動物體內麻醉劑殘留檢測技術研究進展

李晉成，劉 歡，吳立冬，王 群，呂海燕，宋 懌*

（中國水產科學研究院質量與標準研究中心，北京 1001 41）

動物體內麻醉劑殘留檢測技術研究進展

李晉成，劉 歡，吳立冬，王 群，呂海燕，宋 懌*

（中國水產科學研究院質量與標準研究中心，北京 1001 41）

動物源性食品中的麻醉劑殘留和人們日常生活息息相關，已經受到越來越多的關注。目前，動物體內 的麻醉劑殘留檢測技術研究尚顯不足，相關綜述文章很少。本文綜述動物體內麻醉劑殘留檢測技術的研究進展，重點總結樣品前處理技術和分析檢測技術，并且以水產品為例探討動物體內麻醉劑殘留檢測的 研究方向。

動物；水產品；麻醉劑殘留；樣品前處理；分析檢測技術

麻醉劑是一類能夠抑制中樞神經系統功能的藥物[1]。魚類等食用動物使用麻醉劑后，部分機體或全部機體將暫時失去疼痛的感覺，在其手術、繁育、稱質量、運輸和宰殺等過程中均有重要用途[2-3]。相關研究結果表明，在魚類長途運輸過程中合理使用麻醉劑可以提高魚類的存活率[4]。為了保證麻醉劑在減少動物疼痛過程中的使用，各國政府還制定了相應的法律法規。如德國2001年修訂的《動物保護法》規定在宰殺動物過程中必須使用麻醉劑，不允許對未經麻醉的動物進行大傷手術[5]。但麻醉劑在動物，特別是食用動物中的使用而可能導致的麻醉劑殘留已經引起了國內外研究人員的廣泛關注。

為了滿足動物體內麻醉劑殘留相關研究的需要，確定動物體內麻醉劑殘留濃度水平，研究人員開發出氣相色譜法（gas chromatography，GC）[6]、液相色譜法（liquid chromatography，LC）[7]、氣相色譜-質譜聯用法（gas chromatography-tandem mass spectrometry，GC-MS/MS）[8]和液相色譜-質譜聯用法（liquid chromatography-tandem mass spectrometry，LC-MS/MS）[9]等多種麻醉劑殘留檢測技術[10]。這些檢測技術是為動物中麻醉劑的合理使用、動物源性食品的質量安全和政府監管提供技術支撐的前提條件。

本文根據動物中麻醉劑的使用現狀，從常見動物麻醉劑的種類、樣品前處理技術、分析檢測技術三方面對動物體內麻醉劑殘留檢測研究現狀進行了綜述，重點總結了樣品前處理技術和分析檢測技術，并以水產品為重點對我國動物體內麻醉劑殘留研究檢測的未來發展方向進行了展望。

1 常見動物麻醉劑

動物麻醉劑的種類非常多，按照其作用方式，可以分為吸入性麻醉劑和靜脈麻醉劑[11-12]；按照其性質，可以分為揮發性麻醉劑和非揮發性麻醉劑[13-14]；按照其作用區域，可以分為全身性麻醉劑[15]和局部麻醉劑[16]。為了能夠同時產生多種麻醉效果，研究人員開發出復合麻醉劑，即多種麻醉劑協同使用，如美托嘧啶-氯胺酮 復合麻醉劑[17]。另外，針對動物種類的不同，允許使用麻醉劑的種類也有所差異，如牛、馬、豬等獸類中使用的麻醉劑和魚類、貝類等水產品中使用的麻醉劑存在差異。值得一提的是，目前水產品領 域僅有少量的麻醉劑被發達國家允許合法使用。美國、歐盟和加拿大允許間氨基苯甲酸乙酯甲烷磺酸鹽（MS-222）在水產品中使用[18]，澳大利亞、韓國和新西蘭允許異丁香酚在水產品中使用[19]，日本僅允許丁香酚在水產品中使用[20]，挪威允許苯唑卡因在水產品中使用[21]。我國農業部235號公告中規定安眠酮禁止在動物中使用；氯丙嗪和地西泮允許治療用，但是不得檢出；普魯卡因、丁卡因和硫噴妥鈉允許在動物中使用。一些常見的動物麻醉劑詳見表1。

表1 常見的動物麻醉劑Table 1 Common animal anesthetics

2 樣品前處理技術

表2 動物體內麻醉劑殘留的樣品前處理方法Table 2 Sample preparation techniques for the detection of anesthetic residues in animals

樣品前處 理是動物體內麻醉劑殘留檢測的關鍵步驟。由于動物樣品中的蛋白質和脂肪含量高，具有基質復雜、干擾物質多等特點，給麻醉劑殘留的分析與檢測帶來了一定的困難[22]。近年來，隨著社會的發展和經濟的需要，為了滿足日益提高的動物麻醉劑檢測研究方面的要求，高效、快速的樣品制備與前處理方法已經成為動物體內麻醉劑研究的熱點之一。在國內外學者的不斷努力下，動物源性樣品前處理技術得到了飛速的發展，涌現出很多高效、快捷的樣品前處理 方法，如固相萃?。╯olid-phase extraction，SPE）、固相微萃?。╯o lid-phase micro-extraction，SPME）、分子印跡技術（molecular imprinting technique，MIT）、加速溶劑萃取（accelerated solvent extraction，ASE）、基質固相分散（matrix solid-phase dispersion，MSPD）等。動物體內麻醉劑殘留前處理方法列表見表2。

2.1 固相萃取技術

SPE是一種把液固萃?。╨iquid-solid extraction，LSE）和LC結合起來的樣品前處理技術[23]。SPE通過活化、上樣、保留、淋洗和洗脫步驟實現對目標化合物的提取與純化。目前常用的SPE柱有正相、反相和離子交換柱，針對麻醉劑的性質不同，如酸堿性，可以選擇不同種類的SPE柱萃取和富集目標麻醉劑。在動物體內麻醉劑殘留的分 析檢測過程中，SPE多和色譜或色譜質譜聯用技術相結合，可以減少動物樣品中的基質效應。

汪麗萍等[24]利用SPE和GC-MS/MS檢測技術建立了豬肉中4種麻醉劑（地西泮、艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖）殘留含量的檢測方 法，樣品經乙腈提取和C18固相萃取凈化后進行GC-MS/MS分析，地西泮的檢出限為2 μg/kg，艾司唑侖、阿普唑侖、三唑侖的檢出限均為10 μg/kg。李存等[25]利用SPE進一步擴展了麻醉劑的檢測數目，豬尿樣品離心后經C18固 相萃取小柱分離純化，建立了豬尿中10種麻醉劑（噻拉嗪、阿扎哌隆、氟哌啶、氟哌啶醇、艾司唑侖、硝西泮、地西泮、奧沙西泮、氯丙嗪和奮乃靜）殘留含量的LC-MS/MS方法，檢出限為0.11～0.52 μg/L。He Limin等[26]利用Oasis HL B 固相萃取柱凈化豬肌肉、豬肝或豬腎中的麻醉劑，建立了豬體內氯丙嗪、異丙嗪、安定、阿扎哌隆、阿扎哌醇和卡拉洛爾6種麻醉劑的LC-MS/MS檢測方法，檢出限為0.06～0.1 μg/kg。

2.2 固相微萃取技術

SPME是一種非溶劑型選擇性萃取法，是SPE的進一步發展，由Arthur等[27]在1989年最先提出。SPME材料表面固定一層和目標化合物性質相似的有機物固定相，在分子間作用力的作用下，目標化合物可以被固定相選擇性吸附濃縮，然后可在氣相色譜儀或液相色譜儀進樣口被解吸附并進行色譜分析[28]，具有操作過程簡單、重現性好等優點。目前，SPME技術可分為兩種：纖維針式固相微萃?。╢i ber-SPME）[29]和管內固相微萃?。╥n-tube SPME）[30]。SPME萃取模式有3種[31]：直接萃?。╠irect extraction SPME）、頂空萃?。╤eadspace SPME）和膜保護萃?。╩embrane-protected SPME）。

Klimánková等[32]在纖維表面修飾一層固定相（聚二甲基硅氧烷-碳分子篩-二乙烯苯，PDMS-CAR-DV B），采用頂空固相微萃取模式，萃取魚糜基質中的2-苯氧基乙醇，并用GC-MS/MS進行檢測。經過優化，建立的方法檢出限和定量下限分別為0.03 mg/kg和0.1 mg/kg。Es-Haghi等[33]等以聚乙二醇為黏結劑在纖維表面固定一層表面修飾C18固定相的SiO2納米顆粒，建立SPME直接萃取狗血液中的地西泮的LC-MS/MS檢測方法，并將該方法應用到地西泮在狗血液中代謝動力學的研究中。該方法對地西泮的檢出限為1.7 ng/mL。Zhang等[34]將空間分辨SPME（space-resolved solid-phase microext raction，SR-SPME）應用到魚肌肉中的地西泮測定中，建立了相應的LC-MS/MS測定方法，對地西泮的檢出限為2.5 ng/mL。

2.3 分子印跡技術

MIT是一 種制備可以對模板分子具有選擇性識別功能的聚合物固定相技術[35]。將模板分子和功能單體預組裝，功能單體聚合后，模板分子被洗脫除去，在聚合物固定相中就留下可以對模板分子 選擇性識別的“空穴”[36]。和傳統的SPE和SPME等技術相 比，MIT由于結合了抗體-抗原和酶-底物識別體系的優點，具有選擇性高、重現性好等優點。目前，MIT 多和SPE及SPME等傳統樣品前處理技 術相結合，可以促進傳統樣品前處理技術選擇性的提高，更好地克服生物樣品基質復雜等因素，提高樣品前處理效率[37]。

劉曉芳等[38]將MIT和電化學結合起來研制出檢測豬肉中地西泮殘留的電導型分子印跡仿生傳感器。該方法的線性范圍為0.039～1.25 mg/L，檢出限為0.008 mg/L；地西泮加入量為0.039～1.25 mg/L，回收率為91.3%～95.0%。Song Suqu an等[39]以氯丙嗪為 模板分子制備得到分 子印跡的聚合物材料，并將其與SPE方法結合起來應用到豬尿中氯丙嗪的HPLC檢測中。該方法的檢出限為0.08 mg/L。

2.4 加速溶劑萃取

ASE是一種利用在高溫、高壓的環境中化合物在溶劑中的溶解度會增加的原理，在高溫、高壓的環境中萃取固體或半固體樣品中化合物的前處理方法[40]。ASE憑借有機溶劑用量少、萃取速度快、萃取效率高等優點，獲得了較快發展。

Chdi等[41]將ASE應用到動物血液前處理過程中，80%甲醇-20%乙腈，80℃、150 bar、提取10 min，提取液經表面修飾C18和N-丙基乙二胺的吸附劑進行基質固相分散（matrix solid-phase dispersion， MSPD）凈化，然后用LC-MS/MS檢測，可以實現對阿扎哌隆等12種麻醉 劑的檢測，檢出限和定量下限分別為0.6～6 μg/kg和2～20 μg/kg。

2.5 基質固相分散

MSPD是在SPE基礎上發展起來的一種快速樣品處理技術，由美國Louisiana州立大學的Barker等[42]在1989年最先提出，具有操作簡單、處理速度快等優點。其原理是將表面涂漬有C18等固定相的固相萃取材料與樣品一起研磨，得到研磨好的混合物并將其裝入色譜柱，然后用不同的溶劑淋洗柱子，將待測物洗脫下來進行分析[43]。經過不斷地發展，目前市場上已經有相應的試劑盒出售，如美國Waters公司開發的DisQue基質固相分散樣品制備試劑盒。

渠巖等[44]采用固定相為C18的基質固相分散樣品制備試劑盒凈化畜禽肉（豬、牛、羊、雞、鴨等），建立了畜禽肉中阿普唑侖、咪達唑侖、三唑侖、艾司唑侖、奧沙西泮、地西泮、硝西泮、氯硝西泮、卡馬西平、利多卡因、苯巴比妥、異戊巴比妥、司可巴比妥13種麻醉劑的LC-MS/MS檢測方法。13種麻醉劑的檢出限為0.05～3 μg/kg，回收率為77.4%～100.2%。

目前，在動物樣品前處理方面，除了以上提及的幾種常用方法外，研究人員還開發出來了加壓溶劑萃取[45]等方法?？傮w而言，SPE和SPME憑借較高的靈敏度和簡便的操作過程，是應用最多的前處理方法。

3 檢測方法

表3 動物體內麻醉劑殘留檢測方法Table 3 Analytical techniques for anesthetic residues in animals

目前測定動物體內麻醉劑殘留的方法主要有HPLC、GC、LC-MS/MS、GC-MS/MS，相應的參考文獻見表3。HPLC和GC對儀器要求相對簡單，操作簡便、快捷，但是靈敏度低。隨著檢測儀器的發展，LC-MS/MS和GC-MS/MS被用于動物體內麻醉劑殘留。這些方法雖然對儀器的要求比較高，但是 靈敏度、準確度和重現性均有所提高[46-47]。

3.1 高效液相色譜法

HPLC是 最早用于檢測動物體內麻醉劑殘留的方法之一，由于其操作簡捷，目前仍被大量用于動物體內麻醉劑殘留的檢測。Li Peide等[7]利用液液萃取和C18反相色譜柱分離建立狗的血液中氯胺酮、甲苯噻嗪和咪達唑侖的檢測方法，氯胺酮、甲苯噻嗪和咪達唑侖的檢出限分別為17.8、10.3、15.1 ng/mL。付亞平等[48]將魚血或魚肝經高速離心后，取上層清液經過濾后用高效液相色譜-紫外檢測器分析。分別配制MS-222的含量為10、20、40 μg/mL的魚血及魚肝溶液，魚血和魚肝中MS-222的平均回收率分別為87.78%和76.66%。戴曉欣等[49]通過C18固相萃取柱凈化水產品，建立了其體內苯巴比妥的HPLC檢測方法，方法的檢出限為10 μg/kg，定量下限30 μg/kg。

3.2 氣相色譜法

GC主要是利用不同種類麻醉劑的極性、沸點和吸附性質的不同進行 分離分析。在動物體內麻醉劑殘留分析方面，GC是與HPLC互補的一項檢測方法，它側重于分析具有揮發性和熱穩定好的麻醉劑殘留，如氟烷。Burrows等[6]以1-丙醇為內標物建立了牛血清中七氟烷的頂空氣相色譜檢測方法，檢測器為火焰離子化檢測器，七氟烷和1-丙醇的保留時間分別為2.92、1.56 min。Bergadano等[50]建立了馬血液中氟烷、異氟烷和七氟烷的頂空氣相色譜檢測方法，并基于此方法研究了3種麻醉劑在馬血 液/空氣之間的分配系數。A therley等[51]以二氯甲烷為內標物和氯仿為萃取溶劑建立了兔血液中氟烷、異氟烷和七氟烷的氣相色譜檢測方法，氟烷、異氟烷和七氟烷的線性范圍分別是50～600、50～300、50～300 μg/mL。

3.3 液相色譜串聯質譜聯用法（LC-MS/MS）

由于動物樣品的基質復雜，色譜法直接分析麻醉劑殘留的過程中存在選擇性低、干擾物質較多和靈敏度有限等不足之處， LC-MS/MS以高靈敏度和高選擇性 等優點在麻醉劑殘留檢測中 發揮了越來越多的作用。LC-MS/MS可以同時實現動物體內麻醉劑殘留的定量和定性檢測，多用于分析不易揮發、熱穩定性差的麻醉劑及其代謝物。

Maes等[9]采用液液萃取的方法處理樣品，LC-MS/MS同時檢測狗或馬的血漿中利多卡因及其兩種代謝物（單乙基甘氨酰二甲苯胺和甘氨二甲基苯酰胺）的方法。狗血中利多卡因、單乙基甘氨酰二甲苯胺和甘氨二甲基苯酰胺的檢出限分別為：0.8、2.3、55 ng/mL；在馬血中的檢出限分別為1.1、0.5、13 ng/mL。Scherpenisse等[52]采用pH 4.4的McIllvaine緩沖液（由563 mL 0.10 mol/L檸檬酸和437 mL 0.20 mol/L磷酸氫二鈉混合制備）和甲醇混合液萃取魚糜基質中的MS-222，C18固相萃取柱萃取純化，然后經LC-MS/MS檢測分析。MS-222在羅非魚、鮭魚和鮭鱒魚中的回收率分別是：（67±10）%（加入量為2 μg/kg）、（95±7）%（加入量為2 μg/kg）和（92±3）%（加入量為2.5 μg/kg），檢出限分別是0.5、0.6、0.6 μg/kg。為了減少LC-MS/MS分析過程中樣品基質的干擾，Musteata等[53]利用固相微萃取提取富集老鼠血液中的地西泮及其兩種代謝物去甲安定和去甲羥基安定，再利用LC- MS/MS建立了地西泮在老鼠體內的藥代動力學研究方法，該方法的線性范圍為3～750 ng/mL。于慧娟等[54]通過HLB固相萃取柱凈化大菱鲆和鱖魚 基質，建立了其體內地西泮及其代謝物殘留的LC-MS/MS檢測方法，定量下限為1.0 μg/kg 。其他的LC-MS/MS檢 測動物體內麻醉劑殘留方法報道見表3。

3.4 氣相色譜質譜聯用法（GC-MS/MS）

GC-MS/MS多用于動物體內易揮發、熱穩定性好的麻醉劑及其代謝物的定量和定性檢測分析，如 吸入性的麻醉劑。Deng等[8]通過頂空萃取的方法萃取富集老鼠腦組織中的異氟烷和安氟醚，建立了GC-MS/MS檢測老鼠腦組織中的異氟烷和安氟醚含量的方法，異氟烷和安氟醚的回收率分別為72%和76%。朱馨樂等[63]利用C18固相萃取柱凈化富集豬尿中的地西泮，建立了GC-MS/MS檢測豬尿中的地西泮含量的方法。該方法的定量下限為0.5 μg/L，線性范圍為10～500 μg/L。Cartisera等[64]將兔組織中的4種苯二氮卓類藥物（地西泮、去甲西泮、奧沙西泮和替馬西泮）經甲基叔丁基醚液液萃取和N,O-雙（三甲基硅基）三氟代乙酰胺/三甲基氯硅烷在線衍生后進行GC-MS/MS，地西泮、去甲西泮、奧沙西泮和替馬西泮的定量下限分別為10、1、10、10 ng/g。

目前，在動物體內麻醉劑殘留的檢測方法中，色譜質譜聯用法以高靈敏度、抗基質干擾性、高準確性和高穩定性成為權威的檢測方法。但是，滿足政府監管和中、小企業自檢需求的快速檢測方法還有待進一步研究開發。就此而言，電化學檢測技術[65]、酶聯免疫分析法[66]和膠體金免疫分析法[67]的研究前景較為明朗。

4 結 語

麻醉劑作為一類在食用動物的養殖、運輸和加工等領域普遍使用的藥物，在動物體內殘留檢測方面的研究越來越受重視，但是水產品中麻醉劑殘留檢測研究的深度和范圍仍顯不足。目前，我國水產品中麻醉劑殘留檢測的相關研究仍然是一個薄弱地帶。筆者認為，水產品領域的以下幾個方面的研究值得深入展開。

4.1 水產品中麻醉劑殘留檢測方法標準的研究

筆者查閱資料發現，目前我國還沒有水產品中麻醉劑殘留檢測方面的標準，這給水產品中麻醉劑殘留的監控帶來了很大的不便。通過對水產品中麻醉劑殘留檢測方法的研究，制定出科學的檢測方法標準，可以為水產品養殖、運輸、加工和銷售過程的質量安全監管提供技術支撐。因此，水產品中麻醉劑殘留檢測方法標準的研究對水產品的質量安全具有非常重要的意義，將是一項急需開展的研究工作。

4.2 水產品中麻醉劑殘留的快檢產品開發

目前與水產品相關的快檢產品多集中在禁、限用藥物領域，如氯霉素、孔雀石綠等[68-69]。相對而言，水產品中麻醉劑殘留的快檢產品卻鮮有報道。為了滿足相關管理者建立水產品中麻醉劑的殘留水平監測體系的監管需求，快速檢測水產品中麻醉劑的殘留量，已經成為一項急需完成的挑戰。就此而言，水產品中麻醉劑殘留的快檢產品具有樣品前處理簡單、檢測速度快、經濟成本低等優點，將是解決這個難題的新途徑。

4.3 水產品中麻醉劑殘留風險評估的研究

風險評估是目前水產品質量安全管理的理念之一，也是制定科學監管措施的重要依據[70]。通過水產品中麻醉劑殘留的風險評估，然后進行針對性的監管，可以促進監管效率的提高。然而，目前我國水產品中麻醉劑殘留風險評估相關研究尚屬空白領域。因此，從風險評估的角度研究水產品中麻醉劑殘留的危害，可以為科學的監管措施的制定提供依據，對水產養殖業的健康發展具有非常重要的意義。

[1] ANTKOWIAK B. How do general anaesthetics work?[J]. Naturwissenschaften, 2001, 88(5): 201-213.

[2] GHANAWI J, MONZER S, SAOUD I P. Anaesthetic effi cacy of clove oil, benzocaine, 2-phenoxyethanol and tricaine methanesulfonate in juvenile marbled spinefoot (Siganus rivulatus)[J]. Aquaculture Research, 2011, 44(3): 359-366.

[3] HOSKONEN P, PIRHONEN J. Temperature effects on anaesthesia with clove oil in six temperate-zone fi shes[J]. Journal of Fish Biology, 2004, 64: 1136-1142.

[4] CARTER K M, WOODLEY C M, BROWN R S. A review of tricaine me thanesulfonate for anesthesia of fish[J]. Reviews in Fish Biology and Fisheries, 2011, 21(1): 51-59.

[5] 各國動物保護法縱覽[EB/OL].(2010-03-02)[2013-02-28]. http://news.ifeng.com/mainland/special/baohuxiaodong wu/201003/0302_9661_1561390.shtml.

[6] BURROWS D L, NICOLAIDES A, STEPHENS G C, et al. Sevofl urane analysis in serum by headspace gas chromatography with application to various biological matrices[J]. Journal of Analytical Toxicology, 2004, 28(6): 418-421.

[7] LI Peide, HAN Hangru, ZHAI Xiaohu, et al. Simultaneous HPLCUV determination of ketamine, xylazine, and midazolam in canine plasma[J]. Journal of Chromatographic Science, 2012, 50(2): 108-113.

[8] DENG X, SIMPSON V J. Determination of volatile anesthetics isoflurane and enflurane in mouse brain tissues using gas chromatography-mass spectrometry[J]. Journal of Pharmacological and Toxicological Metho ds, 2004, 49(2): 131-136.

[9] MAES A, WEILAND L, SANDERSEN C, et al. Determination of lidocaine and its two N-desethylated metabolites in dog and horse plasma by high-performance liquid chromatography combined with electrospray ionization tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography B, 2007, 852: 180-187.

[10] 劉建靜, 楊曙明. 氯丙嗪殘留檢測技術研究進展[J]. 中國畜牧獸醫, 2008, 35(10): 141-143.

[11] BURKA J F, HAMMELL K L, HORSBERG T E, et al. Drugs in salmonid aquaculture: a review[J]. Journal of Veterinary Pharmacology and Therapeutics, 1997, 20(5): 333-349.

[12] SNEYD J R. Recent advances in intravenous anaesthesia[J]. British Journal of Anaesthesia, 2004, 93(5): 725-736.

[13] MATCHETT G, ALLARD M, MARTIN R, et al. Neuroprotective effect of volatile anesthetic agents: molecular mechanisms[J]. Neurological Research, 2009, 31(2): 128-134.

[14] 周昆, 屈彩芹. 動物實驗常用麻醉劑的比較與選擇[J]. 實驗動物科學, 2008, 25(2): 41-43.

[15] FRANKS N P, LIEB W R. Mechanisms of general anesthesia[J]. Environ Health Perspect, 1990, 87: 199-205.

[16] COLUMB M O. Local anaesthetic agents[J]. Anaesthesia & Intensive Care Medicine, 2007, 8(4): 159-162.

[17] HENKE J, ASTNER S, BRILL T, et al. Comparative study of three intramuscular anaesthetic combinations (medetomidine/ketamine, medetomidine/fentanyl/midazolam and xylazine/ketamine) in rabbits[J]. Veterinary Anaesthesia and Analgesia, 2005, 32(5): 261-270.

[18] TOPIC POPOVIC N, STRUNJAK-PEROVIC I, COZ-RAKOVAC R, et al. Tricaine methane-sulfonate (MS-222) application in fish ana esthesia[J]. Journal of Applied Ichthyology, 2012, 28(4): 553-564.

[19] MEINERTZ J R, GRESETH S L, SCHREIER T M, et al. Isoeugenol concentrations in rainbow trout (O ncorhynchus mykiss) skin-on fi llet tissue after exposure to AQUI-S? at different temperatures, durations, and concentrations[J]. Aquaculture, 2006, 254(1/4): 347-354.

[20] 李清. 日本重新調整水產養殖用藥規定[J]. 世界農業, 2007(4): 45-50; 54.

[21] 呂書為, 雷紅濤, 孫遠明. 魚用麻醉劑安全性研究進展[J]. 食品科學, 2012, 33(1): 267-270.

[22] 范敏, 汪樹理, 張愛武. 獸用麻醉劑殘留檢測技術研究進展[J]. 經濟動物學報, 2011, 15(2): 120-124.

[23] CHEN Yi, GUO Zhenpeng, WANG Xiaoy u, et al. Sample preparation[J]. Journal of Chromatography A, 2008, 1184: 191-219.

[24] 汪麗萍, 李翔, 孫英, 等. 氣相色譜/質譜法測定豬肉中4種苯二氮類鎮靜劑殘留[J]. 分析化學, 2005, 33(7): 951-954.

[25] 李存, 皇甫偉國, 楊挺, 等. 液相色譜串聯質譜法快速測定豬尿中10種鎮靜劑類藥物殘留量[J]. 分析化學, 2010, 38(7): 1015-1018.

[26] HE Limin, WANG Jun, ZHANG Guijun, et al. Simultaneous determination of tranquilizers and carazolol residues in swine tissues by liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Analytical Letters, 2012, 45(11): 1377-1389.

[27] ARTHUR C L, PAWLISZYN J. Solid phase micro-extraction with thermal desorption using fused silica optical fibers[J]. Analytical Chemistry, 1990, 62: 2145-2148.

[28] 陳冬梅, 陶燕飛, 余歡, 等. 獸藥殘留分析中樣品前處理技術研究進展[J]. 化學通報, 2009(8): 713-719.

[29] KOZIEL J A, HADDADI S H, KOCH W, et al. Sampling and analysis of nanoparticles with cold fi bre SPME device[J]. Journal of Separation Science, 2009, 32(11): 1975-1980.

[30] VITTA Y, MOLINER-MARTINEZ Y, CAMPINS-FALCO P, et al. An in-tube SPME device for the selective determination of chlorophyll a in aquatic systems[J]. Talanta, 2010, 82(3): 952-956.

[31] LORD H, PAWLISZYN J. Evolution of solid-phase microextraction technology[J]. Journal of Chromatography A, 2000, 885(1/2): 153-193.

[32] KLIMNKOVá E, RIDDELLOV K, HAJSLOV J, et al. Development of an SPME-GC-MS/MS procedure for the monitoring of 2-phenoxyethanol in anaesthetised fi sh[J]. Talanta, 2008, 75(4): 1082-1088.

[33] ES-HAGHI A, ZHANG X, MUSTEATA F M, et al. Evaluation of biocompati ble poly(ethylene glycol)-based solid-phase microextraction fiber for in vivo pharmacokinetic studies of diazepam in dogs[J]. Analyst, 2007, 132(7): 672-678.

[34] ZHANG X, CAI J B, OAKES K D, et al. Development of the spaceresolved solid-phase microextraction technique and its application to biological matrices[J]. Analytical Chemistry, 2009, 81(17): 7349-7356.

[35] KANDIMALLA V B, JU H. Molecular imprinting: a dynamic technique for diverse applications in analytical chemistry[J]. Analytical and Bioanalytical Chemistry, 2004, 380(4): 587-605.

[36] 胡小剛, 李攻科. 分子印跡技術在樣品前處理中的應用[J]. 分析化學, 2006, 34(7): 1035-1041.

[37] VASAPOLLO G, DEL SOLE R, MERGOLA L, et al. Molecularly imprinted polymers: present and future prospective[J]. International Journal of Molecular Sciences, 2011, 12(9): 5908-5945.

[38] 劉曉芳, 姚冰, 劉國艷, 等. 檢測豬肉中地西泮的分子印跡仿生傳感器的研制[J]. 分析化學, 2010, 38(5): 683-687.

[39] SONG Suquan, SHI Xizhi, LI Rongxiu, et al. Extraction of chlorpromazine with a new molecularly imprinted polymer from pig urine[J]. Process Biochemistry, 2008, 43(11): 1209-1214.

[40] SUN Hanwen, GE Xusheng, Lü Yunkai, et al. Application of accelerated solvent extraction in the analysis of organic contaminants, bioactive and nutritional compo unds in food and feed[J]. Journal of Chromatography A, 2012, 1237(11): 1-23.

[41] CHDI J H, LAMSHOFT M, ZUHLKE S, et al. Determination of sedatives and adrenergic blockers in blood meal using accelerated solvent extraction and orbitrap mass spectrometry[ J]. Journal of Chromatography A, 2012, 1260: 111-119.

[42] BARKER S A, LONG A R, SHORT C R. Isolation of drug residues from tissues by solid phase dispersion[J]. Journal of Chromatography A, 1989, 475(2): 353-361.

[43] CAPRIOTTI A L, CAVALIERE C, GIANSANTI P, et al. Recent developments in matrix solid-phase dispersion extraction[J]. Journal of Chromatography A, 2010, 1217(16): 2521-2532.

[44] 渠巖, 路勇, 馮楠, 等. 基質固相分散-超高效液相色譜-串聯質譜法同時測定畜禽肉中殘留的13種鎮靜藥物[J]. 食品科學, 2012, 33(8): 252-255.

[45] SUBEDIA B, MOTTALEBB M A, CHAMBLISS C K, et al. Simultaneous analysis of select pharmaceuticals and personal care products in fish tissue using pressurized liquid extraction combined with silica gel cleanup[J]. Journal of Chromatography A, 2011, 1218(37): 6278-6284.

[46] GRAY M J, CHANG D, ZHANG Ying, et al. Development of liquid chromatography/mass spectrometry methods for the quantitative analysis of herbal medicine in biological fluids: a review[J]. Biomedical Chromatography, 2009, 24(1): 91-103.

[47] KOEK M M, JELLEMA R H, van der GREEF J, et al. Quantitative metabolomics based on gas chromatography mass spectrometry: status and perspectives[J]. Metabolomics, 2011, 7(3): 307-328.

[48] 付亞 平, 易有榮, 汪艷, 等. 高效液相色譜法測定魚用麻醉劑在魚體中的濃度[J]. 湖北醫科大學學報, 2000, 21(2): 119-120.

[49] 戴曉欣, 朱新平, 吳仕輝, 等. 固相萃取-高效液相色譜法測定水產品中的苯巴比妥[J]. 食品科學, 2012, 33(18): 232-235.

[50] BERGADANO A, LAUBER R, ZBINDEN A, et al. Blood/gas partition coeffi cients of halothane, isofl urane and sevofl urane in horse blood[J]. British Journal of Anaesthesia, 2003, 91(2): 276-278.

[51] ATHERLEY R J, ANTOGNINI J F. A rapid and simple method for determination of halothane, isofl urane and sevofl urane in blood using gas chromatography[J]. Biomedical Chromatography, 2004, 18(9): 714-718.

[52] SCHERPENISSE P, BERGWERFF A A. Determination of residues of tricaine in fish using liquid chromatography tandem mass spectrometry[J]. Analytica Chimica Acta, 2007, 586: 407-410.

[53] MUSTEATA F M, LANNOY I, GIEN B, et al. Blood sampling without blooddraws for in vivo pharmacokinetic studies in rats[J]. Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis, 2008, 47(4/5): 907-912.

[54] 于慧娟, 錢蓓蕾, 黃冬梅, 等. 液相色譜串聯質譜法測定大菱鲆和鱖魚體中地西泮及其代 謝物殘留的研究[J]. 中國漁業質量與標準, 2012, 2(1): 54-59.

[55] KAWANO S, MURAKITA H, YAMAMOTO E, et al. Direct analysis of drugs in plasma by column-switching liquid chromatography-mass spectrometry using a methylcellulose-immobilized rever sed-phase pretreatment column[J]. Journal of Chromatography B, 2003, 792(1): 49-54.

[56] SCHEMTHANER A, LENDL C E, HARTMANN K, et al. Medetomidine/midazolam/ketamine anaesthesia in ferrets: effects on cardiorespiratory parameters and evaluation of plasma drug concentrations[J]. Veterinary Anaesthesia and Analgesia, 2011, 38(5): 439-450.

[57] DELAHAUT P, BRASSEUR P Y, DUBOIS M. Multiresidue method for the detection of tranquillisers, xylazine, and a β-blocker in animal production by liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2004, 1054(1/2): 373-378.

[58] KAUFMANN A, BUTCHER P, MADEN K, et al. Quantitative multiresidue method for about 100 veterinary drugs in different meat matrices by sub 2 μm particulate high-performance liquid chromatography coupled to time of flight mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography A, 2008, 1194(1): 66-79.

[59] FLUCHARD D, KIEBOOMS S, DUBOIS M, et al. Determination of a method for detecting and quantifying azaperone, azaperol and carazolol in pig tissues by liquid chromatography-tandem mass spectrometry[J]. Journal of Chromatography B: Biomedical Sciences and Applications, 2000, 744(1): 139-147.

[60] 朱敏, 孫偉紅, 邢麗紅, 等. 液相色譜-串聯質譜法測定水產品中麻醉劑MS-222殘留[J]. 分析實驗室, 2012, 31(6): 59-62.

[61] RYDEVIK A, BONDESSON U, HEDELAND M. Structural elucidation of phase I and II metabolites of bupivacaine in horse urine and fungi of the Cunninghamella species using liquid chromatography/ multi-stage mass spectrometry[J]. Rapid Communications in Mass Spectrometry, 2012, 26(11): 1338-1346.

[62] MITROWSKA K, POSYNIAK A, ZMUDZKI A. Rapid method for the determination of tranquilizers and a beta-blocker in porcine and bovine kidney by liquid chromatography with tandem mass spectrometry[J]. Analytica Chimica Acta, 2009, 637(1/2): 185-192.

[63] 朱馨樂, 劉琪, 李丹, 等. 氣相色譜-質譜法快速測定豬尿中地西泮[J].中國獸藥雜志, 2009, 43(1): 28-30.

[64] CARTISERA N, BEVALOT F, LE MEUR C, et al. Gas chromatography-tandem mass spectrometry assay for the quantifi cation of four benzodiazepines and citalopram in eleven postmortem rabbit fl uids and tissues, with application to animal and human samples[J]. Journal of Chromatography B, 2011, 879(27): 2909-2918.

[65] de JESUS C G, FORTE C M S, WOHNRATH K, et al. Electroanalytical performance of (SiPy+Cl/CuTsPc)(5) LbL film for detecting promethazine hydrochloride[J]. Electroanalysis, 2011, 23(8): 1814-1820.

[66] LIU Wei, LI Weihua, YIN Weiwei, et al. Preparation of a monoclonal antibody and development of an indirect competitive ELISA for the detection of chlorpromazine resi due in chicken and swine liver[J]. Journal of the Science of Food and Agriculture, 2010, 90: 1789-1795.

[67] WANG Jinfen, YUAN Ruo, CHAI Yaqin, et al. A novel immunosensor based on gold nanoparticles and poly-(2,6-pyridinediamine)/multiwall carbon nanotubes composite for immunoassay of human chorionic gonadotrophin[J]. Biochemical Engineering Journal, 2010, 51(3): 95-101.

[68] 劉歡, 孫偉紅, 馬兵, 等. 水產品中氯霉素殘留快速檢測產品的質量分析和評價[J]. 中國漁業質量與標準, 2012, 2(3): 55-61.

[69] 錢蓓蕾, 王媛, 蔡友瓊. 孔雀石綠快速檢測試劑盒的比較研究以及在水產品監控中的應用[J]. 現代漁業信息, 2011, 26(10): 19-21.

[70] 王群, 宋懌. 水產品中孔雀石綠的風險評估[J]. 中國漁業質量與標準, 2012, 2(1): 22-26.

Progress in Detection of Anesthetic Residues in Food-Producing Animals

LI Jin-cheng, LIU Huan, WU Li-dong, WANG Qun, Lü Hai-yan, SONG Yi*
(Quality and Standard Research Center, Chinese Academy of Fishery Sciences, Beijing 100141, China)

People’s daily life is closely related to anesthetic residues in animal-derived foods, which has gained growing attention. However, there is currently insufficient research with regard to the detection of anesthetic residues in foodproducing animals and relevant review papers have been rarely published. This paper reviews the current si tuation with regard to the detection of anesthetic residues in food-producing animals with emphasis on sample pretreatment techniques and analytical techniques. Taking aquatic products as an example, we exp lore future research directions in the detection of anesthetic residues in animals.

animals; aquatic products; anesthetic residues; sample pretreatment techniques; analytical techniques

TS207.3

A

1002-6630（2014）05-0251-06

10.7506/spkx10 02-6630-201405049

2013-02-28

中國水產科學研究院院部中央級公益性科研院所基本科研業務費專項（2013C005）；

國家現代農業（羅非魚）產業技術體系建設專項（2060302-425-02）

李晉成（1983—），男，助理研究員，博士，研究方向為水產品質量安全監管及檢測技術。E-mail：lijc@cafs.ac.cn

*通信作者：宋懌（1963—），女，研究員，學士，研究方向為水產品質量安全與管理。E-mail：songyi@cafs.ac.cn