免疫組化技術在病理診斷中的應用思考

管沛璇

（天津醫科大學臨床醫學院醫學系，天津 300270）

免疫組化技術在病理診斷中的應用思考

管沛璇

（天津醫科大學臨床醫學院醫學系，天津 300270）

目前在臨床上，免疫組化已經在腫瘤病理診斷中得到了廣泛應用，涉及領域包括腫瘤組織起源的鑒別、未分化惡性腫瘤性質的判定、各種形態系統腫瘤鑒別、確定腫瘤原發部位等。近幾年關于免疫組化的研究不斷深入，本文從提高病理診斷準確性、激素受體及生長因子的檢測對預后和治療的意義、癌基因的臨床應用、對微小轉移病灶及時準確的發現等方面對免疫組化在病理診斷中的應用情況進行了闡述。

免疫組化技術；腫瘤；病理診斷；臨床價值

在20世紀70年代，免疫組化技術在病理診斷中開始被應用，隨著技術的不斷成熟，已經達到了抗原修復技術、自動免疫染色系統以及敏感的檢測系統的建立等。目前在臨床腫瘤病理診斷中，免疫組化技術應用越來越廣泛，臨床價值愈發顯著[1]。本文出于對免疫組化技術在病理診斷中的應用價值進行評價分析的目的，從提高病理診斷準確性、激素受體及生長因子的檢測對預后和治療的意義、癌基因的臨床應用、對微小轉移病灶及時準確的發現等方面展開了綜述，詳見下文。

1 提高病理診斷準確性

以臨床醫師角度分析，病理診斷效果顯著，結果準確，癌癥就是癌癥、結核就是結核，不會出現錯誤。曾有文獻報道[2]，石蠟切片100%正確，術中快速診斷的準確率應達到98%，然而臨床實踐中發現，想要達到診斷100%準確是不可能的，首先由于技術水平還未達到要求，另外，現階段的認識水平也十分有限，鑒別診斷手段無法做出準確診斷。在廣泛應用免疫組化技術前，大概10%的腫瘤診斷均十分困難，而在免疫組化技術發展起來以后，雖然由于檢驗員的經驗及抗體數量、種類的不同可影響檢查效果，但患者的臨床診斷率已提高至50%～80%，因此可以斷定會有半數以上疑難病例經免疫組化技術得到了確診，這可以為腫瘤患者的臨床治療提供有力指導。

2 檢測生長因子、激素受體對治療及預后的積極意義

人體內諸多生長因子與激素受體在調節正常組織各種功能中具有重要地位，并且會在很大程度上直接影響著腫瘤生物學行為，而在腫瘤各種生長因子及激素受體檢查中，利用免疫組化技術予以定量、定位分析，在臨床腫瘤診治工作中的應用較為廣泛，并且在乳腺癌與激素受體關系評價中得到了明確的結論：刺激素受體陽性乳腺癌患者預后較陰性更加理想，顯著延長無瘤生存期。現階段在臨床上，癌細胞核內激素受體可用于預測乳腺癌對于激素的反應性。

3 癌基因應用

癌基因在腫瘤生物學內的應用價值的相關研究并不少見，諸多研究揭示，瘤細胞通常有癌基因突變、擴增、活性異常、移位等表現，也可通過MRNA瘤的蛋白水平異常增加來表現，采取免疫組化技術定量并定位測量該類蛋白，可用于評價其臨床價值。雖然瘤基因有較多種類，然而現階段已經有腫瘤臨床意義的則很少，多為C-MYC、e-erbB、RAS以及P53等。

已有研究證實[3]，C-myc為在核內DNA產生作用的一個腫瘤基因，可有效刺激DNA合成，如果C-myc表達明顯增加可有效促進腫瘤生長及其進展，促使腫瘤侵襲性大幅提高。通過對小細胞肺癌及宮頸癌等患者展開進一步深入研究發現，對于那些C-myc表達明顯增加的患者，其生存期均有明顯的縮短。

4 對微小轉移病灶及時準確的發現

對于傳統的病理診斷手段而言，在組織中找到單個的轉移性腫瘤或者是幾個腫瘤會十分的困難，甚至是不可能，而經免疫組化技術則可以幫助微小轉移病灶的發現。譬如說對骨髓的免疫組化檢查中可發現，常規方法認為是無骨髓受累的乳腺癌患者中會有21%的患者存在骨髓轉移灶。除此外，病理中采取活檢技術進行檢測時，因采集的組織相對較少，又會存在擠壓等諸多認為改變，進而增加了診斷的難度，準確性大大降低，而在采取免疫組化染色時，則能夠對癌細胞的存在進行顯示，使微小癌變組織、轉移組織甚至是不易察覺的病變均得到準確的診斷。

5 對腫瘤細胞增生程度的評價

有研究[4]發現，腫瘤細胞增生活躍程度可直接影響到患者的治療效果及預后情況。在對腫瘤生長狀況活躍與否進行判斷時，傳統判斷方法是通過病理組織學觀察細胞核分裂像多少，然而，因計數準確度很難保證，又加之影響因素復雜，從而導致臨床應用受限。而免疫組化技術可以定量與定位檢測腫瘤細胞增生抗原，且其操作相對簡單而結果可靠，可以借助于ki-67、增殖細胞抗原單克隆抗體對其予以科學準確鑒別。

6 對治療分期的影響

Bauer KR[5]等人的研究發現，腫瘤屬于浸潤發生還是原位、有無淋巴管侵襲等和腫瘤分期關聯密切，而在對這些問題進行判斷時，采用常規病理組織學檢查方法通常的難度較大，準確度較低，在采取免疫組化技術后，則能夠快速準確的獲取檢測結果。譬如說經層粘連蛋白以及Ⅳ型膠原蛋白的單克隆抗體能夠對基底膜的主要成分進行清晰的顯示，若是對上皮性癌突變基底膜進行確定后邊可證實非原位癌，是浸潤癌，預后意義也會因此而不同。

7 對腫瘤治療的指導意義

采取免疫組化技術對腫瘤進行診斷和鑒別的臨床意義顯著，已經得到了廣泛的證實，近期有文獻報道，免疫組化技術在腫瘤的治療同樣也存在良好的應用前景。諸多腫瘤對化療均不敏感，出現該現象的主要原因為腫瘤細胞內多藥耐藥基因編碼的酶活性增加引起的，譬如說二氫葉酸還原酶以及p-糖蛋白增加，經免疫組化方法能夠對細胞內的這些酶、糖蛋白等進行檢查，進而對腫瘤的耐藥性進行了解，經這些免疫組化的方法得到定位定量檢測后，對腫瘤治療方案進行選擇，從而達到理想的治療效果。

8 免疫組化技術中抗體的選擇

在免疫組化技術應用在病理診斷中時，抗體的選擇是關鍵，為了將腫瘤組織來源區分開，可以講抗體分成以下幾類：①上皮類抗體，以細胞角蛋白、角蛋白、上皮細胞膜抗原、癌胚抗原為主；②軟組織類抗體，主要包括肌源性標記結蛋白、間葉細胞標記波形蛋白、平滑肌肌動蛋白、肌球蛋白等；③淋巴細胞抗體：包括有B細胞標記CD20、白細胞共同抗原、全T細胞標記CD3以及Ig輕鏈；④神經內分泌細胞抗體，以神經原特異性烯醇化酶、突觸素、嗜鉻顆粒蛋白A為主；⑤黑色素細胞抗體，包括有人體黑色素小體45和S-100蛋白；⑥中樞神經類抗體，以神經原標記神經微絲、膠質細胞標記膠原纖維酸性蛋白為主。一閃抗體只有在科學合理利用的前提下才能夠為臨床診斷提供可靠的參考依據。一般情況下，可以選擇適當抗體一次性對腫瘤類型進行確診，若是不可以，則可選擇以上幾大類抗體中有代表性的進行初步診斷，在腫瘤大類明確后展開有針對性的第2次標記抗體進行確診，進而使診斷率得到顯著提高。

9 小 結

免疫組化技術在臨床診斷中具有操作簡單、實用、快速以及經濟等優勢，為臨床病理診斷中一種常用的先進技術，近幾年隨著醫學技術的不斷發展，使得免疫組化技術也得到了完善，應用不斷廣泛，效果顯著，近期有研究顯示，其在指導臨床治療中同樣具有顯著的臨床價值，值得關注，并展開深入研究，以期對免疫組化技術的優勢進行全面挖掘，為臨床腫瘤疾病的診斷和治療提供更加可靠的參考依據。

[1] 張衛琴.免疫組化技術在病理診斷中的應用[J].安徽醫藥,2012, 17(11): 112-114.

[2] 程樂,戴艷紅,徐新運.內淋巴囊腫瘤臨床、影像、病理和免疫組化分析[J].醫學影像學雜志,2012,26(6):117-119.

[3] 李紅英.免疫組化三陰乳腺癌患者的臨床病理特征及預后分析[J].基層醫學論壇,2011,17(29):2231-2232.

[4] 趙劍萍,高冬明.骨髓活檢組織石蠟連片在免疫組化中的應用[J].中國實用醫藥,2012,19(8):1032-1034.

[5] Bauer KR,Brown M,Cress RD,et al.Descriptive analysis of estro-genreceptor (ER)negative,progesterone receptor (PR)negative,and HER2-negative invasive breast cancer,the socalled triple-neg-ative phenotype:a population based study from the California cancerRegistry[J].Cancer,2007,109(9):1721-1728.

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1671-8194（2014）34-0054-02