氣相法測定大蒜類樣品中百菌清的殘留量

摘要：由于大蒜含豐富的蒜氨酸，在制樣粉碎的過程中使大蒜中的蒜酶被激活，并快速分解蒜氨酸，產生的活性較強的蒜素，干擾百菌清的測定。通過對制備好的樣品，進行不同時間段的預處理實驗，上機檢測，可以明顯的比較出活性物質對測定的影響，繼而優化實驗方法，提高分析準確性。

關鍵詞：大蒜；百菌清；氣相

前言

百菌清是廣譜、保護性殺菌劑。作用機理是能與真菌細胞中的三磷酸甘油醛脫氫酶發生作用，與該酶中含有半胱氨酸的蛋白質相結全，從而破壞該酶活性，使真菌細胞的新陳代謝受破壞而失去生命力。百菌清沒有內吸傳導作用，但噴到植物體上之后，能在體表上有良好的黏著性，不易被雨水沖刷掉，因此藥效期較長。在常溫貯存條件下穩定，對弱堿或弱酸性介質及對光照穩定，在強堿介質中分解。

1 材料與方法

1.1 主要儀器

氣相色譜，配電子捕獲檢測器。

1.2 主要試劑與耗材

（1）丙酮（C3H6O）:色譜純。（2）己烷（C6H14）:色譜純。（3）乙酸乙酯（C4H8O2）：色譜純。（4）氯化鈉（NaCl）：分析純。（5）丙酮+己烷(1:1)溶液：100mL丙酮和100mL己烷混合到一起，充分混勻。（6）10%氯化鈉溶液：100g氯化鈉溶解到900mL水中，混勻。（7）乙酸乙酯+正己烷（1+9）溶液：10mL乙酸乙酯與90mL正己烷充分混勻。（8）FLORISIL柱：DIKMA，1000mg/6Ml

1.3 檢測方法

1.3.1 樣品制備：將大蒜類樣品按照取樣規范，制取可食部分，使用粉碎機粉碎樣品，并放入自封袋密封，冷藏保存。

1.3.2 實驗方法：稱取5.00g樣品于50mL離心管中，加入30mL50丙酮/己烷溶液，均質提取2min，離心取上清液，上層用同量的溶劑再次提取，合并提取液于250mL分液漏斗。向分液漏斗中加入70mL10%氯化鈉溶液，進行液液萃取。靜置10min，將有機溶劑過無水硫酸鈉去水，接收于250mL茄形瓶中，旋蒸去溶劑。

將FLORISIL柱使用10mL己烷平衡，向茄形瓶中加入5mL正己烷溶解樣品，上柱；再用5mL*3正己烷上柱，棄去洗脫液；用20mL10%乙酸乙酯/己烷溶液洗脫柱子，接收洗脫液。旋蒸去溶劑，用2.00mL己烷定容。

1.4 儀器條件

（1）色譜柱：DB-17MS，30m*0.25mm*0.25μm。（2）升溫程序：100℃ 30℃/min 280℃（5min）。（3）進樣口溫度：250℃；檢測器溫度：300℃。（4）進樣量：1μL；柱流速：1.8mL/min

1.5 通過以上方法按照4個時間段進行了加標回收實驗

表 1 制樣后1小時標液譜圖與樣液譜圖比較

表 2 制樣后24小時標液譜圖與樣液譜圖比較

2 結果分析

通過實驗數據可以得出如下結論：大蒜在制樣后4小時內進行實驗，樣品本身所釋放的活性酶不會對實驗結果造成很大影響；隨著時間加長，樣品所釋放的活性物質越來越多，最終影響百菌清的回收率降低，甚至回收率為0。因此對于大蒜樣品在制樣后4小時內進行實驗可以有效的避免基質干擾。

參考文獻

[1]GB/T 5009.105-2003 黃瓜中百菌清殘留量的測定.