【關(guān)鍵詞】DEL;血型
Rh血型根據(jù)D抗原是否凝集分為陽性和陰性2大類,陽性中包括正常D和變異D,而變異D中又含弱D、部分D和D放散型(DEL)等。DEL紅細(xì)胞膜D抗原非常弱,常規(guī)間接抗球蛋白試驗(yàn)(IAT)測定為陰性,只有通過敏感的吸收放散試驗(yàn)才能檢出。我們采用血清學(xué)方法篩選,基因分型技術(shù)驗(yàn)證來檢測DEL血型。
1資料與方法
1.1研究對象2013年1月——3月遼寧省血液中心經(jīng)3批間接抗球蛋白試驗(yàn)確證Rh(D)陰性的無償獻(xiàn)血者50例。
1.2試劑抗球蛋白試劑(批號(hào):20050102-20081105,上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司)、3批抗-D試劑均為單克隆人抗-D[分別是NovacloneTM Anti-D,Bioscot Monoclonal IgM+IgG TH-28/MS-26,和上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司的IgG-D(20080401)];GoTaq(TaKaRa公司)和DEL特異性引物(TaKaRa公司)。
1.3Rh(D)陰性確認(rèn)實(shí)驗(yàn)參考文獻(xiàn)[1]方法,對50例Rh(D)陰性無償獻(xiàn)血者進(jìn)行Rh(D)陰性確認(rèn)實(shí)驗(yàn)。
1.4DEL吸收放散試驗(yàn)具體實(shí)驗(yàn)方法參見文獻(xiàn)[2]方法。
1.5DEL基因分型DEL特異性引物設(shè)計(jì)及具體實(shí)驗(yàn)方法參見文獻(xiàn)[3]方法,產(chǎn)物通過2%瓊脂糖凝胺電泳,150V、20min紫外燈下觀察結(jié)果。
2結(jié)果
2.1Rh(D)陰性鑒定50例獻(xiàn)血員經(jīng)3批不同批號(hào)抗-D檢測,鹽水和抗球蛋白試驗(yàn)均是陰性。
2.2DEL吸收放散試驗(yàn)間接抗球蛋白試驗(yàn)確證Rh(D)血清學(xué)陰性的50例獻(xiàn)血者中,吸收放散試驗(yàn)陽性11人,陽性比例22.00%。
2.2DEL基因分型11例吸收放散試驗(yàn)陽性樣本采用DEL特異性引物基因分型,均為陽性。DEL基因分型電泳圖見圖1。
3討論
DEL型發(fā)現(xiàn)于1984年,與歐洲、非洲人群不同,亞洲Rh陰性人群中DEL表型的比例很高,如在高加索人中約為0.16%[4],黑人中尚未觀察到,而在中國漢族Rh陰性人群中比例高達(dá)26%左右[5]。我們對經(jīng)3批不同間接抗球蛋白抗-D試劑確證為Rh(D)陰性的50獻(xiàn)血者,11例吸收放散試驗(yàn)檢測為DEL陽性的獻(xiàn)血者,DEL頻率為22.00%。與文獻(xiàn)[4]報(bào)道結(jié)果相近。
DEL血型是Rh血型中一個(gè)重要血型,DEL患者輸血和DEL女性妊娠是一個(gè)非常值得研究的問題。目前國際上,包括我國均不檢測DEL型,將其視為Rh(D)陰性供者或受者。國外已有DEL胎兒或紅細(xì)胞免疫Rh(D)陰性孕婦和Rh(D)陰性受血者由于輸入DEL表型血液,而產(chǎn)生抗-D的病例報(bào)道[5-8]。因此準(zhǔn)確而高效地檢測DEL表型,是提高臨床輸血安全性的重要手段[9]。
參考文獻(xiàn)
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