【摘要】目的分析結直腸癌組織中miR-21的表達及其臨床病理學意義。方法選取我院2010年1月——2010年12月間手術切除的結直腸癌標本30例作為研究對象,通過采用TaqMan實時定量RT-PCR法對該組標本中的結直腸癌組織miR-21的表達進行檢測,并與其癌旁正常組織miR-21的表達進行對比觀察,從而探討結直腸癌臨床病理因素與miR-21的表達之間的關系。結果通過與對比癌旁正常組織miR-21的表達進行對比觀察發現,結直腸癌組織miR-21的表達明顯要高很多,差異具有統計學意義(P<0.05)。結直腸癌組織miR-21的表達與患者的年齡、性別、腫瘤部位等情況沒有較大的關聯,而與其淋巴結轉移、腫瘤病理學分級、及術后生存率三個方面有著緊密的關系。結論結直腸癌組織miR-21的表達要高于正常組織,并且它可能與大腸癌的發生及腫瘤的生長有著密切的聯系。
【關鍵詞】結直腸癌;miR-21;臨床意義
隨著科學技術水平和醫療水平的進步與發展,對于病理的研究也更加深入。臨床研究表明,在所有與腫瘤相關的因素中,有一個關系非常密切的基因-miRNA,這也是目前腫瘤學中的重點研究內容[1],為了進一步分析結直腸癌組織中miR-21的表達及其臨床病理學意義,本文,選取我院2010年1月——2010年12月間手術切除的結直腸癌標本30例作為研究對象,通過采用TaqMan實時定量RT-PCR法對該組標本中的結直腸癌組織miR-21的表達進行分析探討。現報道如下。
1資料與方法
1.1一般資料選取我院2010年1月——2010年12月間手術切除的結直腸癌標本30例作為研究對象,并設為觀察組,同時取癌旁正常組織設為對照組。本組所有標本都是取自于未實施化療、放療的患者,患者在手術切除后立即取樣,并通過RNAalter保護液保護,放置于零下二十度的冰箱冷凍保存,確保標本的可靠性、無污染性及不會變質。
1.2方法本次使用的儀器為美國ABI公司生產的Real-time PCR儀和德國EPPENDORF公司生產的分光光度儀,試劑主要包括TaqMan 2 ×universal PCR master mix、mirvana PARIS kit、TaqMan microRNA assays、TaqMan microRNA reverse transcription kit等常規試劑。具體操作步驟可以分為以下幾個方面:首先是提取總RNA,使用的試劑主要是 mirvana PARIS kit,具體操作方法則根據說明書,然后檢測其A260/A280吸光值,使用的儀器為德國EPPENDORF公司生產的分光光度儀。試劑提取出來之后應放置在零下二十度冰箱冷凍保存,防止標本發生質變;其次是采用TaqMan實時定量RT-PCR,采用的試劑為TaqMan microRNA assays,操作方法根據說明書進行,在此過程中要根據實際要求注意反轉錄體系、反應條件和反應體系[2]。
1.3數據處理將本次統計調查的實驗數據均錄入SPSS17.0軟件包進行統計學分析,miR-21的表達數據以中位數和四分位數間距表示。對于組織間的表達差異主要采用mann-whitney U檢驗和配對樣本的非參數wilcoxon符號秩和檢驗,前者主要針對于不同臨床病理學分組間的表達差異,后者主要針對于腫瘤與其正常組織間的表達差異,以P<0.05為差異具有統計學意義[3]。
2結果
通過與對比癌旁正常組織miR-21的表達進行對比觀察發現,結直腸癌組織miR-21的表達明顯要高很多,差異具有統計學意義(P<0.05)。結直腸癌組織miR-21的表達與患者的年齡、性別、腫瘤部位等情況沒有較大的關聯,而與其淋巴結轉移、腫瘤病理學分級、及術后生存率三個方面有著緊密的關系。
3討論
在所有的惡性腫瘤之中,結直腸癌是最常見也是致死率最高的類型之一,且其發病機制和病情變化過程也非常復雜。大量的臨床研究資料表明,在腫瘤的生長演變過程中一個重要的部分便是miRNA,它貫穿了整個腫瘤生命演變的過程,從細胞的分裂、細胞增殖與凋亡、胚胎發育等等[4]。隨著科學技術水平也醫療技術水平的進步發展,對miRNA的研究也更加深入,并發現在miRNA中有一項基因的表達非常之高,那便是miR-21,miR-21也被認為是一種癌基因。本次研究主要通過采用TaqMan實時定量RT-PCR法對標本中的結直腸癌組織miR-21的表達進行檢測,并與其癌旁正常組織miR-21的表達進行對比觀察,從而探討結直腸癌臨床病理因素與miR-21的表達之間的關系,結果表明,結直腸癌組織miR-21的表達要高于正常組織,與相關研究的結論保持一致,由此可以說明,miR-21是一種結直腸癌的癌基因,它在機體內對結直腸癌起到了促進生長和發展的作用,并且它可能與大腸癌的發生及腫瘤的生長有著密切的聯系。miR-21有可能成為結直腸癌預后的新指標及治療靶點。
參考文獻
[1]魯華東,劉忠臣,潘超,呂彥,殷平.結直腸癌中miR-21的表達及其臨床病理學意義[J].臨床與實驗病理學雜志,2013,(05):516-519.
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