卵巢癌組織中GRP78表達與臨床病理參數(shù)相關(guān)性的研究

【摘要】目的探討卵巢癌中GRP78表達與臨床指標及預(yù)后的相關(guān)性。方法采用免疫組織化學(xué)方法檢測145例卵巢癌和37例正常卵巢標本中GRP78的蛋白表達，并分析GRP78表達與臨床病理參數(shù)的相關(guān)性、化療耐藥和預(yù)后的相關(guān)性。結(jié)果卵巢癌中GRP78表達陽性率74.5%，癌旁組織中GRP78表達陽性率29.7%，兩者相比有顯著性差異（P=0.001）；在卵巢癌組織中，GRP78表達水平與患者年齡、病理類型無關(guān)，而與患者組織學(xué)分級和臨床分期相關(guān)，低分化和III-IV期進展患者GRP78表達水平顯著明顯增高；此外，GRP78表達與患者順鉑耐藥和預(yù)后亦具有相關(guān)性。結(jié)論GRP78在卵巢正常細胞向惡性細胞轉(zhuǎn)化的過程中可能扮演了重要角色，檢測GRP78的表達可能有助于對卵巢癌的預(yù)防及早期診斷。

【關(guān)鍵詞】卵巢癌；GRP78；預(yù)后

卵巢癌是嚴重威脅婦女健康的惡性腫瘤，具有高發(fā)病率和高致死率的特點。研究表明，葡萄糖調(diào)節(jié)蛋白78（GRP78），是位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的重要分子伴侶，屬于熱休克蛋白70家族的一員。GRP78在內(nèi)質(zhì)網(wǎng)中參與阻止內(nèi)質(zhì)網(wǎng)新生肽聚集、調(diào)節(jié)內(nèi)質(zhì)網(wǎng)鈣穩(wěn)態(tài)、抗內(nèi)質(zhì)網(wǎng)相關(guān)性細胞凋亡以及啟動未折疊蛋白反應(yīng)等細胞生命過程[1]。本研究檢測了145例卵巢癌與37例癌旁組織中GRP78蛋白表達情況，并就其與臨床指標以及預(yù)后等病理參數(shù)的相關(guān)性進行了分析。

1資料與方法

1.1標本來源與病例資料收集阜新婦產(chǎn)醫(yī)院2002年1月——2010年10月間經(jīng)病理診斷明確的、手術(shù)切除的卵巢癌標本145例和相應(yīng)的癌旁“正常”組織37例。年齡在32-75歲。

1.2免疫組化染色方法采用免疫組化SP法檢測145例標本中GPR78在卵巢癌中的表達。兔抗人GPR78抗體購自美國Santa Cruz公司，SP試劑盒、DAB顯色劑均購自北京中杉金橋公司。免疫組化染色步驟參照SP試劑盒操作說明進行，一抗稀釋度為1∶100，二抗稀釋度為1∶200。陰性對照采用PBS液代替一抗。

1.3結(jié)果判定標準采用雙盲法隨機記數(shù)5個高倍視野（×400），由兩名病理醫(yī)生獨立觀察，細胞被染色為棕黃色或棕褐色者為陽性。采用PBS代替一抗染色作為陰性對照，結(jié)果判定標準參照Fromowitz陽性細胞半定量分級法[2]。

1.4統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包處理數(shù)據(jù)。GRP78表達水平與臨床指標相關(guān)性采用卡方檢驗，P<0.05為有統(tǒng)計學(xué)意義。

2結(jié)果

2.1GRP78在卵巢癌組織中表達情況GRP78陽性著色主要分布于胞漿，呈棕色；在145例卵巢癌標本中GRP78陽性率74.5%；在37例癌旁組織中，GRP78表達陽性率29.7%；GRP78表達陽性率卵巢癌與癌旁組織相比有統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05）。

2.2GRP78表達與卵巢癌臨床指標相關(guān)性在卵巢癌組織中，GRP78表達水平與患者病理類型無關(guān)，與患者年齡、組織學(xué)分級、臨床分期有關(guān)。卵巢癌年齡越大、組織學(xué)分級越高、臨床分期越晚，GRP78表達陽性率越高，具有明顯統(tǒng)計學(xué)差異（P<0.05），見表1。

2.3卵巢癌組織中GRP78與化療耐藥、生存期相關(guān)性分析145例患者次術(shù)后均接受了至少3個療程的以順鉑為基礎(chǔ)的聯(lián)合化療，對其進行化療反應(yīng)評價，并與GRP78表達進行相關(guān)性分析，108例GRP78陽性表達者中24例對化療耐藥；37例GRP78陰性者中3例耐藥，二者比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。進一步對GRP78表達與患者生存情況進行了分析，結(jié)果發(fā)現(xiàn)GRP78表達陽性患者5年生存率為38.9%，GRP78表達陰性患者5年生存率為56.8%，差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。

3討論

本研究結(jié)果顯示卵巢癌組織中GRP78陽性的表達指數(shù)顯著高于癌旁組織，這可能是因為實體腫瘤的血供不足導(dǎo)致局部的酸中毒、缺氧和營養(yǎng)缺乏，從而激活GRP78基因的啟動子，導(dǎo)致GRP78的過度表達。本研究還發(fā)現(xiàn)不同分化程度的卵巢癌細胞中GRP78表達的水平也不同[3]，低分化癌多呈強陽性表達，而在高、中分化癌中多呈弱陽性或陽性表達。以上研究結(jié)果提示研究GRP78可能會成為協(xié)助判斷卵巢癌細胞分化程度和臨床分期的一種新的有價值的分子標記物。類藥物是卵巢癌一線化療方案的基礎(chǔ)，順鉑的主要作用靶點是DNA，干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄，從而誘導(dǎo)腫瘤細胞的凋亡。卵巢癌組織中GRP78的檢測可成為預(yù)測卵巢癌患者對化療是否敏感的指標之一。

綜上，GRP78可作為分子伴侶蛋白在卵巢癌的發(fā)生、發(fā)展中作為促癌基因，值得我們對之進行更深入的研究。從而為卵巢癌發(fā)病機理以及卵巢癌的基因治療提供可行性的依據(jù)。

參考文獻

[1]Higa A，Chevet E.Redox signaling loops in the unfolded protein response[J].Cell Signal，2012，24（8）：1548-55.

[2]Hetz C.The unfolded protein response：controlling cell fate decisions under ER stress and beyond[J].Nat Rev Mol Cell Biol，2012，13（2）：89-102.

[3]Fromowitz FB，Voilg MV，Chaos M，et al.Ras p21 expression in the progression of brain cancer[J].Human Pathol，1987，18（4）：1268-1275.