分類，將胃癌分為4型：Ⅰ型（結(jié)節(jié)型），II型（潰瘍局限型），III型（浸潤潰瘍型），是最常見的類型，約占50%。Ⅳ型（彌漫浸潤型），由于癌細胞彌漫浸潤及纖維組織增生，胃壁呈廣泛增厚變硬，稱“革囊胃”。Borrmann分型是胃癌經(jīng)典的分型方法，既能反映胃癌的生物學(xué)行為，又簡潔實用，國際上廣泛采用。

1.3 Lauren分型將胃癌分成兩大主要類型，即腸型與彌漫型，當(dāng)腫瘤內(nèi)兩種類型成分相當(dāng)時就稱為混合型。胃癌發(fā)生是一個多步驟的過程，彌漫型和腸型在腫瘤發(fā)生各個階段會產(chǎn)生多種基因及表觀遺傳學(xué)方面的變異。常見的包括抑癌基因的點突變和雜合性丟失，常見的表觀遺傳學(xué)異常包括CPG島的甲基化引起的腫瘤抑制基因沉默和腫瘤促進基因轉(zhuǎn)錄水平的增高。

2 胃癌分型與分子病理學(xué)

胃癌分型研究的意義在于探索其是否對判斷預(yù)后有價值或者對于今后的治療有指導(dǎo)意義。當(dāng)前，國內(nèi)張樹華采用組織病理與組織化學(xué)和免疫組織化學(xué)技術(shù)相結(jié)合的方法，兼顧宿主的免疫防御反應(yīng)，把胃癌分為兩型：限制生長型和促進生長型。限制生長型預(yù)后較促進生長型好。

根據(jù)黏蛋白標(biāo)記的差異，胃癌組織被分為4型：1）胃型：胃型黏蛋白標(biāo)記的胃癌細胞>10%；2）胃腸型：胃型黏蛋白標(biāo)記的胃癌細胞> 10%且腸型黏蛋白標(biāo)記的胃癌細胞>10%；3）腸型：腸型黏蛋白標(biāo)記的胃癌細胞>10%；4）未分類：胃腸黏蛋白標(biāo)記的細胃癌細胞<10%。這種通過黏蛋白標(biāo)記進行的胃癌分型，可以結(jié)合Lauren分型，對胃癌的發(fā)生發(fā)展以及生物學(xué)行為進行進一步的分析和評價。

Solcia等對對294例平均隨訪時間長達150個月的胃癌進行研究顯示，如果將胃癌的組織學(xué)結(jié)構(gòu)、細胞異型性程度、p53基因突變、18q雜合性缺失、微衛(wèi)星不穩(wěn)定性以及有無脈管神經(jīng)浸潤等因素與預(yù)后綜合分析，可以將胃癌惡性程度分成三級。胃癌I級（預(yù)后良好型）包括：大量腫瘤內(nèi)/旁淋巴樣細胞反應(yīng)型、高分化管狀腺癌、黏液結(jié)節(jié)型和促纖維結(jié)締組織增生性彌漫型胃癌，I級胃癌約占全部胃癌病例的37%。胃癌III級（預(yù)后不良型）包括：高度異型性胃癌、浸潤型黏液腺癌、腫瘤細胞異型性中等但具有p53基因的第7或第8外顯子突變、伴有血管淋巴管浸潤以及神經(jīng)浸潤者，III級胃癌占全部胃癌病例的19%。其他胃癌則歸屬于預(yù)后中等的胃癌Ⅱ級，占全部胃癌的44%。這一關(guān)于胃癌惡性程度評價體系雖然是不依賴于臨床分期的胃癌預(yù)后判斷新標(biāo)準，但實際操作中涉及到微衛(wèi)星不穩(wěn)定性的分子遺傳學(xué)檢測、p53基因突變檢測以及EB病毒原位雜交檢測等實驗技術(shù)，在臨床普及以及操作流程標(biāo)準化控制等方面均有待統(tǒng)一。

3 微衛(wèi)星不穩(wěn)定性與胃癌分型

微衛(wèi)星不穩(wěn)定性[MSI]是胃癌發(fā)生過程中的一個常見事件，反應(yīng)了腫瘤潛在DNA錯配修復(fù)缺陷，常常由Hmlh1啟動子區(qū)甲基化引起，胃癌合并MSI者其臨床病理因素特別，預(yù)后相對良好，胃腸道腫瘤中MSI的測定是最先被廣泛利用的預(yù)后分子檢測之一。MSI的檢測常采用熒光定量多重PCR進行，費用相對低，適用性廣。以往的很多觀察表明，胃癌中MSI的存在不僅僅是與已知的與組織病理特征強關(guān)聯(lián)的分子分型標(biāo)志，同時MSI能能區(qū)分預(yù)后良好好亞組。因此Simpson等建議將MSI作為一個有效的分子分型工具。葡萄牙的一項研究表明，胃癌患者并低度MSI五年生產(chǎn)率為30%相比，而高度MSI者則為70%。韓國的一項大型研究也表明在胃癌分期為II、III期的患者MSI與預(yù)后良好有關(guān)。

4 胃癌的分子分型

以分子特征為基礎(chǔ)的新型分類體系即分子分型。高通量的基因分析可以是DNA水平的基因多態(tài)性分析、DNA甲基化分析和基因拷貝數(shù)分析.也可以是RNA水平的基因表達譜分析、微小RNA表達譜分析和蛋白表達水平的蛋白芯片分析等。

腫瘤分子分型的基礎(chǔ)：目前可以在DNA、RNA和蛋白質(zhì)水平上進行腫瘤分子分型的研究。在DNA水平，可以依據(jù)基因突變、基因組的細胞遺傳學(xué)改變或甲基化差異進行分型。根據(jù)基因表達譜（RNA水平）的差異實施分型，是目前分子分型的研究主體，以表達譜芯片為基礎(chǔ)的分子分型研究數(shù)據(jù)處理分二類：一是，unsupervised analysis；二是，supervised analysis。在蛋白質(zhì)水平，可以根據(jù)蛋白質(zhì)表達譜的差異，亞細胞結(jié)構(gòu)蛋白組成的不同或蛋白質(zhì)翻譯后修飾的改變來進行分型。

分子分型的研究方法主要有：基因表達譜芯片技術(shù)：它可以同時觀察成千上萬個基因在不同個體、不同組織、不同發(fā)育階段的表達狀況。它的原理是在已建立的cDNA或寡核苷酸組成的芯片或微陳列上，用不同顏色熒光標(biāo)記的cDNA制備的探針與之雜交，掃描及計算機處理所得的信號就代表了樣品中基因的轉(zhuǎn)錄表達情況。基因芯片技術(shù)在腫瘤的分子分型、基因功能、信號通路及代謝與調(diào)控途徑研究等方面有顯著的優(yōu)勢；比較基因組雜交（CGH）技術(shù)：是在染色體熒光原位雜交基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的分子細胞遺傳學(xué)研究技術(shù)。它主要是用不同的熒光體系來標(biāo)記腫瘤組織DNA和正常對照DNA，與正常中期分裂象染色體進行競爭性抑制雜交，熒光信號攝取及軟件分析所得的比值可判斷染色體區(qū)段的擴增、缺失還是正常。它僅需少量腫瘤組織DNA即可在整個基因組水平研究不同基因組間DNA拷貝數(shù)差異，并將這些異常定位在染色體上。CGH與微芯片技術(shù)結(jié)合的芯片CGH，以cDNA作為雜交靶，可使得基因組水平遺傳物質(zhì)異常的分辨率達到幾十個kb，并可對關(guān)鍵基因改變進行精細定位；蛋白芯片技術(shù)：基因突變和基因表達差異不一定導(dǎo)致相應(yīng)的蛋白表達，而且蛋白質(zhì)還存在磷酸化，乙酰化等復(fù)雜的翻譯后修飾過程，這些改變在轉(zhuǎn)錄水平上是無法檢測的。以高通量結(jié)合生物信息學(xué)為特點的蛋白質(zhì)組學(xué)分析技術(shù)可以從細胞整體水平上檢測到這種變化，為腫瘤分子分型以及治療標(biāo)志物的篩選帶來巨大的便利與可能。蛋白芯片技術(shù)主要包括雙向凝膠電泳技術(shù)、質(zhì)譜技術(shù)以及生物信息學(xué)技術(shù)。

【參考文獻】

[1]陳萬青，張思維，鄭榮壽.中國腫瘤登記地區(qū)2007年腫瘤發(fā)病和死亡分析[J].中國腫瘤，2011，20（3）：162-169.

[責(zé)任編輯：丁艷]