新生兒臍帶血CD4+CD25high調節性T細胞Foxp3的表達探析

【摘要】 目的：對新生兒臍帶血CD4+CD25high細胞中調節性Treg細胞的Foxp3表達進行研究。方法：采用密度梯度離心法提取新生兒（A組）臍帶與成年人（B組）外周血液中的單個細胞核后，使用流式細胞儀測定CD4+CD25high細胞中的Treg細胞數量，并對細胞內的轉錄因子（Foxp3）進行檢測，并記錄檢測結果。結果： A組CD3+CD4+細胞中Treg細胞所占比例為（3.86±1.63）%，明顯高于B組的（0.87±0.74）%；A組Treg細胞中表達Foxp3的比例為（23.21±8.9）%，明顯低于B組的（71.3±11.6）%，差異均有統計學意義（P<0.01）。結論：雖然新生兒臍帶血中CD4+CD25high的細胞數量較高，但新生兒Foxp3細胞相對于成年人卻相對較低，這也進一步說明新生兒Treg細胞的Foxp3表達能力尚未完全發育并未成熟。

【關鍵詞】 新生兒； CD4+CD25high； Treg細胞； Foxp3

doi：10.3969/j.issn.1674-4985.2013.14.074

研究發現，成年人人體外周血液中含有CD4+細胞，CD4+細胞中存在著可對人體免疫進行調節的Treg細胞，Treg細胞對維持人體內部運作、提升人體免疫力具有著十分重要的作用[1-2]。且最新研究也發現，Foxp3對人體Treg細胞的發育生長以及功能的表達具有十分重要的意義，但目前醫學界對Treg細胞的發育與成熟，以及其功能的實現機制尚不明確[3-4]。為了進一步了解Treg細胞的生長發育特點，筆者對這一課題進行了深入的研究，將新生兒臍帶血與成年人外周血中Treg細胞的Foxp3表達進行了測定，現將測定結果報道如下[5-6]。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2011年后接生的30例健康足月新生兒為A組，其中女嬰14例，男嬰16例；同時選取30例健康成年人為B組，年齡20～30歲，分別采集A組臍帶血和B組外周血，所有血液在采集后均在4 h內送至實驗室進行測定。

1.2 方法 采用密度梯度離心法提取新生兒臍帶與成年人外周血液中的單個細胞核后，使用流式細胞儀測定CD4+CD25high細胞中的Treg細胞數量，并對細胞內的轉錄因子（Foxp3）進行檢測，并記錄檢測結果。

1.3 統計學處理 本文所有數據均采用IBMSPSS 20.0軟件進行分析，計量資料以（x±s）表示，采用t檢驗，P<0.05為差異有統計學意義[7]。

2 結果

2.1 流式細胞測定 A組血液樣本的CD4+Treg細胞中CD25細胞陰性與陽性的分界十分清晰，在圖1中形成了兩個明顯區別的群體，而B組血液樣本中的分界則不清晰，呈現出過渡狀態。

2.2 CD4+CD25highTreg細胞比例 按照表達強度的高低，通

圖1 兩組血液樣本流式細胞測定結果對比圖

常將CD25陽性細胞分為CD25high（高表達）和CD25int（低/中表達）兩種，CD25high為Treg細胞[8]，發現A組血液樣本中CD4+CD25high細胞占CD3+CD4+Treg細胞的比例明顯高于B組，如表1所示。

3 討論

通過上文研究證明：新生兒臍帶血的CD25細胞陰性與陽性的分界十分清晰，而成年人外周血液樣本中則表現為一個具有連續性的整體[9]。此外，新生兒臍帶血中CD4+細胞的CD25high與CD25int的Treg細胞也存在著十分清晰的分界，且在數量上明顯高于成年人外周血[10]。因此，雖然新生兒臍帶血中CD4+CD25high的細胞數量較高，但新生兒Foxp3細胞相對于成年人卻相對較低，這也進一步說明新生兒Treg細胞的Foxp3表達能力尚未完全發育并未成熟[11]。而深入的研究如何將新生兒Treg細胞誘導成熟，對提高新生兒自身免疫力具有重要的意義，也必將成為進一步研究Treg細胞的主要思路。

參考文獻

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（收稿日期：2012-12-04） （本文編輯：陳丹云）