子宮內膜樣腺癌中COX—2和PTEN蛋白表達及臨床意義

摘要：目的 檢測COX-2蛋白、PTEN蛋白在子宮內膜樣腺癌中的表達，探討二者與組織分級和臨床分期的關系以及在子宮內膜樣腺癌轉移浸潤中的意義。方法 用免疫組織化學技術和圖像分析法檢測150例子宮內膜樣腺癌、150例正常子宮內膜組織中COX-2蛋白和PTEN蛋白表達。結果 PTEN蛋自在子宮內膜樣腺癌組織中的陽性表達率為32.7%，與正常子宮內膜組織（86.0%）比較差異顯著（P<0.05）；COX-2蛋白在子宮內膜樣腺癌組織中的陽性表達率為74.7%，與正常子宮內膜組織（27.3%）相比差異顯著（P<0.05）；PTEN蛋白與子宮內膜樣腺癌的組織學分級及肌層浸潤深度有關（P<0.05）；COX-2蛋白與子宮內膜樣腺癌的組織學分級及淋巴轉移度有關（P<0.05）。COX-2蛋白陽性表達與COX-2蛋白陽性表達呈負相關（r=-0.742，P<0.01）。結論 COX-2蛋白、PTEN蛋白在子宮內膜樣腺癌組織中均異常表達，結合臨床病理參數可作為預測子宮內膜樣腺癌惡性程度及預后判定的客觀指標。

關鍵詞：子宮內膜樣腺癌；COX-2；PTEN；免疫組織化學

環氧化酶-2（cyclooxygenase-2，COX-2）是花生四烯酸轉化成前列腺素過程中的重要限速酶。研究表明COX-2在包括惡性血液病在內的多種腫瘤中表達增加，并認為其與腫瘤細胞的增殖、黏附及腫瘤的浸潤和轉移密切相關[1]。PTEN基因位于染色體10q23.3，是迄今發現的第一個具有磷酸酶活性的抑癌基因。目前研究發現PTEN參與了細胞增殖、周期進程和信號傳導通路的調控，在腫瘤發生和轉移中起非常重要的作用[2]。子宮內膜癌是發生于子宮內膜的上皮性惡性腫瘤，以來源于子宮內膜腺體的腺癌最常見，其致癌機制與癌基因、抑癌基因和DNA損傷修復基因的異常表達有關。近年來有關COX-2、PTEN在某些腫瘤發生發展中起到的作用已引起人們注意，但在子宮內膜癌中研究較少。本研究檢測COX-2、PTEN在子宮內膜樣腺癌組織中的表達情況，分析其與臨床病理指標的相關性，探討兩者表達狀況與病情進展及預后等的相關性。

1 資料與方法

1.1一般資料 150例子宮內膜樣腺癌組織來自 本院2008年1月～2010年12月進行手術治療并經病理組織學檢查確診的手術標本。參照國際婦產科聯盟分期標準：I期69例，Ⅱ期35例，Ⅲ期46例；其中高分化（G1）48例，中分化（G2）53例，低分化（G3）49例。所有標本均為原發性腫瘤，術前未接受放化療或激素治療。患者年齡29.4～65.1歲，平均53.9歲。同時選取本院經手術切除的病理診斷為子宮內膜單純性增生的30例子宮內膜組織進行對照研究。

1.2免疫組織化學染色 組織蠟塊行4μm厚連續切片，石蠟切片常規脫蠟。采用鏈霉素抗生素蛋白-過氧化物酶（SP）法檢測COX-2及PTEN蛋白表達，以PBS代替一抗作為陰性對照。按照說明書進行操作。采用雙盲閱片法進行結果判定。

1.3統計學分析 統計學方法應用SPSSl 8.0統計分析軟件進行分析。各組間計數資料采用χ2檢驗，不滿足χ2檢驗應用條件的采用Fisher精確概率計算法。計量資料兩組比較采用t檢驗，多組比較采用方差分析，兩兩比較采用snk-q檢驗。相關分析采用Spearman等級相關分析。

2 結果

2.1 COX-2和 PTEN蛋白在不同子宮內膜組織中表達 COX-2蛋白在正常子宮內膜及子宮內膜樣腺癌組織中陽性表達率分別為27.3%（41/150）、74.7%（112/150），呈下降趨勢，兩組間差異顯著（P<0.05）。PTEN蛋白在正常子宮內膜及子宮內膜樣腺癌組織中陽性表達率分別為86.0%（129/150）、32.7%（39/150），呈升高趨勢，兩組間差異顯著（P<0.05）。

2.2 COX-2和PTEN蛋白表達與子宮內膜樣腺癌臨床病理特征的關系 COX-2蛋白與子宮內膜樣腺癌的手術-病理分期、組織學分級及淋巴結轉移有關（P<0.05）；PTEN蛋白與子宮內膜樣腺癌的手術一病理分期、組織學分級及肌層浸潤深度有關（P<0.05），

2.3 COX2和PTEN蛋白在子宮內膜樣腺癌組織中表達的相關性 在150例子宮內膜樣腺癌組織中COX2蛋白陽性表達率為74.7%，而PTEN陽性表達率為32.7%，COX2蛋白陽性表達而PTEN陽性表達者占21例，二者同為陽性表達者占4例，二者同為陰性表達者占4例。經非參數Spearman等級相關分析表明，二者呈負相關（r= -0.742，P<0.05）。

3 討論

PTEN作為抑癌基因，其編碼的蛋白具有脂質磷酸酶和蛋白磷酸酶活性，發揮腫瘤抑制功能[3]，PTEN蛋白表達降低及缺失會影響其抑制腫瘤生長的功能。包括子宮內膜樣腺癌在內的多種腫瘤中PTEN基因存在不同程度的突變、缺失，導致PTEN蛋白的表達減低。

本研究結果顯示，子宮內膜樣腺癌患者中PTEN陽性表達明顯低于正常增殖期子宮內膜中的表達，且病理分級越高PTEN表達越低。PTEN在淺肌層中的表達也明顯高于深肌層表達，預示可能與子宮內膜樣腺癌進展及預后不良密切相關。

COX-2作為一種誘導型酶，在包括子宮內膜樣腺癌在內的多種腫瘤中表達增加，具有如下作用：①刺激腫瘤細胞的增殖、抑制腫瘤細胞凋亡。COX-2過表達可上調細胞內抗凋亡蛋白Bcl-2及Bcl-xL的表達，降低凋亡蛋白caspase-3/9活性；②促進腫瘤內血管形成；③促黏附和轉移：COX-2過表達可促進金屬基質蛋白酶-2表達增加，提高細胞與細胞外基質蛋白黏附能力，增加腫瘤細胞的侵襲力[4]。

本研究結果表明，子宮內膜樣腺癌患者中COX-2陽性表達明顯高于正常增殖期子宮內膜中的表達，且COX-2陽性表達與子宮內膜樣腺癌患者病理分級及是否轉移相關。病理分級越高，有淋巴轉移的患者COX-2表達明顯增加。

有關COX-2蛋白和 PTEN蛋白在腫瘤組織中表達的相關性已有文獻對其進行報道。研究發現大腸癌細胞中COX-2蛋白表達與PTEN蛋白表達呈負相關。成志勇等[6]對白血病相關特異基因的研究顯示PTEN可能通過抑制COX-2表達從而抑制白血病細胞增殖、黏附功能。COX-2蛋白陽性表達與PTEN蛋白陽性表達呈負相關。本研究結果提示兩者與子宮內膜樣腺癌的發生、發展轉移過程有關。其可能機制如下：①腫瘤發展依靠血管內皮生長因子（VEGF）促進腫瘤新生血管生成，COX-2原癌基因的激活能促進腫瘤細胞分泌VEGF[5]， PTEN則通過血管內皮生長因子（VEGF）、成纖維細胞因子（bFGF）抑制腫瘤生成血管。② PTEN蛋白通過其細胞表面作用靶點（PIP3/FAK）表達特性可直接作用于COX-2蛋白受體，阻斷COX-2蛋白的信號轉導，減少VEGF釋放。③COX-2蛋白擴增和過度表達會導致正常細胞的惡性轉化，PTEN蛋白抑制腫瘤細胞侵襲和轉移，調節細胞對促凋亡因子的敏感性。因此，聯合檢測COX-2蛋白和 PTEN蛋白可作為預測子宮內膜樣腺癌的惡性程度的指標。

參考文獻：

[1]王慶利，盛春元，趙桂宏.新型非甾體抗炎藥 COX-2選擇性抑制劑的研究及應用進展 [J].中國藥房，2001，12（5）：304-304.

[2]張偉峰，楊維良.PTEN 基因的研究進展（文獻綜述）[J].國外醫學.外科學分冊，2003，5：013.

[3]任玉蘭，王華英.子宮內膜癌的分子靶向治療新進展[J].中國癌癥雜志，2010，20（5）

[4]廖化梅，劉建.環氧化酶-2與雌，孕激素受體在子宮內膜癌中的表達及相關性研究[J].重慶醫學，2011，40（24）：2395-2397.

[5]Li C J， Chang J K， Wang G J， et al. Constitutively expressed COX-2 in osteoblasts positively regulates Akt signal transduction via suppression of PTEN activity[J]. Bone，2011，48（2）：286-297.

[6]成志勇，張昕，王哲，等.PTEN和COX-2在髓系白血病中的表達及作用機制探討[J].中華檢驗醫學雜志，2012，35（2）：165-169.

編輯/王敏