結核感染T細胞檢測T—spot.TB在肺結核、肺外結核及潛伏性結核感染中輔助診斷的臨床意義

【摘要】目的探討T細胞檢測在結核病診斷中的應用價值。方法T細胞檢測與傳統的細菌學檢測方法比較分析。結果結核感染T細胞檢測在結核病的輔助診斷中遠遠優于傳統的細菌學檢測方法[1]。結論結核感染T細胞檢測是較靈敏和特異的快速檢測結核分枝桿菌感染的方法，可用于結核病的快速診斷。對控制活動性結核的發生與再發生、潛伏性結核感染的預防、兒童結核病的輔助診斷等具有重要意義。

【關鍵詞】T細胞檢測；結核病；輔助診斷

中國是結核菌感染高負擔國家，患者人數居全球第二[2]。結核病是一種慢性傳染性疾病，病原體具有持久性。具體表現為“五多”即感染人數多、患病人數多、潛伏感染人數多、新發患者多、死亡人數多。其傳染性、潛伏性、難清除性、再活動性、致病復雜性等防治難點使結核病防治成為首要任務。新發結核病例來自潛伏性結核感染人群，潛伏性結核感染人群數量巨大。新增活動性結核病人每年約145萬人。控制活動性結核病人必須通過鑒別“高危人群”“預防性治療”“免疫接種”來控制潛伏性結核感染。傳統的診斷結核病的方法有很多不足，臨床實驗室最常用的檢測手段就是痰標本涂片的抗酸染色、BD-960結核菌的快速培養及傳統L-J羅氏培養（羅培）、結核抗體檢測等。痰涂片陽性檢出率低，結核抗體檢測特異性低，敏感度差，BD-960結核菌的快速培養與傳統培養方法比較雖然縮短了檢測時間，但其陽性檢出率受標本采集等眾多因素影響仍然不高。應用結核感染T細胞檢測技術，可提高結核分枝桿菌的陽性率，24h報告檢測結果，為臨床疾病的準確快速的診斷提供理論依據。現將結果報告如下。

1資料與方法

1.1病例來源選取2012年1月——2013年6月在我院就診的患者。274例確診病例均為住院病例，其中男182例，女92例，年齡7-85歲，臨床癥狀和影像學診斷均符合結核病的診斷標準。203例疑似病例均為門診病例，其中男85例，女118例年齡2-92歲，表現為不明原因發熱，但臨床癥狀不明顯，影像學檢查顯示正常。

1.2試劑與方法患者的痰標本均采用抗酸染色法，染色液試劑盒由臺灣貝索生物技術有限公司提供。患者的痰標本進行L-J羅氏培養（慢培），L-J固體培養基由臺灣貝索生物技術有限公司提供。患者的痰標本進行MGIT液體培養基快速培養，MGIT液體培養基由美國BD公司提供。結核感染T細胞檢測試劑盒（免疫斑點法）由上海復興長征醫學科學有限公司提供。痰培養標本采集，由患者清晨漱口后，咳出的深部痰放置無菌痰盒內。血樣采集抽取足量的外周靜脈血，加至含有肝素抗凝劑的采血管中。采集量如下：成年人或10歲以上兒童，8ml靜脈血；2-9歲兒童，4ml靜脈血；2歲以下兒童，2ml靜脈血。

2結果

T細胞檢測與痰標本涂片的抗酸染色、BD-960結核菌的快速培養、傳統L-J羅氏培養（羅培）比較陽性率和檢測時間上有明顯的優勢，見表1。

3討論

近年來結核病疫情呈明顯上升趨勢，全球所有傳染性疾病中，結核病已成為成年人的首位死因。對于感染結核的患者進行早期診斷和治療是改善患者預后的關鍵，也是控制結核播散的重要環節，但是對于結核桿菌感染初期的檢測并不容易。結核菌培養目前仍然是臨床上結核病診斷的金標準，但結核菌細菌學檢查缺乏敏感性，由于條件限制結核菌培養在許多基層醫療機構難以開展，對菌陰肺結核、無痰患者、兒童結核及肺外結核實驗室診斷仍比較困難。肺結核臨床表現復雜多變，極易誤診漏診。傳統的臨床診斷結核的實驗室方法有限。因而，發展能用于診斷結核的快速敏感的實驗室技術十分重要。

機體感染結核分枝桿菌后，體內存在特異的效應T淋巴細胞，其在體外再次受到結核菌特異抗原的刺激時，會分泌釋放IFN-γ，通過檢測IFN-γ的水平或計數分泌IFN-γ的外周血PBMC，可以了解機體在感染結核分枝桿菌后的免疫應答狀態，從而發現結核分枝桿菌的潛伏感染，進而輔助診斷結核病。T-SPOT.TB是利用結核特異抗原（ESAT-6CFP-10），通過酶聯免疫斑點技術（ELISPOT）檢測受試者，體內是否存在結核效應T淋巴細胞，從而判斷目前該受試者是否感染結核桿菌。

T-spot.TB試驗對結核病的早期、快速、準確診斷明顯優于PPD試驗[3]，是特異性和靈敏度高的結核分枝桿菌輔助診斷試驗。其檢測樣本靈活，創傷性小，可對外周血、胸水、腹水、腦脊液、心包積液等標本進行結核感染T檢測。可根據樣本類型，進一步結合影像學檢查可對肺外結核進行診斷或者是輔助診斷。對于臨床癥狀不明顯和影像學檢查顯示正常者，可通過結核感染T細胞檢測對潛伏性結核分枝桿菌感染者進行預防性治療或觀察。對兒童結核病進行輔助診斷，克服了兒童干咳、無痰，（用其它方法幾乎無法檢測）的弊端等對臨床上痊愈的活動性結核病，應用T-spot.TB技術控制其發生與再發生。

參考文獻

[1]肖倩，黃旭峰.T-spot.TB試驗快速檢測結核桿菌感染的臨床應用研究[J].實驗與檢驗醫學，2009，27（3）：272-274.

[2]白旭華，霍萬學.結核桿菌感染T細胞介導免疫應答研究的新進展[J].微生物學雜志，2012，32（1）：75-79.

[3]榮蘭香，馬淑紅，艾清等.T-spot.TB試驗與PPD試驗對結核病患者診斷價值相關性比較[J].中國實驗診斷學，2013，17（8）：1475-1476.