聯合檢測支氣管肺泡灌洗液中腫瘤壞死因子α 及人轉化生長因子β1 的臨床意義

于 露，黃 江，劉躍建

(四川省醫學科學院·四川省人民醫院呼吸內科，四川 成都610072)

近年來，細胞因子和生長因子與肺纖維化的關系的研究越來越得到學者們的關注，20 余種細胞因子和生長因子被證實與肺纖維化相關［1］。腫瘤壞死因子α(tumor necrosis factor α，TNF-α)和轉化生長因子β1(transform growth factor β1，TGF-β1)正是其中比較重要的兩個炎癥細胞因子。我們檢測了結締組織疾病所致間質性肺疾病(interstitial lung disease with connective tissue disease，CTD-ILD)患者、其他病因所致的間質性肺疾病(NCTD-ILD)患者和健康體檢者支氣管肺泡灌洗液(BALF)中TNF-α、TGF-β1 水平，探討其臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2010 年6 月至2011 年5 月在四川省人民醫院住院及門診診治的13 例CTD-ILD 患者(CTD-ILD 組)，包括系統性紅斑狼瘡所致間質性肺疾病(SLE-ILD)患者6 例，均為女性，年齡(26．5±5．1)歲;類風濕性關節炎所致間質性肺疾病(RAILD)患者5 例，男1 例，女4 例，年齡(48．2±10．3)歲;系統性硬化所致間質性肺疾病(SSc-ILD)患者2例，均為女性，年齡(48．5±5．2)歲。NTCD-ILD 患者12 例(NCTD-ILD 組)，包括特發性肺纖維化(IPF)患者10 例，男5 例，女5 例，年齡(57．3±4．7)歲;非特異性間質性肺炎(NSIP)患者2 例，男1 例，女1例，年齡(55．3±3．7)歲。同期健康體檢者(對照組)21 例，男12 例，女9 例，年齡(48．5±8．7)歲。SLEILD 患者均符合2009 系統性狼瘡國際協作組(SLICC)修改的美國風濕病學會系統性紅斑狼瘡分類標準［2，3］;RA-ILD 患者均符合2010 年美國風濕病學會聯合歐洲抗風濕病聯盟的類風濕關節炎分類標準［4］;SSc-ILD 患者均符合2010 年風濕病學會聯合歐洲抗風濕病聯盟對系統性硬化的診斷標準［5］。ILD 診斷均符合2002 年美國胸科協會(ATS)和歐洲呼吸協會(ERS)制定的結締組織病相關ILD 的缺乏肺活檢的診斷依據［6］。NTCD-ILD 患者均符合2002 年美國胸科學會(ATS)和歐洲呼吸學會(ERS)對IPF 診斷達成的國際共識［7］;NSIP 患者依靠臨床-影像學診斷。對照組納入標準:體檢發現肺外周孤立小結節而無癥狀者，長期隨訪結節穩定無變化，臨床表現:無發熱、咯黃痰等炎癥表現，肺部聽診未聞及啰音，輔助檢查:血象正常，胸片檢查無明顯炎癥表現，支氣管鏡下支氣管黏膜表現為正常。排除標準:①急性肺部感染、活動性咯血及既往有肺結核病史者;②腫瘤患者;③嚴重心、肝、腎疾病，妊娠患者，精神病患者;④不符合診斷標準及納入標準者，以及臨床資料不完整，影響診斷者。

1.2 方法

1.2.1 標本采集 研究對象于術前6 小時禁飲、禁食，術前以2%利多卡因做局部霧化吸入麻醉，使用日本Olympus 公司生產的BF-260 型電子支氣管鏡，將支氣管鏡沿鼻道緩慢插入患者氣管，取單側病變最嚴重處作為灌洗部位，將支氣管鏡的前端嵌入段或亞段開口，經活檢孔快速注入37 ℃無菌生理鹽水。每次25 ml，總量100 ml，用負壓吸引，回吸收量一般為注入液量的40% ～60%［8］。

1.2.2 BALF 中TNF-α、TGF-β1 的檢測 使用深圳欣博盛生物科技有限公司生產的TNF-α、TGF-β1 試劑盒，兩個實驗均采用雙抗體夾心ELISA 方法，檢測BALF 中TNF-α、TGF-β1 水平。

1.3 統計學方法 應用SPSS 19．0 統計軟件對所有數據進行分析。數據以均數±標準差表示，多組樣本均數的比較采用方差分析及SNK-q檢驗，P＜0．05 為差異有統計學意義。

2 結果

CTD-ILD 組和CTD-ILD 組兩項因子均明顯高于對照組，且CTD-ILD 組高于NCTD-ILD 組，差異均有統計學意義(P＜0．05)。見表1。

表1 三組BALF 中TNF-α 和TGF-β1 比較 (pg/ml)

3 討論

間質性肺疾病可繼發于結締組織疾病，是一類通過自身免疫反應導致機體損傷的全身性疾病(包括類風濕關節炎、系統性硬化病、系統性紅斑狼瘡，原發性干燥綜合征等)，累及到肺泡、肺間質及支氣管周圍組織造成不同程度的炎癥反應及纖維組織增生，稱為CTD-ILD［9］。目前研究認為，在眾多的細胞因子及生長因子中，TNF-α 及TGF-β1 在肺纖維化的發病過程中起著十分重要的作用，它們在組織損傷早期和組織修復過程中，都促進了肺纖維化的發生發展。TNF-α、TGF-β1 參與間質性肺病形成的始動和維持過程［10］。本研究結果顯示:CTD-ILD 組BALF 中TNF-α、TGF-β1 的數值高于NCTD 組，明顯高于對照組，提示TNF-α、TGF-β1 在CTD-ILD 患者BALF 中升高更為明顯，兩項聯合檢測有助于CTDILD 診治，但樣本數較少，觀察時間短，有待大樣本臨床研究完善。

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