pH值對大西洋鮭淀粉酶活性的影響

【摘 要】采用碘淀粉比色法測pH對大西洋鮭胃、肝臟、前腸、中腸、后腸中淀粉酶活性的影響。結果表明，大西洋鮭淀粉酶的活力均隨著pH 的升高呈現先升后降的變化趨勢。大西洋鮭胃、肝臟、前腸、中腸、后腸淀粉酶最適pH值分別為5.0、6.5、7.5、7.5、7.5。在各自最適pH下， 淀粉酶的活性順序為肝臟>后腸>前腸>中腸>胃，各部位之間差異顯著（P<0.05）。

【關鍵詞】pH值；大西洋鮭；淀粉酶活性；消化酶；影響

大西洋鮭屬鮭科鮭屬的冷水性魚類。大西洋鮭成魚體形側扁，呈流線型。頭部無鱗，口端位，吻突出，口裂微斜，上下頜各具齒一列，上頜骨后端不達眼部。生殖季節雄魚吻端突出，呈鉤狀，上下相對如鉗形。背鰭較短居中，鰭條間具有黑色斑點，脂鰭肉質末端游離，脂鰭基部向前向下至側線的鱗片為13枚，尾鰭幼魚深叉形，成魚為半月形。側線鱗完全。體背部黑灰色或灰黃色并帶有黑色斑點，體側至腹部銀白色。

消化酶是指由消化系統和消化腺分泌的，起營養和消化作用的酶類。對消化酶的特性進行研究，是認識消化酶的結構與功能關系，探討消化酶作用機理的一種重要手段。對于魚類消化道中消化酶的研究，是了解魚類消化生理的重要內容，對于魚類養殖過程中人工餌料的合理配制也具有重要意義。pH又是影響魚類消化生理活動的重要因素之一，也是酶動力學的重要研究內容之一。有關pH對大西洋鮭消化酶活性的影響方面的研究報告至今仍較為少見。本文初步研究pH對大西洋鮭淀粉酶活性的影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗用大西洋鮭采自長春市海水養殖科技示范基地，選取5尾體質健壯、無病無傷的大西洋鮭，體長（28.23±3.96）cm，體質量（304.18±17.46）g。

1.2 研究方法

1.2.1 設定淀粉酶活性測定的pH梯度

采用0.2mol/L醋酸緩沖液，在pH 5.0～8.5的范圍內，以0.5 pH為梯幅，設置7個pH梯幅，用以測肝臟、前腸、中腸和后腸。在pH 2～8的范圍內，以1 pH為梯幅，共設置7個pH梯幅，用以測胃。分別在各pH條件下，測酶的活性，反應溫度（37±1） ℃。

1.2.2 酶液的制備

試驗魚采集后暫養于水族箱中，饑餓24h。處理時先測量魚的體長及體質量，然后置于冰盤中解剖，分離出肝臟、胃、腸，剔除上面的脂肪，用雙蒸水清洗腸、胃內的內容物，然后測其體積。分別取大西洋鮭的肝臟、胃、腸置于冰浴中，加其10倍體積的預冷重蒸水，在玻璃勻漿器中勻漿，勻漿液用超速真空離心機于4℃，9000 r/min離心30 min，取上清液用預冷重蒸水稀釋，稀釋至一定體積用作活性測定，至于冰箱中保存，24h內完成所有測定。

1.2.3 淀粉酶活性測定方法

采用碘-淀粉比色法。取2%淀粉液2ml，pH為7.0的0.2M磷酸緩沖液在（37±1）℃水浴中平衡，加酶液0.5ml，保溫30min，于水中煮沸10min，然后用次亞碘法測定葡萄糖，取1ml反應液于碘量瓶中，加0.1M的碘液1ml，滴加0.15M的氫氧化鈉1ml，搖勻，于室溫下暗處靜置20min。再加0.4ml3MH2SO4酸化。以0.025M的硫代硫酸鈉滴定，指示劑為2%淀粉液，終點無色。

1.2.4 淀粉酶活性的定義

在pH 為7.0和（37±1）℃條件下水浴30min，淀粉水解每min產生1μg分子葡萄糖的酶量，為一個淀粉酶的活性單位。比活力定義為活性單位U·mg-1蛋白。

1.3 數據處理

試驗數據用統計學方法進行處理，統計分析采用SPSS13.0統計軟件，用SPSS13.0中AMOVA進行方差分析，LSD法進行多重比較，結果用平均值±標準誤差（mean±SD）表示。

2 結果與分析

在不同的pH條件下，大西洋鮭不同部位消化道的淀粉酶活性變化如圖1和圖2所示，結果表明：胃在pH為5的酸性條件下，其淀粉酶的活性最高，前腸、中腸和后腸在pH為7.5中性偏堿性條件下，其淀粉酶的活性最高，而在酸性條件下，其淀粉酶的比活力比胃低，在堿性條件下，其淀粉酶的活性又較肝臟高。由圖2可見，肝臟在pH為6.5左右，其淀粉酶的活性略高于前腸、中腸、后腸淀粉酶的活性，各組織在其各自最適pH值，淀粉酶的活性順序為肝臟>后腸>前腸>中腸>胃，各部位之間差異顯著（P<0.05）。

3 討論

在本試驗條件下，大西洋鮭對淀粉酶的消化作用主要是在中性偏酸條件下完成的。這一點與王重剛等[10]對真鯛的研究結果相反。國內外其它研究結果表明很多魚類淀粉酶的最適pH值在堿性或中性偏酸性的范圍內。倪壽文等[1，2]報告了草魚、鯉魚、鰱魚、鳙魚的肝胰臟和腸淀粉酶的最適pH分別為6.4和6.4，6.4和6.4，7.2和6.8，7.2和6.8。5種魚的肝胰臟淀粉酶活性由高到低的順序為：草魚>鯉魚>尼羅羅非魚>鰱魚>鳙魚；腸淀粉酶活性由高到低的順序為：尼羅羅非魚>草魚>鯉魚>鰱魚>鳙魚，現有的研究表明：各種魚類的腸淀

粉酶的最適pH為5.0～8.0。即從弱酸到弱堿，平均值近于中性，比腸蛋白酶的最適pH （8.3）低，與飽食后的腸液pH基本一致（6.8～7.8）。不同食性魚類（草食、雜食和肉食）以及有胃魚類（虹鱒和羅非魚）和無胃魚類（草魚等鯉科魚類）的腸淀粉酶的最適pH差異不

4 結論

大西洋鮭胃、肝臟、前腸、中腸、后腸淀粉酶最適pH分別為5.0、6.5、7.5、7.5、7.5，淀粉酶的活性順序為肝臟>后腸>前腸>中腸>胃，各部位之間差異顯著（P<0.05）。

參考文獻

[1]倪壽文，桂遠明，劉煥亮.草魚、鯉、鰱、尼羅羅非魚淀粉酶活性比較[J].大連水產學院學報，1992，7（1）：24-31.

[2]倪壽文，桂遠明，劉煥亮.草魚、鯉、鰱、尼羅羅非魚肝胰臟和腸道蛋白酶活性的初步探討[J].動物學報，1993，39（2）：160-168.

[3]黃耀桐，劉永堅.草魚腸道肝胰臟蛋白酶活性的初步研究[J].水生生物學報，1988，（4）：328-333.

[4]田麗霞，林鼎.草魚攝食兩種蛋白質飼料后消化酶活性變動比較[J].水生生物學報，1993，17（1）：58-65.

[5]葉元土.鯉魚肝胰臟和腸道淀粉酶活性研究[J].水產科學，1992，11（10）：14-16.