大腸癌中Livin 和Survivin 的表達及相關性研究

鄭國文

(四川省樂山市中區人民醫院病理科，四川 樂山614000)

Livin 是近年新發現的IAP(inhibitor of apoptosis protein)家族中的一種細胞凋亡抑制基因，具有抗凋亡作用，其表達陽性與腫瘤的發生、發展、轉移和預后密切相關［1］。Survivin 是IAP 家族的一個新成員，有學者研究也證實Survivin 在腫瘤發病中起重要作用，與凋亡指數呈負相關［2］。本研究應用免疫組織化學SP 法檢測40 例大腸癌組織Livin 和Survivin 的表達情況，進一步探討Livin 和Survivin 的相關性，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2011 年8 月至2012 年8 月就診于我院的40 例經病理檢查證實的大腸癌患者的癌組織及其癌旁組織標本。標本的獲取均經患者知情同意，并簽署知情同意書。其中高、中分化28例，低分化l2 例;A-B 期16 例，C-D 期24 例;有淋巴結轉移25 例，無淋巴結轉移15 例。

1.2 方法 采用免疫組化SP 法檢測組織中Livin和Survivin 蛋白的表達。SP 試劑盒及兔抗人Livin多克隆抗體、羊抗人Survivin 多克隆抗體購于北京中杉生物技術有限公司。實驗過程按照產品說明書進行，以PBS 緩沖液分別代替一抗作為陰性對照。

1.3 結果判定 嚴格按照試劑盒說明書的診斷標準執行。Livin、Survivin 陽性細胞是指細胞質內出現棕黃(褐)色顆粒。采用半定量積分法判定免疫組化染色結果:細胞無著色或陽性細胞的比例＜5%為陰性(-)，陽性細胞比例5% ～25%為弱陽性(+);陽性細胞比例～50%為中等陽性(++);陽性細胞比例＞50%為強陽性(+++)。由兩名富有經驗的擁有高級職稱的病理醫師獨立對免疫組化染色結果分別進行評分［3］。

1.4 統計學方法 應用SPSS 12.0 軟件進行數據分析。率的比較采用χ2檢驗。P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 Livin 和Survivin 在大腸癌組織及癌旁組織中的表達 大腸癌組織中Livin 蛋白的陽性表達率為75%，Survivin 蛋白的陽性表達率為70%，均高于癌旁組織的陽性表達率(分別為20.0%和2.5%)，差異有統計學意義(P＜0.05)，見圖1、圖2、表1。

2.2 Livin 和Survivin 在大腸癌組織中的表達及相關性分析 40 例大腸癌組織中，Livin 和Survivin蛋白表達均為陽性共26 例，均為陰性8 例。Livin和Survivin 在大腸癌組織中的表達有關(χ2=15.87，P＜0.05)，見表2。

圖1 Livin 蛋白表達(SP×100) a:在大腸癌旁組織中的表達(-);b:在大腸癌組織中的表達(+)

圖2 Survivin 表達(SP×100) a:在大腸癌組織中的表達(-);b:在大腸癌組織中的表達(+)

表1 Livin 和Survivin 在大腸癌及癌旁組織中的表達

表2 Livin 和Survivin 在大腸癌組織中的表達及相關性分析

3 討論

大腸癌是最常見的惡性腫瘤之一，近年來發病率呈逐年上升趨勢。對大腸癌的發生、發展分子作用機制的研究將有助于大腸癌的早期診斷、早期治療及預后判斷［4］。大腸癌的發病除了與飲食因素有關外，還與抑癌基因失活、癌基因突變、細胞凋亡周期失控、細胞增殖異常關系密切。

Livin 基因是一種新發現抗凋亡作用最強的凋亡抑制基因，大量的Livin 蛋白出現抑制了細胞的凋亡，延長了腫瘤細胞的生存期，增加了細胞發生基因突變的機會，從而有利于大腸癌的發生［5］。本研究中，大腸癌組織中存在Livin 過度表達(75%)，而正常組織中不表達或低表達(20%)，說明在大腸癌發生過程中Livin 的異常表達可能參與了大腸癌的發生，且對于大腸癌的惡性程度和預后的預測有一定的價值。

研究證實，Survivin 蛋白過表達是大腸癌發生中的一種獨立事件［6］。本研究結果顯示，Survivin 蛋白在大腸癌中表達的陽性表達率為70%，Survivin在正常組織中的陽性表達率2.5%，Survivin 在大腸癌中的高表達與其發生、發展、分期和轉移等相關［9］，這種高表達的差異使它有望成為新的腫瘤標志物和預后因子，其表達水平與治療的敏感性相關，提示它是一個潛在的治療靶點［7］。

本研究中表2 結果顯示，Livin 和Survivin 蛋白在大腸癌組織的表達呈正相關，說明Livin 和Survivin 在大腸癌中具有協同作用［8］，聯合檢測Livin及Survivin 蛋白具有重要的臨床意義。

［1］Takashima H，Nakajima T，Moriguchi M，et al. In Vivo expression patterns of survivin and its splicing variants in chronic liver disease and hepatoce1lu1ar carcinoma［J］.Liver Int，2005，25(1):77-84.

［2］東星，于波，周衛東. Livin 與Caspase-9 在大腸癌組織中的表達及臨床意義［J］. 中國現代普通外科進展，2010，13(12):933-934.

［3］張韶光，郭世洲.Survivin、COX-2 在大腸癌中的表達及意義［J］.中國醫藥導報，2007，4(18):48-49.

［4］張翔，劉益飛. Livin 和Smac 蛋白在人大腸癌中的表達和意義［J］.交通醫學，2009，23(5):476-477.

［5］張曉雨，周建農，高長明. Survivin 與大腸癌關系的研究進展［J］.中華腫瘤防治雜志，2006，13(5):391-392.

［6］牛劍祥，張俊晶，孟興凱. Survivin 與大腸癌關系研究進展［J］.醫學信息，2012，25(3):630-631.

［7］曹俐，吳君輝，李定軍.Survivin 在大腸癌組織中的表達及臨床意義［J］.中國現代普通外科進展，2006，9(4):247-248.

［8］陸娜娜，尹玉，曹立宇，等. 大腸癌中Livin 和Survivin 的表達及相關性研究［J］.中國組織化學與細胞化學雜志，2012，21(3):250-251.

［9］唐志蓉，劉欣雅，王平. 抗凋亡基因蛋白Survivin 與P53 蛋白在結直腸腺瘤中的表達及意義［J］. 實用醫院臨床雜志，2009，6(2):61-62.