柱前衍生化RP－HPLC測定鐵皮石斛鮮品中的氨基酸的含量

魯芹飛 畢何鋒 林 培 李 妹 鄧路平 黃 松

鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)，蘭科石斛屬植物，有滋陰益胃、清熱生津、益智安神、強精壯骨之功效，一直以來，被視為名貴藥材［1］。目前對鐵皮石斛的研究多集中在多糖方面，氨基酸方面的研究相對較少，有關鐵皮石斛氨基酸類成分的含量分析均是使用氨基酸分析儀，因為其局限性，限制了氨基酸的研究［2～6］。近年來柱前衍生反相高效液相色譜法分析氨基酸技術有了廣泛應用，相應的促進了氨基酸的進一步研究［7～12］。目前常用的柱前衍生劑有:鄰苯二甲醛(OPA)、氯甲酸芴甲酯(FMOCCl)、異硫氰酸苯醋(PITC)、丹酰氯(Dansyl－Cl)等。近些年，鐵皮石斛除了常規的作為藥物應用，鐵皮石斛的鮮品越來越多的被作為保健食品應用。本實驗采用PITC作為柱前衍生劑結合反相高效液相色譜技術測定了鐵皮石斛鮮品藥材中游離氨基酸的含量，以期為鐵皮石斛中氨基酸的深入研究做好基礎，同時為鐵皮石斛鮮品的綜合應用提供科學依據。

材料與方法

1．材料:(1)藥品與試劑:15種氨基酸對照品(中國藥品生物制品檢定所購買，編號為:624－200104);PITC衍生劑(色譜純，美國Sigma公司);乙腈(色譜純，德國Merck公司);其他試劑均為分析純;5批鐵皮石斛鮮品藥材由廣東永生源生物科技有限公司提供，經廣州中醫藥大學陳建南研究員鑒定為蘭科石斛屬植物鐵皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)，標本存放于廣州中醫藥大學新藥開發研究中心。(2)實驗儀器:SHIMADZU高效液相色譜儀(日本島津公司)，SPD－20A紫外可見光檢測器，Sartorius BP110S電子天平(德國);Sartorius CP225D電子天平(德國);Aquapro艾科浦u系列純水機;KQ3200DE型醫用數控超聲波清洗器(江蘇昆山市超聲儀器有限公司);EYELA M－旋轉蒸發儀(日本)，SHZD(Ⅲ)循環水式真空泵。……