功能性消化不良中醫(yī)證型動(dòng)物模型制備近況

● 李 妍 劉華一

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功能性消化不良中醫(yī)證型動(dòng)物模型制備近況

● 李 妍*劉華一

通過對(duì)近3年相關(guān)文獻(xiàn)的整理，筆者從肝郁型(肝胃不和型)，肝郁脾虛型，肝脾氣滯型，脾胃虛寒型，脾氣虛弱型，胃虛飲停型總結(jié)了符合中醫(yī)證型的功能性消化不良動(dòng)物模型制備現(xiàn)狀。

功能性消化不良 中醫(yī)證型 動(dòng)物模型 綜述

功能性消化不良(functional dyspepsia,FD)是消化科門診的常見病和多發(fā)病，嚴(yán)重影響著人們的生活質(zhì)量。較之西藥，中醫(yī)治療該病有著明顯的優(yōu)勢。近年來，有關(guān)該病的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究也有了較大的進(jìn)步。通過以“功能性消化不良”、“實(shí)驗(yàn)研究”、“鼠”為關(guān)鍵詞檢索中國知網(wǎng)2010年1月至2013年5月的相關(guān)文獻(xiàn)計(jì)55篇，通過整理發(fā)現(xiàn)，文獻(xiàn)中明確記錄制備中醫(yī)證型動(dòng)物模型的有22篇，涉及證型7種：肝郁型(3篇)，肝胃不和型(5篇)，肝郁脾虛型(8篇)，肝脾氣滯型(1篇)，脾胃虛寒型(3篇)，脾氣虛弱型(1篇)，胃虛飲停型(1篇)。其中肝郁型、肝胃不和型動(dòng)物模型涉及造模方式1種(夾尾刺激法)；肝郁脾虛型涉及造模方式5種(夾尾刺激法，改良夾尾刺激法，慢性束縛法，慢性束縛加飲食失節(jié)加孤養(yǎng)法，慢性束縛加過度疲勞加飲食失節(jié)法)；肝脾氣滯型涉及1種(慢性應(yīng)激法(9種刺激因素))；脾氣虛弱型涉及1種(不規(guī)則喂養(yǎng)法)；脾胃虛寒型涉及造模方式2種(飲食失節(jié)加過食肥甘厚味法和食醋灌胃法)；胃虛飲停型涉及1種(稀酸灌胃法)。現(xiàn)將具體方法進(jìn)行綜述，以期對(duì)該病的深入研究提供方法和依據(jù)。

1 肝郁型

丁宏[1]、白璐[2]、方銀玲[3]參考文獻(xiàn)[4]用夾尾刺激法制作FD肝郁大鼠模型。方法：每日四次(8:00，11:00，14:00，17:00)用鼠夾夾大鼠尾巴遠(yuǎn)端1/3處，每次夾尾刺激持續(xù)30分鐘(如有破損用碘伏涂擦)，連續(xù)刺激7天。7天后出現(xiàn)進(jìn)食量減少，體形漸瘦，溏便，毛發(fā)變暗、枯黃、不順，易怒，常互相嘶咬，并有緊張、焦慮狀態(tài)，提示造模成功。郭氏的造模方法應(yīng)用最多，被認(rèn)為是比較經(jīng)典的FD模型制備方法。在文獻(xiàn)的記錄中，弭艷紅[5]、胡淑娟[6]、劉松林[7、8]、高帆[9]亦采用該方法建立肝胃不和型FD大鼠模型。

2 肝郁脾虛型

黃雅慧[10]參考郭海軍氏方法[4]制作肝郁脾虛型功能性消化不良動(dòng)物模型。連續(xù)刺激8天。于文靖[11]，包海蘭[12]、吳艷慧[13]參考文獻(xiàn)[4]采用改良夾尾刺激法制造 FD 肝郁脾虛模型。方法：每日用長海綿鑷子鉗夾大鼠尾巴末端1/3處，以令其尖叫掙扎但不破皮為度( 如有抓傷破皮，則用0.5%碘伏消毒受傷部位，以防感染)，使其暴怒并和其他大鼠廝打，每次持續(xù)30分鐘，2次/d，連續(xù)刺激3周。造模期間，各組大鼠自由進(jìn)食及飲水。經(jīng)夾尾刺激后的大鼠，與正常對(duì)照組比較，出現(xiàn)進(jìn)食量減少，體形漸瘦，溏便，毛發(fā)變暗、枯黃、不順，易怒，常互相嘶咬，并有緊張、焦慮狀態(tài)，提示造模成功。岳利峰，王玲等[14]運(yùn)用 21d慢性束縛應(yīng)激法造大鼠肝郁脾虛證模型。方法：將大鼠束縛于特制的束縛架上，每日3h，束縛時(shí)間點(diǎn)隨機(jī)，連續(xù)束縛21d。郭建麗，馮瑪莉等[15]考慮到現(xiàn)代人壓力大、易飲食失節(jié)、孤處易抑郁的特點(diǎn)，應(yīng)用慢性束縛加飲食失節(jié)孤養(yǎng)的方法成功創(chuàng)立符合中醫(yī)證候特征的肝郁脾虛模型。方法：將造模大鼠放入自制的鋼絲網(wǎng)籠中，令其身軀及四肢不能自由活動(dòng)，每籠1只孤養(yǎng)，每天束縛6h，從9：00am-3：00pm。每周給大鼠不定時(shí)的禁食2次，造模時(shí)間3周。王玉杰[16]、呂瑤[17]采用慢性束縛應(yīng)激+過度疲勞+飲食失節(jié)的方法制備模型。方法：實(shí)驗(yàn)前全部動(dòng)物進(jìn)行預(yù)游泳，剔除游泳時(shí)間少于lOmim，大于20min的大鼠。合格造模大鼠于每天上午8: 00置于束縛盒中限制3h，下午2: 00置于盛有溫水(22±1℃)的大塑料桶中游泳l0min。隔日喂食(隔日禁食，隔日足量給食)，連續(xù)3周。

3 肝脾氣滯型

由于機(jī)體對(duì)單一應(yīng)激源刺激易產(chǎn)生耐受性，因此肖政華[18]參考文獻(xiàn)[19]運(yùn)用多種不可預(yù)知的刺激方式交替進(jìn)行，制備肝脾氣滯型小鼠模型。小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3天，選取多種刺激因素對(duì)小鼠進(jìn)行刺激，包括：①食物剝奪(24h)；②飲水剝奪合并空瓶刺激(12h)；③倒懸(30min)；④束縛(30min)；⑤夾尾(1h)；⑥明暗顛倒(24h)；⑦濕籠飼養(yǎng)(24h)；⑧超聲刺激(2 h )；⑨強(qiáng)迫游泳(45°C, 5min)。每天隨機(jī)選取上述9種刺激中的一種，刺激項(xiàng)目相鄰的兩天不重復(fù)，讓動(dòng)物無法預(yù)料剌激的發(fā)生，應(yīng)激處理方法在每日上午08: 30開始更換，這樣連續(xù)刺激21d，每種刺激方法平均使用2～3次。

4 脾氣虛弱型

劉富林等[20]采用不規(guī)則喂養(yǎng)的方法，在小鼠胃電節(jié)律失常模型[21]基礎(chǔ)上，加以超聲波噪音刺激。即單日進(jìn)食，逢雙禁食，以打亂正常的飲食規(guī)律，自由飲水，并于每日8:00～20:00 將超聲波清洗機(jī)放置鼠籠附近，每 2 小時(shí)噪音干擾 1 次，每次持續(xù)約 30分鐘，持續(xù) 14 天，建立小鼠 FD 模型。

5 脾胃虛寒型

陳蘇寧[22]、史業(yè)東[23]按文獻(xiàn)[24]方法，用4℃食醋給大鼠10L/g灌胃，每日1次，連續(xù)10d。大鼠出現(xiàn)，活動(dòng)減少、倦臥少動(dòng)、扎堆、拱背、反應(yīng)遲鈍、唇色蒼白，捉拿時(shí)反抗無力，漸見體型瘦弱，體重下降，便溏，皮毛粗糙稀疏，飲食及飲水量減少，12項(xiàng)中有9項(xiàng)即為造模成功標(biāo)準(zhǔn)。沙蘭，吳元祥[25]制備脾胃虛寒模型采用的方法與人類的飲食失節(jié)、過食肥甘厚味等多種致病因素相一致。每日灌胃精煉豬油(1ml/100g),同時(shí)給以圓白菜喂養(yǎng)，連續(xù)造模10d。

6 胃虛飲停型

臨床上有類功能性消化不良病人表現(xiàn)為胃液體排空延遲,其臨床表現(xiàn)類似于中醫(yī)痞證中胃虛飲停證的表現(xiàn)。曹峰，傅延齡[26]參考文獻(xiàn)[27]的造模方法將大鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)3 天后，在溫度為0℃條件下，用濃度為0.5mol/L鹽酸(用量按 0.8ml/l00g) 灌胃，每日1次，共造模2 周。

7 小結(jié)和展望

建立符合中醫(yī)證型的動(dòng)物模型不僅是從事中醫(yī)藥物作用機(jī)制研究的基礎(chǔ)，而且也是中藥新藥開發(fā)研制的平臺(tái)，還可用于中藥和方劑的藥效評(píng)價(jià)。因此，研究和復(fù)制一些符合中醫(yī)證候特點(diǎn)的動(dòng)物模型有著十分重要的意義。通過對(duì)近3年來功能性消化不良中醫(yī)證型動(dòng)物模型制備方法的總結(jié)，我們發(fā)現(xiàn)目前還存在以下問題：①FD中醫(yī)分型比較混亂，證型不統(tǒng)一，勢必給分型造模帶來不便；②合格的中醫(yī)證型動(dòng)物模型即要符合中醫(yī)理論，又要滿足FD的診斷標(biāo)準(zhǔn)，嚴(yán)格意義上講，難度較大；③造模方法相對(duì)較為集中，多采用郭海軍的夾尾激怒刺激法，如肝郁型和肝胃不和型的模型制作都采用了該方法；④模型制備成功否缺乏客觀檢測標(biāo)準(zhǔn)；⑤不同制備方法間的優(yōu)劣比較，研究較少，如肝郁脾虛型造模方法達(dá)5種之多，哪種方法好，缺乏進(jìn)一步的研究。因此需要我們?cè)谌蘸蟮墓ぷ髦兄鸩酵晟浦嗅t(yī)證型動(dòng)物模型的制備，以便更好的進(jìn)行中醫(yī)藥研究。

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李妍，女，醫(yī)學(xué)博士，主治醫(yī)師。研究方向：從事脾胃病的臨床研究。獲市級(jí)科技成果獎(jiǎng)1項(xiàng)，參與科技部課題1項(xiàng)。

天津中醫(yī)藥研究院附屬醫(yī)院(300120)