定安鵝繁殖期不同生殖激素水平變化規律的研究

摘要：采用酶聯免疫吸附雙抗體夾心法（ELISA），對定安鵝繁殖周期中的休產期、就巢期、產蛋期3個時期血漿中孕酮、雌激素、催乳素濃度進行測定，研究其不同時期分泌水平的變化規律。結果表明，在定安鵝的繁殖周期中，孕酮、雌激素、催乳素不同時期均有不同的變化。對鵝產蛋、就巢、休產等繁殖行為具有十分重要的作用。孕酮及雌激素分泌水平從休產期到產蛋期不斷增高直至達到峰值，并經協同作用，使定安鵝從休產期轉入產蛋期，表明這兩種激素對產蛋具有重要的調控作用。催乳素分泌水平從休產期到產蛋期、就巢期不斷增高，并在就巢期達到峰值，表明催乳素對于引發、維持定安鵝的就巢行為具有決定性的作用。

關鍵詞：定安鵝；孕酮；雌激素；催乳素；繁殖期

中圖分類號：S835；S814.1 文獻標識碼： A 文章編號：0439-8114（2013）21-5255-03

The Variation of Reproductive Hormones in Different Production Period of Dingan Geese

HUANG Fa-cai，WU Ke-bang，MAN Churiga，XIE Chao-xing，ZHANG Jing-wu

（College of Agriculture， Hainan University， Haikou 570228，China）

Abstract： In this study， the concentration of the plasma progesterone， estrogen and prolactin in the production cycle of Dingan geese， such as restoration， broodiness and production period were detected by antibody sandwich ELISA kit to study its secretory variation in different period.The results showed that in the production cycle of Dingan geese， the progesterone， estrogen， prolactin all changed in different periods. It had a very important role on goose breeding behavior such as eggs laying， broodiness， and restoration. The secretion of progesterone and estrogen increased continually until it reached the peak from restoration to production period. It promoted Dingan geese to transfer from restoration period to production period though synergistic effect. It indicated that the two hormones played an important role in the regulation of egg production. The level of prolactin secretion increased constantly from restoration to production period and reached its peak at the broodiness period indicating that the prolactin might play a decisive role in priming and maintaining the broodiness behavior of Dingan geese.

Key words： Dingan goose； progesterone； estrogen； prolactin； breeding season

定安鵝是海南省禽類地方遺傳資源，具有優良的繁殖性狀，因產蛋不受季節影響，產蛋期長，被當地人稱為“四季鵝”。定安鵝屬于季節性繁殖動物，每年從9～10月開始產蛋至翌年3～4月結束，這期間稱為繁殖期，其他季節稱為非繁殖期。在繁殖期中，每產一窩蛋，稱為一個產蛋周期。定安鵝一年有3～4個產蛋周期，年產蛋約37～50枚。根據不同的繁殖特性，將一個產蛋周期劃分為休產期、產蛋期和就巢期3個時期。母鵝有很強的就巢性，表現為每產一窩蛋就要就巢一次。

近年來，定安鵝以肉質好、口感佳、香味濃而受到消費者青睞，飼養量逐年提高，已形成了較大的產業規模。如何發揮安定鵝的遺傳多樣性，提高定安鵝的繁殖性能，是定安鵝遺傳資源保護和利用的重點。本試驗通過對定安鵝休產期、產蛋期、就巢期3個時期血漿中孕酮、雌激素、催乳素濃度的測定，研究其生殖激素分泌規律，探討定安鵝四季產蛋、就巢規律及其調控機理，以期為生產管理中采用新的繁殖技術手段提供科學的理論依據。

1 材料與方法

1.1 血漿的采集及保存

選擇臨床檢查健康的處于產蛋周期內的定安鵝母鵝15只，用腳環標號，分別在休產期、產蛋期、就巢期多次采集其血液樣本。試驗鵝在早上喂食前進行采樣，每只3 mL。血樣中加入EDTA抗凝，進行離心處理，取血漿在-69 ℃的冰箱中保存待用。

1.2 器材

酶標儀（450 nm）、槍頭、移液槍、37 ℃恒溫箱、酶聯免疫吸附雙抗體夾心法（ELISA）試劑盒等。

1.3 檢測方法

試驗采用酶聯免疫吸附雙抗體夾心法（ELISA）進行[1]，具體操作按ELISA試劑盒說明書步驟進行。

1.4 數據統計與分析

用SAS統計軟件對各性能指標進行方差分析，并進行顯著性檢驗。

2 結果與分析

2.1 定安鵝血漿中孕酮、雌激素、催乳素濃度的測定結果

用試驗中得到的不同時期的孕酮、雌激素、催乳素濃度的OD450 nm值，根據標準品線性回歸曲線計算出濃度，所得結果如表1所示。

由表1可知，定安鵝休產期與產蛋期孕酮水平差異極顯著（P<0.01）；休產期與就巢期孕酮水平差異顯著（P<0.05）；而產蛋期與就巢期孕酮水平差異不顯著（P>0.05）。就巢期的孕酮水平與產蛋期相比下降了17.28%，休產期較就巢期又下降了52.56%。表明定安鵝的產蛋與孕酮水平的變化密切相關，產蛋期過后，其孕酮含量呈現急劇下降趨勢。

定安鵝休產期與產蛋期雌激素水平差異極顯著（P<0.01）；休產期與就巢期雌激素水平差異不顯著（P>0.05）；而產蛋期與就巢期雌激素水平差異極顯著（P<0.01）；就巢期的雌激素水平與產蛋期相比下降了82.34%，休產期較就巢期上升了114.65%。表明定安鵝的產蛋與雌激素水平的變化密切相關，產蛋期過后，雌激素水平急速下降，至進入就巢期。而休產期時，雌激素水平又逐漸提高，進入下一個產蛋周期。

定安鵝休產期與產蛋期催乳素水平差異極顯著（P<0.01），休產期與就巢期催乳素水平差異極顯著（P<0.01）；而產蛋期與就巢期催乳素水平差異不顯著（P>0.05）；就巢期的催乳素水平與產蛋期相比上升了32.45%，休產期比就巢期下降了78.02%。表明定安鵝的就巢與催乳素分泌水平的變化密切相關，其催乳素水平在就巢期達到峰值，休產期急劇下降而產蛋期緩慢回升。

2.2 分析

2.2.1 定安鵝繁殖期孕酮的變化規律 由圖1可知，定安鵝繁殖期孕酮的變化規律呈波動性變化，其分泌水平從休產期到產蛋期不斷升高，在產蛋期達到最高值，然后緩慢下降到就巢期。

禽類卵巢上無黃體，孕酮由卵泡的顆粒細胞產生，其血漿中孕酮含量隨卵泡的生長發育、成熟而逐漸增加[2]。孕酮主要的生殖生理作用是控制子宮內膜和子宮平滑肌，參與產蛋過程的內調節，而在產蛋前、產蛋期分泌量都達到高值[3]。因此在定安鵝的產蛋期其孕酮含量處于最高水平，這與孕酮對排卵的調節和控制作用有關，高濃度的孕酮是影響產蛋率的重要因素之一；當進入就巢期后，由于禽類的就巢行為，卵泡逐步停止生長發育，孕酮的濃度降低；而轉入休產期初期，卵泡生長處在靜止狀態，孕酮分泌量降至最低，其濃度也達到最低水平。

2.2.2 定安鵝繁殖期雌激素的變化規律 由圖2可知，定安鵝繁殖期雌激素的變化規律呈波動性變化，其分泌水平從休產期到產蛋期不斷升高，至產蛋期達到最高值，然后逐漸下降到就巢期。

雌激素主要由卵泡內膜細胞和卵泡顆粒細胞分泌。雌激素的主要生殖生理作用是促進雌性生殖器官的發育、卵泡成熟及排卵激素的釋放等[4]。在營養代謝方面，內源性的雌激素在性發育期能增加血漿中脂類、鈣和蛋白質的含量，使血中的鈣、磷、脂肪的水平增高，為蛋的形成提供原料等[5]。從本次試驗結果可以看出，在整個產蛋周期中，其雌激素的濃度隨著卵泡的生長、成熟和排出發生了顯著的變化。產蛋期該激素水平達到最高，對產蛋作用影響最大；而進入就巢期后，雌激素水平顯著降低；轉入休產期后，雌激素的水平又逐步提高，開產后達到高峰，進入下一個產蛋周期。而孕酮和雌激素具有協同作用，在兩種激素共同調節下，完成了休產期到產蛋期的轉換[6]。

2.2.3 定安鵝繁殖期催乳素的變化規律 由圖3可知，定安鵝繁殖期催乳素的變化規律呈線性變化，其分泌水平從休產期到產蛋期、就巢期不斷增高，在就巢期達到峰值，醒巢后，其含量急劇下降又進入下一個休產期。

催乳素主要由垂體嗜酸性細胞分泌，是觸發和維持就巢行為的關鍵性激素[7]，就巢行為還能加強催乳素的分泌[8]。催乳素分泌與雌激素和孕酮的水平有關，其能刺激和維持黃體分泌孕酮。就巢期催乳素水平達到峰值，孕酮就能保持較高的水平。催乳素可抑制卵泡的生長，抑制促卵泡素分泌，也抑制了雌激素的分泌量，故就巢期雌激素水平最低。就巢期結束后，催乳素急劇下降，此時母鵝的就巢行為也轉變為護雛的母性行為，故休產期催乳素分泌水平最低[7]。本試驗結果表明，定安鵝的就巢性與血漿中催乳素濃度水平密切相關，一定濃度的催乳素可導致卵泡生長退化或閉鎖，使卵巢處于萎縮狀態，促進禽類的就巢行為[7]。

3 小結與討論

在定安鵝母鵝的繁殖周期中，孕酮、雌激素、催乳素在其休產期、就巢期、產蛋期均發生了不同程度的變化，對其產蛋、就巢、休產等繁殖行為具有十分重要的作用。孕酮、雌激素分泌水平從休產期到產蛋期不斷增高直至達到峰值，表明在孕酮和雌激素的協同作用下，定安鵝從休產期進入了產蛋期，這兩種激素對產蛋具有重要的調控作用。催乳素分泌水平從休產期到產蛋期、就巢期不斷增高，并在就巢期達到峰值，表明催乳素對于引發、維持定安鵝的就巢行為具有決定性的作用。試驗表明，就巢期長短直接影響鵝產蛋期和產蛋量[7]。因此建議采用人工孵化鵝蛋技術，縮短和消除就巢期以提高其產蛋量。目前主要通過以下幾種方式來縮短和消除就巢期：①通過在鵝的產蛋末期或就巢期采用激素中和技術降低其血漿中的催乳素水平，以達到不就巢或醒巢的目的；②應用中草藥制劑促進和恢復卵巢的生殖機能，促進卵泡生長發育，提高雌激素分泌量，縮短就巢期；③采用浸水、拔毛、鼻孔穿線等行為管理技術，通過應激手段造成醒巢。

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