半乳糖凝集素—1與基質金屬蛋白酶—9在宮頸癌中的表達及其臨床意義

【摘要】目的研究半乳糖凝集素-1（Galectin-1）與基質金屬蛋白酶-9（MMP-9）在宮頸癌中的表達及其臨床意義。探討其表達水平與宮頸癌浸潤、遠處轉移的關系。方法利用免疫組織化學S-P法檢測Galectin-1與MMP-9在正常宮頸、宮頸上皮內瘤變、宮頸浸潤癌組織中的表達。結果Galectin-1與MMP-9在正常宮頸、宮頸上皮內瘤變、宮頸浸潤癌中的表達水平隨著惡性度增加呈逐漸上升趨勢（P<0.05）。有淋巴結轉移、臨床分期晚期、局部深度浸潤中表達水平較高（P<0.05）。結論在宮頸癌變的過程中，Galectin-1與MMP-9在宮頸癌的中的表達與宮頸癌的發生、發展、淋巴結轉移及宮旁浸潤有密切的關系。

【關鍵詞】Galectin-1；MMP-9；宮頸癌；腫瘤轉移；免疫組化

宮頸癌是全球女性中僅次于乳腺癌的第二個最常見的惡性腫瘤。近年來我國宮頸癌的發病率逐年增高，并出現年輕化趨勢[1]。本研究利用免疫組化的方法研究Galectin-1與MMP-9在正常宮頸、宮頸上皮內瘤變（CIN）、宮頸浸潤癌中的表達水平，來探討二者與宮頸癌發生、發展及其預后情況。

1資料與方法

1.1材料隨機選取我院2009年1月——2013年1月在我院手術切除的石蠟標本（共120例），包括CIN標本30例（CINⅠ7例、CINⅡ8例、CINⅢ 15例），宮頸浸潤癌標本70例，其中早期（Ⅰa-Ⅱa）40例，中晚期（Ⅱb-Ⅳb）30例，其中鱗癌55例，腺癌15例，高分化24，中分化28，低分化18。同時選取因非宮頸病變而行子宮全切的正常宮頸標本20例作為對照。所選取的標本術前均未行放化療。患者年齡21-74歲，平均年齡47.5歲。

1.2方法石蠟切片常規脫蠟脫水，0.01mol/L枸櫞酸鹽緩沖液中微波處理進行抗原修復，3%H2O2孵育20min，PBS洗三次；滴加封閉血清孵育20min，滴加一抗（Galectin-1，MMP-9）4℃孵育過夜，一抗體濃度按1∶100稀釋，PBS洗三次，滴加辣根過氧化物酶標記二抗抗體孵育20min，二抗濃度按1：500稀釋，PBS洗三次；DAB溶液顯色；自來水沖洗，蘇木素復染脫水封片1分鐘，水洗返藍，脫水，光鏡下觀察。PBS液代替一抗作陰性對照。

1.3結果判定Galectin-1主要表達在細胞漿，有棕色或棕黃色顆粒為陽性細胞，MMP-9蛋白陽性為細胞漿或細胞核中出現黃色或棕黃色顆粒，根據陽性細胞比例判定[2]：著色細胞數<10%計1分；著色細胞數在10%-50%計2分；細胞著色數>50%計3分；根據染色強度判定：弱染色計1分，中度著色計2分，強著色計3分。將每張切片平均著色程度得分與平均著色細胞百分率得分各自相乘為其最后得分。

1.4統計方法采用SPSS19.0軟件進行統計學分析，采用χ2檢驗，二者相關性分析采用Spearman等級相關分析，以P<0.05為有統計學差異。

2結果

2.1Galectin-1、MMP-9在宮頸不同病變程度中的表達結果galectin1在正常宮頸組織中弱表達（35%），在CIN中低表達（63.3%），宮頸癌中高表達（81.4%），差異顯著，有統計學意義（X2=16.36，P<0.05）。MMP9在正常宮頸組織、CIN、宮頸癌組織中的陽性表達率分別為45%、60%、84.3%，差異統計學意義（X2=14.51，P<0.05）。

2.2Galectin-1、MMP-9與宮頸癌的臨床病理參數關系Galectin-1蛋白在宮頸癌中的陽性表達率隨臨床分期增高而增高，差異均有統計學意義（P<0.05）。有淋巴結轉移的宮頸癌組織中Galectin-1陽性表達率高于無淋巴結轉移者，差異有統計學意義（P<0.05）。galectin-1與MMP9表達均與宮頸腺癌患者年齡無關（P>0.05）。

2.3Galectin-1與MMP-9相關性二者在宮頸鱗癌中的表達呈正相關，見表1。

3討論

Galectin-1在多種腫瘤的發展、轉移中發揮重要作用。研究證實，Galectin-1在很多腫瘤組織中的表達水平上調[3]。本實驗發現，Galectin-1在宮頸浸潤癌及CIN中的表達遠高于在正常宮頸組織中。

本研究對70例宮頸鱗癌組Galectin-1及MMP-9的表達進行了分析，采用spearman相關性檢驗，兩者表達呈正相關（r=0.493，P<0.01），提示兩者在宮頸癌的發生發展及浸潤、轉移過程中具有某種內在聯系，可能是兩者在體內的協同作用導致MMP-9活性增強，從而使ECM水解增加，使腫瘤細胞的穿透變得更加容易，影響腫瘤的浸潤、轉移。

因此Galectin-1和MMP-9協同作用在腫瘤的血管生成、降解基底膜，使腫瘤在發生過程中，不斷的進行局部浸潤侵襲、淋巴轉移，在宮頸癌發生、發展及預后中起了主要作用。

參考文獻

[1]朱曦齡，梁莉，丁彥青.Galectin-1在大腸癌組織中的表達及其臨床意義[J].南方醫科大學學報，2007，27（9）：1331-1336.

[2]黃海萍，葉學正，周琦，等.MMP-9在宮頸上皮內瘤變及宮頸癌中的表達[J].腫瘤預防與治療，2008，21（3）：267-269.

[3]Spano D，Russo R，Di Maso V，et al.Galectin-1 and its involvement in hepatocellular carcinoma aggressiveness[J].Mol Med，2010，16（3-4）：102-115.