中藥治療藥物性肝損傷實驗研究進展

陳苓麗王 鵬羊 波黃 萍

1正大青春寶藥業有限公司 杭州 310023 2浙江中醫藥大學 3浙江省立同德醫院

中藥治療藥物性肝損傷實驗研究進展

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1正大青春寶藥業有限公司 杭州 310023 2浙江中醫藥大學 3浙江省立同德醫院

藥物性肝損傷；中藥治療；實驗研究；綜述

藥物性肝損傷（drug-induced liver injury，DILI）是指在藥物使用過程中，因藥物或其代謝產物引起的肝組織的生理功能變化或免疫應答所引起的肝損傷[1]。大量新藥的出現以及聯合用藥的增多，使藥物性肝損傷已經成為臨床上常見的肝臟疾病之一。在我國，結核藥、中草藥、抗生素和非甾體抗炎藥是引起藥物性肝損傷的主要藥物種類[2]，其作用機制仍不夠明確。某些中藥具有減輕肝損傷的病理程度，改善臨床癥狀和某些實驗室指標的作用。本文就近年來中藥治療藥物性肝損傷的實驗研究現狀進行了綜述。

1 動物模型的研究

復制DILI模型的動物主要是大鼠和小鼠。建模方法主要以藥物誘導為主，常用的藥物有異煙肼和利福平、雷公藤多苷和對乙酰氨基酚[3]。異煙肼和利福平是臨床治療結核病一線藥物，單獨使用都具有肝毒性作用，聯合使用可增大肝損傷的幾率。Pal等[4]采用異煙肼和利福平聯合用藥的方式建立大鼠DILI模型，給Wistar大鼠每天空腹灌胃50mg/（kg·d）的異煙肼和利福平，28天后造模成功。楊慧媛等[5]采用異煙肼和利福平成功復制DILI模型，設立正常對照組、異煙肼+利福平組（RH）及異煙肼組（H組），1天1次定時空腹灌胃，劑量50mg/（kg·d），第4周造模成功，研究發現異煙肼與利福平致肝損傷作用機制可能與脂質過氧化增加有關。

對乙酰氨基酚是常用的非甾體抗炎藥，也是引起DILI的主要藥物，采用對乙酰氨基酚建立的肝損傷模型常被用來檢驗天然產物是否有潛在的肝毒性[6]。Liu等[7]通過給小鼠一次性腹腔注射300～500mg/kg的對乙酰氨基酚溶液（加熱溶于磷酸鹽緩沖液），4h后造模成功。Cover等[8]采用對乙酰氨基酚建立DILI模型，通過灌胃方式給小鼠質量濃度為2.5%的對乙酰氨基酚混懸液（300mg/kg），24h后造模完成。

雷公藤具有抗炎和免疫抑制作用，多用于治療自身免疫性疾病，具有較好的療效，但該藥具有明顯的肝毒性。從雷公藤中提取的雷公藤多苷可用于誘導DILI的產生。祿保平等[9]對雷公藤多苷致小鼠急性肝損傷的劑量、時間及可能機理進行了研究，研究發現給小鼠灌胃相當于成人20倍劑量的雷公藤多苷（270mg/kg），18h后即可以引起小鼠急性肝損傷。

2 單味藥及有效成分的研究

近年來，中醫治療DILI的單味藥多以含有機酸類、生物堿類、環烯醚萜類、黃酮苷、多糖等活性成分的中藥為主[10]。

2.1 淫羊藿總黃酮 淫羊藿為我國傳統中藥，具有補腎陽，強筋骨，祛風濕的功效，其主要成分為黃酮類化合物。淫羊藿總黃酮是從小檗科淫羊藿屬植物莖葉中提取的總黃酮類成分，研究發現其具有廣泛的藥理作用。蔡大偉等[11]采用異煙肼和利福平建立小鼠DILI模型，以0.2%和0.1%的淫羊藿總黃酮進行干預，10天后淫羊藿總黃酮高劑量組小鼠血清和肝組織中的谷丙轉氨酶（GPT）明顯降低，血甘油三酯（TG）含量也明顯降低，SOD活性有所提高。

2.2 黃芩苷 薛洪源等[12]通過異煙肼和利福平誘導制造小鼠藥物性肝損傷模型，結果顯示，黃芩苷能顯著降低模型小鼠血清ALT水平、肝組織中MDA含量及細胞色素P450 2E1活性，增加GSH含量。病理組織學檢查顯示，黃芩苷能明顯減輕肝細胞的變性和壞死。認為黃芩苷對異煙肼和利福平引起的肝損傷的保護作用不僅與清除自由基、抑制肝細胞膜的脂質過氧化反應有關，還與抑制細胞色素P450 2E1的活性有關。

2.3 慈 菇 又稱剪刀草、燕尾草、蔬卵，具清熱止血、解毒消腫、散結的功效。廖艷等[13]研究發現，不同劑量的慈菇均能明顯降低異煙肼和利福平誘導的DILI大鼠肝組織中的MDA含量，減輕肝組織變性和壞死程度。其中高劑量組慈菇能顯著降低肝損傷大鼠的肝臟指數、提高肝勻漿中SOD和谷胱甘肽轉硫酶GST的活性。中劑量組慈菇亦能顯著提高GST的活性。并由此推測慈菇對異煙肼和利福平誘導的大鼠肝損傷具有保護作用，可能與其抗脂質過氧化、減少過氧化脂質的生成、增強機體對自由基的清除有關。

2.4 當歸多糖 當歸多糖是當歸主要成分之一。劉娟[14]在地塞米松誘導肝損傷的動物模型中，以100mg/ kg和200mg/kg劑量的當歸多糖口服干預10天后發現，兩組劑量的當歸多糖均能降低血清ALT、AST，減輕肝組織損傷。當歸多糖還能提高SOD活性，增加GSH含量，但對P450 2E1酶活性沒有影響。研究認為當歸多糖能有效干預地塞米松所致肝損傷可能與抑制脂質過氧化、調節糖代謝紊亂有關。

2.5 尾穗莧甲醇提取物 Ashok Kumar等[15]采用撲熱息痛致大鼠肝損傷模型，以200mg/kg和400mg/kg的尾穗莧甲醇提取物進行干預16天，結果顯示，尾穗莧甲醇提取物能抑制撲熱息痛導致的ALT、AST、總膽紅素（TB）、直接膽紅素（DB）水平的升高及血清白蛋白（ALB）水平的降低，同時還能顯著降低MDA及總蛋白水平，顯著升高GSH、過氧化氫酶（CAT）及總硫醇（TT）水平。

2.6 相思藤總黃酮 相思藤又名土甘草，系豆科相思子屬，實驗研究證明其對肝炎有一定的治療作用。陳紅霞等[16]采用對乙酰氨基酚致藥物性肝損傷小鼠模型，以相思藤總黃酮治療5天，結果顯示相思藤總黃酮能顯著降低小鼠的AST、ALT活性，提高肝組織中SOD、GSH和谷胱甘肽過氧化酶（GSH-PX）含量，降低MDA含量。

2.7 大黃 王秀明等[17]采用對乙酰氨基酚建立藥物性肝損傷小鼠模型，以4g/kg和8g/kg的大黃水煎劑進行干預16h后發現：大黃水煎劑組小鼠肝臟TNF-α基因的表達較模型組明顯降低，肝臟脂肪變性和壞死情況有所改善。推測大黃抑制TNF-α基因的表達可能是其治療的機制之一。

2.8 萬年青總皂苷 宛瑩等[18]用萬年青總皂苷對對乙酰氨基酚致小鼠急性肝損傷模型治療3天后發現：萬年青總皂苷能抑制血清AST和ALT的活性，減少脂質過氧化物的生成，提高過氧化氫酶、SOD和GSH-PX的活性，抑制細胞凋亡蛋白酶caspase-3和缺氧誘導因子1α的表達。同時體外實驗發現萬年青總皂苷能顯著減少細胞色素P4502E1的活性及環氧化酶-2的表達。認為其作用機制可能與抗氧化、抑制細胞色素P4502E1的活性和減少缺氧誘導因子1α的生成有關。

2.9 番茄紅素 番茄紅素是一種不含氧的類胡蘿卜素，同時也是一種很強的抗氧化劑。何軍等[19]用番茄紅素對雷公藤多苷誘導的藥物性肝損傷小鼠干預6天，發現番茄紅素能顯著降低血清中ALT、AST含量，提高小鼠肝組織中SOD活性，降低MDA含量。

3 中藥復方研究

褚春薇等[20]采用異煙肼和利福平建立藥物性肝損傷大鼠模型，以加味一貫煎治療，結果顯示加味一貫煎能抑制大鼠血ALT、AST含量的增加，降低肝組織中MDA水平。同時發現加味一貫煎對肝組織損傷程度與劑量不存在量效關系。蔡大偉等[21]同樣采用異煙肼和利福平致小鼠藥物性肝損傷模型，以丹芪益肝顆粒干預10天，發現丹芪益肝顆粒組較模型組小鼠血清和肝臟ALT活性下降（P＜0.01），同時能明顯降低TG含量（P＜0.05）。同時，丹芪益肝顆粒能明顯降低MDA的含量（P＜0.05），提高SOD的活性（P＜0.05），并能減輕肝細胞的損傷。

柴智等[22]采用雷公藤多苷建立小鼠DILI模型，應用逍遙散進行干預5天結果顯示，與模型組比較，逍遙散組小鼠血清中的ALT、AST含量顯著降低（P＜0.05），谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px活力明顯提高（P＜0.05），血清MDA含量顯著降低（P＜0.05），同時中、高劑量組還可提高SOD水平（P＜0.05）。逍遙散對雷公藤引起的急性肝損傷具有保護作用，其作用機制與抑制脂質過氧化反應有關。柴智等[23]采用雷公藤多苷建立小鼠DILI模型，應用四逆散進行干預7天后發現，與模型組比較，四逆散組小鼠肝組織中Bcl-2表達顯著升高、Bax表達顯著下降，Caspase-3活性明顯下降，TNF-α的mRNA顯著下降。四逆散具有對抗雷公藤多苷引起的急性肝細胞凋亡的作用。

周文靜等[24]采用雷公藤醇提取物建立小鼠DILI模型，以歸脾湯干預5天，與模型組相比，歸脾湯能顯著降低血清ALT、AST、MDA水平，提高GSH-Px水平，中、高劑量還可提高SOD水平，同時歸脾湯各組均能減輕肝臟病理損傷程度。從實驗中得出結論：歸脾湯能保護雷公藤所致的肝損傷，并認為急性肝損傷的發生機制與脂質過氧化有關。

4 小結

中醫藥治療藥物性肝損傷療效肯定，能減輕動物模型的肝組織變性和壞死程度，改善實驗指標。初步研究提示中藥抗肝損傷的作用是多途徑的，多環節的，主要與抗氧化、調節免疫功能、改善肝臟微循環等有關。目前中醫藥治療DILI存在以下問題：①藥物性肝損傷的模型建立方法研究較少，動物模型公認度低，與臨床實際尚有一定的差距。②單味中藥及有效成分的實驗研究較多，但對其作用機制研究不夠深入，其作用靶點、作用過程和作用結果還有待進一步研究。③藥物性肝損傷是用藥物引起的肝損傷，通過中藥進行防治是否會加重肝功能的負擔還需要進一步研究。④造模過程中對中藥的干預時間、中藥造模的劑量無明確標準，需要建立中醫治療DILI的規范標準，以有效評價中醫治療DILI的療效。

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2013-07-10