獻血者街頭ALT快速檢測儀與實驗室全自動生化儀比對分析及偏倚評估

【摘要】目的依據《血站技術操作規程（2012版）》附錄B對街頭快速檢測獻血者丙氨酸氨基轉移酶（ALT）的3臺儀器進行正確度和精密度的估計。方法街頭快速檢測系統microlab 300半自動生化儀為比較方法（y），以站內OLYMOUS AU640全自動生化分析儀為參考方法（x）進行方法學比較實驗。重復測定穩定的ALT質控品血清。求得批內和批間均數（x）、標準差（s）和變異系數（CV）。數據采用Excel 2003進行線性回歸分析及偏倚計算，驗證快速半自動生化儀與全自動生化儀的偏倚是否在允許的誤差范圍內，確定半自動生化儀的不精密度。結果3臺ALT半自動生化儀與全自動生化儀比對結果的相關系數（r）均高于《血站技術操作規程（2012版）》規定的可接受標準（r≥0.975或r2≥0.95），ALT醫學決定水平處，microlab 300半自動生化儀的系統誤差小于1/2CLIA’88允許誤差。半自動生化儀批內不精密度CV均小于5%，批間不精密度CV均小于6.7%。結論3臺ALT街頭快速檢測系統microlab 300半自動生化儀對獻血者篩查ALT結果與OLYMOUS AU640全自動生化分析儀檢測結果的偏倚為臨床可接受，精密度符合《血站技術操作規程（2012版）》規定的可接受標準，可用于街頭對獻血者ALT的初篩。

【關鍵詞】街頭獻血者；ALT快速檢測儀；實驗室全自動生化儀；對比分析；偏倚

GB18467-2011《獻血者健康檢查要求》規定獻血者血液ALT值應符合相關要求[1]。我國新頒布的《血站技術操作規程（2012版）》對獻血者ALT的篩查策略進行了調整，規定對獻血者ALT 2次檢測分別在采血前和采血后進行[2]。為保證獻血者ALT街頭初篩結果與實驗室檢測結果的一致性，本研究參考《血站技術操作規程（2012版）》附錄B和相關文獻，對用于獻血者街頭快速檢測ALT的3臺半自動生化儀與實驗室全自動生化儀進行方法學比較實驗，對其正確度和精密度進行估計。現報道如下。

1資料與方法

1.1儀器OLYMPUS AU640全自動生化分析儀（OLYMPUS公司，日本）。3臺microlab 300半自動生化儀（Vital scientific公司，荷蘭）。

1.2試劑及質控品丙氨酸氨基轉移酶試劑盒（寧波美康生物科技公司），批號：20120831；Roche質控品（德國羅氏診斷有限公司），低值批號：162319-05，高值批號：153957-03。上述試劑和質控品均按照廠家說明書在有效期內使用。

1.3方法所有儀器在實驗前由廠家維護和校準，試驗過程嚴格執行試劑和儀器的說明書。OLYMPUS AU640全自動生化分析儀每年連續參加國家及省內臨床檢驗室間質評成績優異，室內質控變異系數（CV）始終保持小于1/2CLIA’88規定的允許誤差范圍，以此為參比檢測系統（x）。microlab 300半自動生化儀為待比較檢測系統（y）。以OLYMPUS AU640全自動生化分析儀測定ALT質控品的值為靶值（T）。

1.3.1正確度估計對2種不同檢測系統同時使用同一低值（正常水平）和高值（病理水平）質控品作為日常質控，并分別檢測相同樣本。連續5日，每日選取8份獻血者樣本（盡量保證有50%為ALT高值），測定順序為第1次檢測序號為1→8，第2次為8→1。且當天的比較試驗在2小時內完成。

1.3.2精密度估計半自動生化儀每1質控品濃度水平（低值/高值）每天重復3次測定。連續測定5d。

美國臨床實驗室標準化委員會（NCCLS）標準中EP9-A2文件提供的實驗室比對的方法適用于同一標本采用不同方法（儀器或試劑）檢測結果的比對分析，其評價的結果確保真實可靠[3]。CLIA’88體現的是可接受方法誤差的總誤差（隨機誤差+系統誤差）的最低水平，所以1/2 CLIA’88允許誤差作為方法比對允許誤差的限值使結果更具說服力[4]。本研究表明3臺microlab 300半自動生化儀與OLYMPUS AU640全自動生化分析儀檢測結果的可比性符合《血站技術操作規程（2012版）》要求。

精密度代表著檢測結果隨機誤差的大小程度，是指在一定條件下進行多次重復測定時所得結果間的符合程度，精密度的好壞通常采用不精密度表示，不精密度通常以CV體現[5]。依據Westgard提出高效檢驗精密度要求的觀點，批內不精密度CV應小于CLIA允許誤差的1/4，批間（天間）不精密度CV應小于CLIA允許誤差的1/3[6]。ALT檢測CLIA允許誤差限值為T±20%，因此ALT檢測方法的批內不精密度CV應小于5%，批間不精密度CV應小于6.7%。

采供血機構在街頭對獻血者進行的快速ALT篩查是POCT（point of care testing）檢測，POCT是在傳統、核心或中心實驗室以外進行的一切檢驗[7]。即時檢測（POCT）具有操作簡易、快速、準確、靈敏、便攜等特點，常用POCT指標對特定動態檢測具有獨特的優勢，美國已普及POCT，成立各級的POCT委員會[8]。microlab 300半自動生化儀系用于獻血車和獻血屋對獻血者ALT初篩的儀器，自該儀器用于獻血者的采前初篩以來，大大降低了血液的報廢，ALT年度報廢率由過去的9.8%下降到了不足1%。[9]。由于儀器比對和精密度估計實驗是在實驗室完成的，而儀器使用是在街頭，2種不同檢測系統檢測結果有差異，導致部分獻血者的流失。據統計，流失的獻血者和報廢血液ALT檢測值均在國家標準規定的限值附近。進行設備確認和認真的比對工作，保證POCT檢測結果與實驗室檢測結果的一致性是降低血液報廢、減少獻血者流失的關鍵[10]。POCT檢測工作環境與實驗室相差較大，操作者技術水平參差不齊，這是影響ALT檢測結果的主要因素。POCT 需要面臨的挑戰包括改進數據管理，質量控制，和實驗室人員的培訓，以確保檢測結果的準確性[11]。實際工作中，每日正常開機穩定后，需用質控品進行驗證儀器的精密度是否參考值允許的范圍內。如反復出現跳值的現象，在排除各種偶然因素的情況下，需對檢驗儀器進行維修維護，經校正比對試驗合格后方可投入繼續使用，以保證檢測數據的正確性和精密性。

參考文獻

[1]中華人民共和國衛生部.獻血者健康檢查要求.GB18467.2011-12-30.

[2]中華人民共和國衛生部.血站技術操作規程，2012-02-24.

[3]許靜，王偉祥，金惠萍，等.干、濕生化分析儀部分測定值的比對分析和偏倚評估[J].檢驗醫學，2010，3（25）：207-209.

[4]National Committee for Clinical Laboratory Standards[S].Continuous quality improvement：Essential management approaches.Wayne PA：NCCLS，1999.

[5]林寧，趙久紅，戴衛，等.自建半自動生化檢測系統精密度和準確度評價.檢驗醫學與臨床，2009，6（15）：1230-1230.

[6]高自穎，葛君琍.CLIA’88推薦精密度目標在室內質控中的應用.國際檢驗醫學雜志，2013，34（5）：597-599.

[7]Aguilera-Herrador E，Cruz-Vera M，Valcárcel M.Analytical connotations of point-of-care testing[J].Analyst，2010，135（9）：2220-2232.

[8]Ehrmeyer SS，Laessig RH.Point-of-care testing，medical error，and patient safety：a 2007assessment[J].Clin Chem Lab Med，2007，45（6）：766-773.

[9]王學剛，孫國棟，李艷艷，等.應用NCCLS EP9-A文件對街頭半自動生化分析儀ALT測定結果進行比對.河北醫藥，2011，33（22）：3397-3399.

[10]李天君，趙鋒，劉曉麗，等.POCT在采供血機構的應用和質量管理.現代檢驗醫學雜志，2010，25（2）：157-158.

[11]Sacks DB，Arnold M，Bakris GL，et al.Guidelines and recommendations for laboratory analysis in the diagnosis and management of diabetes mellitus[J].Clin Chem，2011，57（6）：e1-e47.