黃桐枝葉的化學成分研究

鄒 濤，何紅平*，趙 慶，郝小江

1云南中醫學院，昆明 650500;2 中國科學院昆明植物研究所植物化學與西部植物資源持續利用國家重點實驗室，昆明 650201

黃桐(Endospermum chinenseBenth.)為大戟科(Euphorbiaceae)黃桐屬喬木。分布于印度東北部、緬甸、泰國、越南以及我國的福建南部、廣東、廣西、海南和云南南部［1］。據記載［2］，黃桐樹皮具有治療傷寒發狂、跌仆傷損等功效，其樹葉可用于手足腫浮、癰疽發背等。為了進一步闡明黃桐的化學物質基礎，為以后尋找其生理活性以及開發應用提供依據，本課題較為系統地對黃桐枝葉進行了化學成分研究，共分離得到13 個化合物，通過波譜數據分析分別鑒定為pubinernoid A(1)、(E)-linalool-1-oic acid(2)、(+)-去氫催吐蘿芙木醇(3)、3α-hydroxy-5，6-epoxy-7-megastigmen-9-one(4)、齊墩果酸(5)、3-羰基齊墩果酸(6)、3-oleana-9(11)，12-dien-28-oic acid(7)、甘五酸(8)、altissimanin C(9)、7-羥基-β-谷甾醇(10)、丁香脂素(11)、ficusesquilignan A(12)、ficusesquilignan B(13)。其中化合物7 為新天然產物，化合物1～4、8～13 為首次從該屬植物中分離得到。

圖1 化合物1～13 的化學結構Fig.1 Chemical structures of compounds 1-13

1 儀器與材料

JASCO P-1020 全自動數字旋光儀(測比旋度);Shimadzu UV-2401 分光光度儀(測UV);Bruker Tensor-27 傅立葉變換中紅外光譜儀(測IR);Bruker AM-400 和DRX-500 核磁共振儀(測定1H 和13C NMR 譜)，以TMS 作為內標;液相-離子阱色譜質譜聯用儀Bruker HCT/Esquire(ESI-MS);三扇型雙聚焦磁質譜儀(HR-EI-MS 質譜);高效液相為Agilent 1100、1200(美國Agilent 公司);Sephadex LH-20(Pharmacia 公司);硅膠和薄層色譜硅膠(青島海洋化工廠);反相材料Lichroprep RP-18 gel(德國Merck 公司);MCI gel(日本三菱化學公司);5%H2SO4乙醇溶液(顯色劑)。

黃桐于2010年12月采自海南昌江霸王嶺，由中科院昆明植物研究所胡光萬博士鑒定，標本保存在中科院昆明植物研究所植物化學與西部植物資源持續利用國家重點實驗室郝小江研究組(標本號:No.H20101204)。

2 提取與分離

黃桐干燥枝葉12 kg，粉碎后用95%乙醇加熱回流提取三次(4 h/次)，然后用乙酸乙酯5 L 萃取三次。乙酸乙酯部分(300 g)用硅膠(100～200 目)柱層析(V石油醚∶V丙酮=9∶1～5∶5，V氯仿∶V甲醇=9∶1和7∶3)分為7 個組分(A～G)。組分C、D、E、G 用MCI 脫色素后，經反相RP-18、正相硅膠、Sephadex LH-20、HPLC 等分離純化，得到化合物1(7 mg)、2(7 mg)、3(5 mg)、4(3 mg)、5(10 mg)、6(22 mg)、7(5 mg)、8(11 mg)、9(6 mg)、10(11 mg)、11(8 mg)、12(16 mg)、13(17 mg)。

3 結構鑒定

化合物1 白色粉末，C11H16O3，1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:1.54 (1H，dd，J=14.6，3.7 Hz，H-1α)，1.95～2.00 (1H，m，H-1β)，2.46 (1H，dt，J=14.0，2.4 Hz，H-3β)，5.69(1H，s，H-6)，1.46，1.26，1.78 (each 3H，s，H-9～11);13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ:47.2 (C-1)，66.7 (C-2)，45.5(C-3)，86.9 (C-4)，182.7 (C-5)，112.8 (C-6)，172.1 (C-7)，35.9 (C-8)，26.4 (C-9)，30.6 (C-10)，26.9 (C-11)。以上數據與文獻［3］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為pubinernoid A。

化合物2 無色油狀，C10H16O3，+6.4 (c0.30，CHCl3)，1H NMR (CDCl3，400 MHz)δ:6.89(1H，t，J=7.2 Hz，H-3)，2.24 (2H，m，H-4)，1.66(2H，m，H-5)，5.90 (1H，dd，J=17.3，10.7 Hz，H-7)，5.09 (1H，d，J=10.7 Hz，H-8α)，5.23 (1H，d，J=17.3 Hz，H-8β)，1.82 (3H，s，H-9)，1.31 (3H，s，H-10);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:173.1 (C-1)，127.1 (C-2)，144.5 (C-3)，23.6 (C-4)，40.4 (C-5)，73.1 (C-6)，144.3 (C-7)，112.3 (C-8)，12.0(C-9)，27.9 (C-10)。以上數據與文獻［4］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為(E)-linalool-1-oicacid。

化合物3 黃色油狀，C13H18O3，1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:2.50 (1H，d，J=17.2 Hz，H-2α)，2.36 (1H，d，J=17.2 Hz，H-2β)，5.96 (1H，s，H-4)，6.83 (1H，d，J=16.0 Hz，H-7)，6.47 (1H，d，J=16.0 Hz，H-8)，2.31 (3H，s，H-10)，1.11 (3H，s，H-11)，1.02 (3H，s，H-12)，1.89 (3H，s，H-13);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:41.4 (C-1)，49.5 (C-2)，197.0 (C-3)，127.7 (C-4)，160.4 (C-5)，79.2(C-6)，145.0 (C-7)，130.3 (C-8)，197.5 (C-9)，28.4 (C-10)，22.9 (C-11)，24.3 (C-12)，18.7 (C-13)。以上數據與文獻［5］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為(+)-去氫催吐蘿芙木醇(dehydrovomifoliol)。

化合物4 黃色油狀，C13H20O3，1H NMR(CDC13，400 MHz)δ:1.64 (1H，m，H-2α)，1.26(1H，m，H-2β)，1.67 (1H，m，H-4α)，2.40 (1H，dd，J=14.4，5.0 Hz，H-4β)，7.02 (1H，d，J=15.7 Hz，H-7)，6.28 (1H，d，J=15.7 Hz，H-8)，2.28 (3H，s，H-10)，0.97 (3H，s，H-11)，1.19 (3H，s，H-12)，1.19 (3H，s，H-13);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:35.1 (C-1)，46.6 (C-2)，63.9 (C-3)，40.5 (C-4)，67.3 (C-5)，69.6 (C-6)，142.5 (C-7)，132.5 (C-8)，197.5 (C-9)，28.3 (C-10)，24.9 (C-11)，29.3(C-12)，19.8 (C-13)。以上數據與文獻［6］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為3α-hydro-xy-5，6-epoxy-7-megastigmen-9-one。

化合物5 白色粉末，C30H48O3，1H NMR(CDCl3，500 MHz)δ:5.28 (1H，br s，H-12)，2.82(1H，dd，J=14.0，4.0 Hz，H-18)，0.90 (3H，s，H-23)，0.91 (3H，s，H-24)，0.93 (3H，s，H-25)，0.99(3H，s，H-26)，1.13 (3H，s，H-27)，0.75 (3H，s，H-29)，0.77 (3H，s，H-30);13C NMR (CDCl3，125 MHz)δ:38.5 (C-1)，27.7 (C-2)，79.0 (C-3)，38.7(C-4)，55.3 (C-5)，18.3 (C-6)，32.7 (C-7)，39.6(C-8)，47.7 (C-9)，37.0 (C-10)，23.0 (C-11)，122.7 (C-12)，143.6 (C-13)，42.0 (C-14)，27.2(C-15)，23.4 (C-16)，46.5 (C-17)，41.1 (C-18)，45.9 (C-19)，30.7 (C-20)，34.0 (C-21)，32.5 (C-22)，28.1 (C-23)，15.5 (C-24)，15.3 (C-25)，17.1(C-26)，25.9 (C-27)，182.4 (C-28)，33.0 (C-29)，23.6 (C-30)。以上數據與文獻［7］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為齊墩果酸(oleanolic acid)。

化合物6 白色粉末，C30H46O3，1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:5.29 (1H，br s，H-12)，2.83(1H，dd，J=13.3，3.4 Hz，H-18)，1.04 (3H，s，H-23)，0.79 (3H，s，H-24)，0.92 (3H，s，H-25)，1.07(3H，s，H-26)，1.13 (3H，s，H-27)，0.90 (3H，s，H-29)，1.02 (3H，s，H-30);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:39.2 (C-1)，33.9 (C-2)，217.9 (C-3)，47.4 (C-4)，55.2 (C-5)，19.6 (C-6)，32.2 (C-7)，39.0 (C-8)，46.8 (C-9)，36.7 (C-10)，22.9 (C-11)，122.3 (C-12)，143.1 (C-13)，41.7 (C-14)，27.6 (C-15)，23.7 (C-16)，46.5 (C-17)，41.0 (C-18)，46.0 (C-19)，30.6 (C-20)，34.1 (C-21)，32.2(C-22)，26.4 (C-23)，21.4 (C-24)，15.0 (C-25)，17.0 (C-26)，25.8 (C-27)，184.2 (C-28)，33.0 (C-29)，23.5 (C-30)。以上數據與文獻［7］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為3-羰基齊墩果酸(3-ketooleanolic acid)。

化合物7 白色粉末，ESI-MS(m/z):475［M+Na］+，HR-EI-MS(m/z):452.3298 (C30H44O3，calcd for 452.3290);+225.3 (c0.18，MeOH);IR(KBr)νmax3443，2945，2867，1705，1632，1463 and 1384 cm-1;UV (MeOH)λmax283 nm (0.48)，201 nm(0.17);1H NMR (CDCl3，400 MHz)δ:5.58 (1H，d，J=5.7 Hz，H-12)，5.64 (1H，d，J=5.7 Hz，H-11).0.90，0.94，1.00，1.03，1.06，1.10，1.23 (each 3H，s，7 × CH3);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:37.6 (C-1)，34.4 (C-2)，217.9 (C-3)，47.2 (C-4)，51.7 (C-5)，19.5 (C-6)，31.2 (C-7)，42.5 (C-8)，152.6 (C-9)，38.2 (C-10)，117.4 (C-11)，120.4 (C-12)，145.4 (C-13)，40.6 (C-14)，26.9(C-15)，23.5 (C-16)，45.7 (C-17)，39.4 (C-18)，45.8 (C-19)，30.6 (C-20)，33.6 (C-21)，32.0 (C-22)，26.8 (C-23)，21.2 (C-24)，25.1 (C-25)，19.9(C-26)，20.0 (C-27)，182.9 (C-28)，23.5 (C-29)，32.9 (C-30)。結合文獻［7-9］所報道的數據，確定該化合物為3-oleana-9(11)，12-diene-28-oic acid，該化合物在文獻中為合成的三萜衍生物，并修正了其1DNMR 數據。

化合物8 白色粉末，C30H46O3，1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:0.58 (1H，d，J=4.0 Hz，H-19α)，0.78 (1H，d，J=4.0 Hz，H-19β)，6.90 (1H，t，J=7.2 Hz，H-24)，0.99，1.84，1.04，1.09，0.90(each 3H，s，H-18，27～30);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:33.4 (C-1)，37.5 (C-2)，216.7 (C-3)，50.2 (C-4)，48.4 (C-5)，21.5 (C-6)，25.8 (C-7)，47.8 (C-8)，21.0 (C-9)，25.9 (C-10)，26.6 (C-11)，32.7 (C-12)，45.3 (C-13)，48.7 (C-14)，35.5(C-15)，28.1 (C-16)，52.2 (C-17)，18.1 (C-18)，29.5 (C-19)，35.9 (C-20)，18.1 (C-21)，25.9 (C-22)，34.7 (C-23)，145.8 (C-24)，126.6 (C-25)，173.2 (C-26)，11.9 (C-27)，22.1 (C-28)，20.7 (C-29)，19.3 (C-30)。以上數據與文獻［10］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為甘五酸(mangiferonic acid)。

化合物9 白色粉末，C30H48O2，1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:5.70 (1H，dt，J=15.6，7.6 Hz，H-23)，6.20 (1H，d，J=15.6 Hz，H-24)，4.90(2H，brs，H-26)，1.00，0.94，1.14，1.85，1.07，1.03，0.88 (each 3H，s，H-18，19，21，27～30);13C NMR(CDCl3，100 MHz)δ:39.9 (C-1)，34.1 (C-2)，218.0(C-3)，47.3 (C-4)，55.4 (C-5)，19.6 (C-6)，34.5(C-7)，40.3 (C-8)，50.0 (C-9)，36.8 (C-10)，22.0(C-11)，27.5 (C-12)，42.5(C-13)，50.2 (C-14)，31.1(C-15)，24.9 (C-16)，50.0 (C-17)，15.2 (C-18)，16.0 (C-19)，75.2 (C-20)，26.0 (C-2)，43.9(C-22)，125.7 (C-23)，136.5 (C-24)，141.9 (C-25)，115.2 (C-26)，18.6 (C-27)，26.7(C-28)，21.0(C-29)，16.3 (C-30)。以上數據與文獻［11］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為altissimanin C。

化合物10 白色粉末，C29H50O2，1H NMR(CDC13，400 MHz)δ:3.52 (1H，m，H-3)，5.28(1H，m，H-6)，3.84 (1H，m，H-7)，0.69 (3H，s，H-18)，1.04 (3H，s，H-19)，0.92 (3H，d，J=6.4 Hz，H-21)，0.82 (3H，m，H-26)，0.80 (3H，m，H-28)，0.84 (3H，m，H-29);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:36.9 (C-1)，31.5 (C-2)，71.4 (C-3)，41.7 (C-4)，143.4 (C-5)，125.4 (C-6)，73.3 (C-7)，40.8 (C-8)，48.2 (C-9)，36.4 (C-10)，21.0 (C-11)，39.5(C-12)，42.8 (C-13)，55.3 (C-14)，26.3 (C-15)，28.5 (C-16)，55.9 (C-17)，11.8 (C-18)，19.1 (C-19)，36.1 (C-20)，18.8 (C-21)，33.9 (C-22)，26.0(C-23)，45.8 (C-24)，29.1 (C-25)，19.8 (C-26)，19.0 (C-27)，23.0 (C-28)，11.9 (C-29)。以上數據與文獻［12］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為7-羥基-β-谷甾醇(7β-hydroxy-β-sitosterol)。

化合物11 黃色粉末，C22H26O8，1H NMR(CDCl3，400 MHz)δ:6.58 (4H，s，H-2，2'，6，6')，4.75 (2H，d，J=4.3 Hz，H-7，7')，3.10 (2H，m，H-8，8')，4.27 (2H，dd，J=12.9，7.8 Hz，Hα-9，9')，3.80 (2H，dd，J=12.9，7.8 Hz，Hβ-9，9')，3.90(12H，s，4 ×OCH3);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:132.0 (C-1，1')，102.6 (C-2，2'，6，6')，147.1 (C-3，3'，5，5')，134.2 (C-4，4')，86.0 (C-7，7')，54.3 (C-8，8')，71.8 (C-9，9')，56.3 (OCH3)。以上數據與文獻［13］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為丁香脂素(syringaresinol)。

化合物12 無色油狀，C31H36O11，ESIMS(m/z):583［M-H］-，1H NMR (CDCl3，400 MHz)δ:6.63(2H，s，H-2，6)，4.76 (2H，m，H-7，7')，3.13 (2H，m，H-8，8')，4.12 (2H，m，Hα-9，9')，4.30 (2H，m，Hβ-9，9')，6.73 (1H，dd，J=8.2，1.9 Hz，H-6″)，4.99 (1H，d，J=3.3 Hz，H-7″)，3.88，3.89，3.90(12H，s，4 ×OCH3);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:131.1 (C-1)，102.7 (C-2，6)，153.4 (C-3，5)，134.2 (C-4)，86.0 (C-7)，54.5 (C-8)，72.1 (C-9)，137.7 (C-1')，118.7 (C-2')，146.6 (C-3')，144.8 (C-4')，108.3 (C-5')，114.2 (C-6')，85.7(C-7')，54.0 (C-8')，71.5 (C-9')，132.6 (C-1″)，108.6 (C-2″)，146.7 (C-3″)，145.3 (C-4″)，114.3(C-5″)，118.9 (C-6″)，72.4 (C-7″)，87.0 (C-8″)，60.5 (C-9″)，56.2，55.9 (2 ×OCH3)。以上數據與文獻［14］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為ficusesquilignan A。

化合物13 無色油狀，C31H36O11，ESIMS(m/z):583［M-H］-，1H NMR (CDCl3，400 MHz)δ:6.62(2H，s，H-2，6)，4.75 (2H，m，H-7，7')，3.11 (2H，m，H-8，8')，3.91 (2H，m，Hα-9，9')，4.30 (2H，m，Hβ-9，9')，6.83 (1H，dd，J=8.1，1.8 Hz，H-6″)，5.02 (1H，d，J=9.0 Hz，H-7″)，3.88，3.89，3.90(12H，s，4 ×OCH3);13C NMR (CDCl3，100 MHz)δ:132.6 (C-1)，102.7 (C-2，6)，153.1 (C-3，5)，134.6 (C-4)，85.7 (C-7)，54.0 (C-8)，71.5 (C-9)，137.7 (C-1')，114.3 (C-2')，145.3 (C-3')，146.6 (C-4')，108.6 (C-5')，118.9 (C-6')，85.9(C-7')，54.5 (C-8')，72.1 (C-9')，131.1 (C-1″)，109.8 (C-2″)，146.7 (C-3″)，145.3 (C-4″)，114.2(C-5″)，120.3 (C-6″)，74.0 (C-7″)，89.0 (C-8″)，60.5 (C-9″)，56.2，55.9 (2 ×OCH3)。以上數據與文獻［14］報道數據基本一致，故鑒定該化合物為ficusesquilignan B。

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