破格救心湯對心臟驟停家兔心肌肌鈣蛋白T水平的影響

【摘要】 目的：觀察破格救心湯對心臟驟停家兔心肌肌鈣蛋白T的影響。方法：將家兔隨機分為正常對照組、模型組、破格救心湯組，每組10只。造模前24 h，正常對照組及模型組分別給予飲用水10 ml/kg 分兩次灌胃，破格救心湯組給予破格救心湯10 ml/kg 分兩次灌胃，模型組和破格救心湯組24 h后用電極室顫法制造心臟驟停模型并進行心肺復蘇，計算復蘇后自主循環恢復率及24 h存活率，在致顫前，復蘇后1 h、3 h、6 h、12 h、24 h，檢測家兔中心靜脈血心肌肌鈣蛋白cTnT水平。結果：模型組復蘇后自主循環恢復率與24 h存活率分別為70%與40%，破格救心湯組分別為90%與80%。致顫前三組間cTnT濃度未見明顯差異（P>0.05）；致顫后模型組與破格救心湯組各時間點cTnT水平均高于對照組（P<0.05），破格救心湯組致顫后各時間點cTnT水平均低于模型組（P<0.05或P<0.01）。結論：破格救心湯能明顯改善復蘇后家兔心功能，顯著降低心臟驟停后心肌損傷，增加心肺復蘇成功率。

【關鍵詞】 破格救心湯； 心臟驟停； 心肌肌鈣蛋白T

隨著心肺復蘇（CPR）技術的改進及最新指南的廣泛普及雖提高了初始復蘇成功率，但由于心臟驟停后心肌缺血/再灌注損傷嚴重，患者的出院存活率依然很低（1.8%～20%）[1]，因此如何減輕心臟驟停患者的心肌損傷已成為重癥醫學目前研究的焦點。李可老中醫自創破格救心湯成功治愈了千余例重癥心衰患者，療效確切[2]，臨床上心臟驟停心肺復蘇成功患者在使用破格救心湯后，復蘇成功率提高，心功能明顯改善，但破格救心湯對心肌保護作用機制目前尚不明確。血清心肌肌鈣蛋白（cTnT）是心肌組織特有的一種調節蛋白，當心肌受損時游離型cTnT首先逸出細胞進入血循環而被檢出，并隨心肌損傷加重，cTnT血清濃度逐漸升高[3]。2011年月-2012年9月，本實驗研究破格救心湯對心臟驟停家兔cTnT的影響，為臨床上使用破格救心湯治療心跳驟停后心肌缺血再灌注損傷提供動物實驗依據。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 實驗動物 30只清潔級家兔，體重2.5～3.5 kg，雌雄不限。由蘭州生物制品研究所實驗動物室提供，合格證號：2011900023。

1.1.2 藥物 破格救心湯：附子150 g，干姜60 g，炙甘草60 g，山萸凈肉120 g，生龍骨粉30 g，升牡蠣粉30 g，活磁石粉30 g，高麗參30 g（另煎），麝香0.5 g（沖），加水2000 ml，文火煮2 h后取400 ml。中藥由本院中藥房煎藥室提供。

1.1.3 主要設備 cTnT檢測儀銳普熒光干式定量分析儀（加拿大瑞邦生物醫學有限公司）；動物固定器/ZH-TXQ（河南原陽振華）；低速自動平衡離心機/TDZ4-WS（上海盧湘儀）；動物呼吸機/ALC-V8B（上海奧爾特科）；小動物手術器械箱/ZH1741-280（河南原陽振華）。

1.2 方法

1.2.1 實驗動物分組及準備 30只清潔級家兔，體重2.5～3.5 kg，雌雄不限。家兔在用基礎飼料適應性喂養1周后，按隨機數字表分為正常對照組、模型組、破格救心湯組，每組10只。造模前24 h，按人兔等效劑量計算，破格救心湯組分兩次灌胃破格救心湯10 ml/kg，模型組及正常對照組分兩次灌胃飲用水10 ml/kg。術前12 h禁食不禁水，模型組與破格救心湯組家兔麻醉仰臥固定，經口插入氣管插管以接呼吸機。常規消毒局麻后，分離左股動脈插入PE50導管測定動脈壓，在左股靜脈插入一條PE50導管至下腔靜脈用于血樣采集。經肢體皮下針頭常規記錄標準Ⅱ導聯心電圖。

1.2.2 動物模型制備 在誘導室顫15 min前，家兔經口氣管插管自由呼吸室內空氣條件下，記錄基礎數據并靜脈采血。預先經右頸外靜脈插入一條3 F的導管進入右心室，經管內插入一條帶彎頭的鋼絲，通過右心室心電圖確認鋼絲置于右心室內。通過此鋼絲給予60 Hz最大4 mA的電流持續放電3 min誘導室顫。當室顫持續5 min時，開始機械胸外按壓（頻率200 次/min、按壓深度兔胸廓前后徑的1/3）和呼吸機機械通氣（Fi02 1.0，通氣頻率30 次/min，潮氣量15 ml/kg），維持CPP在（25±2）mm Hg。胸外按壓2 min后如必要給予3次30 J單相波直流電電除顫，每次間隔2 min，間隔期間持續心臟按壓。15 min后自主循環仍未恢復視為復蘇失敗。判斷誘發室顫成功的標準為心電圖顯示室顫波形、有創血壓監測顯示正常的動脈搏動波消失；自主循環恢復標準：出現室上性自主心律、平均動脈壓≥60 mm Hg并持續5 min，自主呼吸恢復后停止機械通氣，呼吸室內空氣。復蘇成功后繼續監測24 h。24 h后經放血法處死家兔。

1.2.3 觀察指標 記算模型組、破格救心湯組復蘇后自主循環恢復率及24 h存活率，三組動物分別于致顫前、復蘇后1 h、3 h、6 h、12 h、24 h，經中心靜脈導管采血，通過熒光定量法檢測心肌肌鈣蛋白T。

1.3 統計學處理 采用SPSS 19.0軟件對所得數據進行統計分析，計量資料用（x±s）表示，比較采用t檢驗；計數資料采用 字2檢驗，P<0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 致顫后各組家兔自主循環恢復率及24 h存活率 模型組復蘇后自主循環恢復率與24 h存活率分別為70%與40%，破格救心湯組分別為90%與80%，組間比較差異具有統計學意義（P<0.05），見表1。

2.2 致顫前后各組家兔cTnT濃度變化 致顫前三組間cTnT濃度未見差異（P>0.05）；正常對照組與破格救心湯組致顫后各時間點cTnT水平均顯著高于對照組，破格救心湯組致顫后各時間點cTnT水平均低于模型組（P<0.05或P<0.01），見表2。

3 討論

祖國醫學認為心臟驟停后綜合癥是指各種內外因素導致心之臟真臟器受損，陰陽之氣突然離決，氣機不能復返，而表現為發病疾速，忽然神志散失，寸口、人迎、陰股脈搏動消失，呼吸微弱或決，全身青紫，瞳仁散大，四肢厥冷等一系列臨床危象的危重疾病。病機關鍵是陽氣暴脫，陽虛不能行血，導致瘀血阻滯。治以補氣固脫，回陽救逆為首務。破格救心湯脫胎于四逆湯類方、四逆湯衍生方參附龍牡救逆湯及張錫純來復湯，破格重用附子、山萸肉加麝香而成，經多年臨床驗證，其治療心衰特別是陽虛型療效確切。

現代藥理研究表明，方中所含四逆湯具有顯著增加心輸出量、增強心肌舒縮力、改善心力衰竭心臟血流動力學的作用[4]。附子干姜配伍對心力衰竭心陽虛衰證大鼠RAAS 具有調控作用，可降低心力衰竭大鼠血漿血管緊張素Ⅰ、Ⅱ以及醛固酮的含量[5]，附子含烏頭類生物堿，有類似β受體激動劑樣作用，能增強心肌收縮力，增加心輸出量（CO），舒張冠狀動脈及增加腦血流量；麝香提取物有擴張血管和強心的功效[6]，而山茱萸有強心、抗心律失常作用[7]。研究表明此方劑還能通過提高心肌組織中高能磷酸化合物的含量，保護心肌細胞超微結構，從而對組織缺氧缺血時細胞能量代謝障礙起到抑制作用，從而延長耐缺氧的時間，對急性心肌缺血有保護作用，對血壓有雙向調節作用。

血清心肌肌鈣蛋白（cTnT）是心肌組織特有的一種調節蛋白，當心肌受損時在血清中游離型cTnT的濃度與心肌損傷程度成正比[8-10]。本試驗中經破格救心湯預處理的心臟驟停模型家兔在心肺復蘇后，自主循環恢復率，24 h存活率均高于模型組，破格救心湯組在致顫后1 h、3 h、6 h、12 h、24 h各時間點cTnT水平均低于模型組（P<0.05或P<0.01），提示破格救心湯能明顯改善復蘇后家兔心功能，顯著降低心臟驟停再復蘇對心肌的缺血再灌注損傷，增加心肺復蘇成功率，其詳細機制待后續試驗中進一步證明。

參考文獻

[1] Eckstein M，Stratton S J，Chan L S.Cardiac arrest resuscitation evaluation in Los Angeles：CARE-LA[J].Annals of emergency medicine，2005，45（5）：504-509.

[2]李可.李可老中醫急危重癥疑難病經驗專輯[M].太原：山西科學技術出版社，2004：1-17.

[3] Kaul S.Myocardial contrast echocardiography 15 years of research and development[J].Circulation，1997，96（10）：3745-3760.

[4]楊輝，吳偉康.四逆湯全方及拆方對心衰大鼠血液動力學影響的實驗研究[J].新中醫，2001，33（11）：75-77.

[5]曾代文，彭成，余成浩，等.附子與干姜組分配伍對急性心衰心陽虛證大鼠血漿腎素-血管緊張素-醛固酮系統的影響[J].中藥藥理與臨床，2011，27（4）：5-7.

[6]黃婧娟，洪小蘇，徐衛亭，等.麝香保心丸對心梗后心衰家兔心肌細胞外間質重構及MMP-9/TIMP-1mRNA 表達的影響[J].中成藥，2011，33（7）：1116-1121.

[7]王永輝，閆潤紅，王惠潔，等.野生及人工種植山茱萸強心抗心律失常藥理作用比較[J].世界中西醫結合雜志，2008，3（9）：512-514.

[8]魏玉紅.血清肌鈣蛋白I在急性心肌梗死患者早期診斷中的意義[J].中國醫學創新，2011，8（11）：123-124.

[9]吳家富，陳澤金，金黎剛.評估心肌酶與肌鈣蛋白I對兒童心肌損傷的診斷價值[J].中國醫學創新，2011，8（11）：124-125.

[10]李佳，王芾，林藝，等.心臟肌鈣蛋白I與肌紅蛋白比值診斷急性心肌梗死[J].中國醫學創新，2012，9（7）：3-6.

（收稿日期：2013-04-17） （本文編輯：郎威）