HPLC法測定糖液中5—羥甲基糠醛含量

摘要：采用高效液相色譜法對糖液中5-羥甲基糠醛含量進行了檢測，色譜柱為Agilent XDB C18 150×4.6mm，流動相：乙腈-水（20∶80），流速：1.0ml/min，檢測波長：230nm，在0.01mg/ml～0.20mg/ml范圍內(nèi)，5-羥甲基糠醛峰呈良好的線性關(guān)系，相關(guān)系數(shù)r=0.9986。

關(guān)鍵詞：糖液；5-羥甲基糖醛；HPLC

5-羥甲基糠醛是葡萄糖或果糖在高溫條件下經(jīng)脫水反應(yīng)生成的有害物質(zhì)，《中國藥典》（2010年版）葡萄糖注射液質(zhì)量標準中，將其做為雜質(zhì)項進行監(jiān)控，采用分光光度法測定葡萄糖注射液中5-羥甲基糠醛的含量。馮紅偉也用紫外分光光度法測定了5-羥甲基糠醛[1]，本文在吳黎明等[2，3，4]的研究基礎(chǔ)上，摸索了以乙腈-水溶液作為流動相，測定了糖液中5-羥甲基糠醛，方法更為簡便、快速。

1 儀器與試藥

Agilent 1200 高效液相色譜儀；乙腈為色譜純；5-羥甲基糠醛對照（99.5%， Aladdin 工業(yè)公司）

2 方法與結(jié)果

2.1 色譜條件

色譜柱：Agilent XDB C18 150×4.6mm；流動相：乙腈-水（20∶80），流速：1.0ml/min；柱溫：室溫；檢測波長：230nm，進樣量：20ul。圖譜見圖1。

圖1 5-羥甲基糠醛對照圖譜

2.2 線性與范圍

精密稱取5-羥甲基糠醛對照0.0405g，置200.0ml容量瓶中，加純化水溶解并稀釋至刻度，搖勻，作為標準溶液。分別精密移取該溶液0.5、1、2、4、8ml置10.0ml容量瓶中，加純化水稀釋至刻度，搖勻。取20μl注入高效液相色譜儀，記錄色譜圖。以峰面積為縱坐標，以濃度為橫坐標，進行線性回歸，結(jié)果顯示濃度在0.01mg/ml～0.20mg/ml范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。回歸方法為：y=2359x-8.8，相關(guān)系數(shù)為0.9986。

2.3 精密度試驗

精密稱取5-羥甲基糠醛對照0.0405g，置200.0ml容量瓶中，加純化水溶解并稀釋至刻度，搖勻。用微孔濾膜過濾，取濾液20μl進樣6次，峰面積RSD為0.37%。

2.4 回收率試驗

分別精密移取自制糖液（批號：130315）2ml、4ml、6ml，置10ml容量瓶中，每個濃度3份。分別加入標準溶液1.0ml，用純化水稀釋至刻度。取20μl注入液相色譜儀進行測定，計算回收率。結(jié)果見表1：

2.5 樣品測定

精密移取自制糖液（批號：130315、130316、130317）2.0ml，置10.0ml容量瓶中，搖勻，微孔濾膜過濾，取20μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計算5-羥甲基糠醛含量。測定結(jié)果見表2：

表2 樣品測定結(jié)果

3 結(jié)束語

采用分光光度法測定糖液中5-羥甲基糠醛，會受到有紫外吸收物質(zhì)的干擾。本法采用高效液相色譜法對糖液中5-羥甲基糠醛含量進行檢測，采用C18柱，乙腈水溶液做流動相，操作簡單、快速，是一種有效測定糖液中5-羥甲基糠醛的方法。

參考文獻

[1]馮紅偉.紫外分光光度法測定糖密中5-羥甲基糠醛含量[J].食品工業(yè)科技，2010年第03期，365-367.

[2]吳黎明.高效液相色譜法測定蜂王漿中羥甲基糠醛含量[J].食品科學(xué)，2008，Vol.29，No.03.

[3]孔祥紅.高效液相色譜法測定濃縮果汁及水果果糖中5-羥甲基糠醛[J].食品工業(yè)科技，2012年第23期，314-315.

[4]陳磊.高效液相色譜法測定黃酒中的5-羥甲基糠醛[J].食品科學(xué)，2009，Vol.30，No.24.369-371.

作者簡介：靳艷仿（1974-），女，漢族，執(zhí)業(yè)藥師，主要從事藥業(yè)研發(fā)和質(zhì)量管理工作。