菝葜單體活性成分及藥理作用機制研究進展

宋路瑤，馬 云，羅艷琴，秦 飛，李 曉，侯連兵

(南方醫科大學南方醫院藥學部，廣東 廣州 510515)

菝葜，又名金剛藤，為百合科植物菝葜 Smilax china L．的干燥根莖，收錄載2010年版《中國藥典(一部)》，具有利濕去濁、祛風除痹、解毒散瘀的作用，用于治療小便淋濁、帶下量多、風濕痹痛、疔瘡癰腫等[1]。臨床上，拔葜多用于慢性盆腔炎、風濕性關節炎、腫瘤、高尿酸血癥及各種炎癥性疾病的治療，維吾爾族還常用于治療銀屑病[2]。筆者總結了國內外有關菝葜單體活性成分及其作用機制的研究進展，以闡明菝葜發揮藥效的物質基礎及分子機制。

1 單體活性成分研究

1．1 抗炎抑菌成分

阮金蘭等[3]從菝葜乙酸乙酯部位分離了白藜蘆醇和氧化白藜蘆醇，白藜蘆醇0．2 mg/(kg·d)對大鼠棉球肉芽腫有顯著的抑制作用。Khan等[4]分離出了化合物seboldogenin，體外研究表明，其對脂氧合酶有較好的抑制作用，且在10，50 mg/kg劑量下對角叉菜膠誘導的大鼠足跖腫脹有顯著抑制作用。Shao等[5]從菝葜正丁醇部位分離出4個甾體皂苷(1～4)與13個已知化合物(5～17)，所有化合物在10－5mol/L濃度時對環氧化酶－2(COX－2)均有抑制作用，僅化合物5對小鼠腹腔巨噬細胞中腫瘤壞死因子－α(TNF－α)的產生有抑制作用。Vijayalakshmi等[6]從菝葜中分離出的槲皮素對白細胞遷移有顯著抑制作用。熊呈琦等[7]用杯碟法對分離得到的化合物進行了抑菌活性篩選，結果顯示，在100 μg時白藜蘆醇對白色念珠菌、金黃色葡萄球菌均有抑制作用。

1．2 抗腫瘤成分

徐燕等[8]對菝葜正丁醇部位進行分離，得到6個甾體皂苷，通過體外細胞毒活性篩選，發現薯蕷皂苷與diosgenin－3－O－[α－L－rha(1－3)－α－L－rha(1－4)－α－L－rha(1－4)]－β－D－glucopyranoside對K562癌細胞有明顯的細胞毒性。Wu等[9]從菝葜乙酸乙酯部位分離了6個酚類成分，分別為二氫山柰酚、白藜蘆醇、氧化白藜蘆醇、scirpusin A、山柰酚－7－O－β－D－葡萄糖苷、二氫山柰酚－3－O－α－L－鼠李糖苷，研究表明，其對乳腺癌細胞MCF－7和MAD－MB－231細胞的增殖均具有明顯抑制作用。

1．3 抗氧化成分

周艷林等[10]用薄層色譜－生物自顯影導向法從菝葜丙酮提取物中分離鑒定了白黎蘆醇、落新婦苷、黃杞苷和Helicioside A 4個主要抗氧化活性成分。趙鐘祥等[11]從菝葜乙酸乙酯部位中分離得到9個天然多酚類化合物單體，分別為表兒茶素－(7，8－bc)－4a－(3，4－二羥基苯)－二氫－2(3H)－吡喃酮、兒茶素－(7，8－bc)－4β －(3，4－二羥基苯)－二氫 －2(3H)－吡喃酮、兒茶素 －(5，6－e)－4β －(3，4－二羥基苯)－二氫 －2(3H)－吡喃酮和兒茶素－(5，6－e)－4A－(3，4－二羥基苯)－二氫－2(3H)－吡喃酮的混合物、白藜蘆醇、氧化白藜蘆醇、3，5，3c，4c－四羥基、二氫山柰酚、二氫槲皮素、兒茶素，用TEAC法和DPPH法測定其抗氧化活性，發現9個單體成分均能有效清除ABTS+和DPPH自由基，其中表兒茶素 －(7，8－bc)－4a－(3，4－二羥基苯)－二氫－2(3H)－吡喃酮的活性最強。Zhang等[12]用高效液相色譜(HPLC)法測定菝葜提取物中2個最主要的成分落新婦苷和綠原酸，對菝葜不同提取部位與落新婦苷和綠原酸的抗氧化能力進行比較，發現落新婦苷與綠原酸均有抗氧化作用，且有協同作用。

1．4 降血糖成分

沈忠明等[13]首次從菝葜中分離得到柚皮素，其結構為3(S)－5，7，4'－三羥基二氫黃酮，能顯著降低四氧嘧啶糖尿病模型小鼠的血糖含量。體外試驗表明，柚皮素能競爭性抑制醛糖還原酶及非競爭性抑制α－葡萄糖苷酶。

1．5 抗高尿酸血癥成分

Chen等[14]研究菝葜提取物抗高尿酸血癥的作用，從菝葜乙酸乙酯部位分離出了9個化合物單體，體外試驗表明，咖啡酸、白藜蘆醇、蘆丁和氧化白藜蘆醇對黃嘌呤氧化酶均有不同程度的抑制作用，且有協同作用。Chen等[15]還發現，菝葜中的落新婦苷有顯著的抗高尿酸血癥及治療腎病的作用。

1．6 神經保護作用成分

Ban等[16－17]從菝葜中分離出了原兒茶酸、兒茶素、表兒茶素，發現其對淀粉樣β蛋白誘導的大鼠皮質神經元損害均有神經保護作用。氧化白藜蘆醇與白藜蘆醇[18]能抑制N－甲基－D－天冬氨酸(NMDA)誘導的神經細胞死亡。

1．7 抗誘導突變成分

Kim等[19]研究了菝葜中4種主要甾體皂苷的致突變與抗突變作用，結果表明，在污染物致突變性檢測(Ames試驗與Umu試驗)中，4個甾體皂苷均無致突變作用，其中薯蕷皂苷、纖細薯蕷皂苷對致突變物2－(2－呋喃基)－3－(5－硝基－2－呋喃基)－丙烯酰胺(AF－2)誘導的SOS反應有明顯的抑制作用，能顯著抑制誘導產生的β－半乳糖苷酶(β－galactosidase)的活性。

2 藥理作用機制研究

2．1 抗炎作用

菝葜有效部位群能顯著降低慢性盆腔炎模型大鼠子宮組織中炎癥介質前列腺素E2(PGE2)、組胺和5－羥色胺(5－HT)的含量[20]，抑制足腫脹模型大鼠血清及炎性組織中PGE2、一氧化氮(NO)的合成及脂質過氧化[21]。Shu等[22]研究了菝葜水提物對脂多糖誘導小鼠巨噬細胞中PGE2的抑制作用，結果表明，提取物能顯著抑制COX－2活性及其表達，進而抑制PGE2等炎癥介質的產生。晏綠金等[23]研究發現，菝葜乙酸乙酯和正丁醇部位能抑制白細胞介素－1(IL－1)的活性，且能降低血栓素B2(TXB2)含量、升高 6－酮 －前列腺素 F1α(6 －keto－PGF1α)含量，降低TXB2/6－keto－PGF1α含量，表明菝葜有活血化瘀作用，能舒張血管，改善微循環，抑制炎癥的發展進程。

2．2 抗腫瘤作用

Li等[24]對菝葜中的有效成分山柰酚－7－O－β－D－葡萄糖苷進行研究，發現其能誘導 A375和 HL－60細胞凋亡;Hoechst33258熒光染色顯示染色質斷裂聚集，可見凋亡小體形成，DNA瓊脂糖凝膠電泳呈現細胞凋亡的典型梯形條帶圖譜，流式細胞儀直方圖上出現特征性亞二倍體峰;定量分析G1，S，G2/M期的細胞比例，發現山柰酚－7－O－β－D－葡萄糖苷能增加G1期細胞比例，同時降低G2/M期的細胞比例，并呈劑量依賴關系。結果表明，山柰酚－7－O－β－D－葡萄糖苷使腫瘤細胞的細胞周期停滯在G1期，從而誘導細胞凋亡，發揮其對腫瘤細胞的抗增殖作用。該課題組后續研究山柰酚－7－O－β－D－葡萄糖苷能以不依賴P53基因的方式降低細胞周期蛋白(Cyclin)B1和細胞周期蛋白依賴性激酶Cdk1的表達，將HeLa細胞阻滯在G2/M期[25]。抑制核因子NF－κB核轉位，上調Bcl－2相關X蛋白(Bcl－2 associated Xprotein，Bax)、下調 Bcl－2，使 Bcl－2/Bax比值增大，推測山柰酚－7－O－β－D－葡萄糖苷可通過線粒體途徑參與凋亡信號通路。胡麗玲[26]研究菝葜提取物抗卵巢癌細胞的作用機制，發現菝葜正丁醇提取物可能通過抑制蛋白激酶B(PKB)的活性阻滯NF－κB的核轉錄，從而使NF－κB的活性受到抑制，進而抑制其下游因子Bcl－2，Bcl－xL，X連鎖凋亡抑制蛋白(XIAP)、細胞凋亡抑制蛋白－1(cIAP－1)、細胞間黏附分子－1(ICAM－1)、血管內皮生長因子(VEGF)和Cyclin D1的表達，并能活化促細胞凋亡的半胱天冬氨酸蛋白酶－3(Capase－3)、DNA修復酶(PARP)和Bax蛋白。

2．3 免疫抑制作用

呂永寧等[27]發現菝葜提取物能降低佐劑性關節炎小鼠血液中 CD3+CD4+T細胞數，降低 CD4+/CD8+細胞比值，抑制 CD3+CD4+T細胞介導的遲發型超敏反應。研究表明，菝葜能抑制鈣調磷酸酶(CaN)，進而阻斷TCR的信號傳導通路，使T細胞不能活化，從而發揮免疫抑制作用[28]。

2．4 治療便秘型腸易激綜合征作用

馬騰飛等[29]研究發現，菝葜提取物能降低模型大鼠血清5－HT和血漿生長抑素(SS)的含量、升高血漿P物質(SP)的含量，減少模型組大鼠結腸肥大細胞(MC)計數，降低結腸5－HT，SS，SP及脊髓SP免疫組化染色強度的表達。菝葜有效成分可以降低模型大鼠血清NO、血漿降鈣素基因相關肽(CGRP)含量，降低CGRP和血管活性腸肽(VIP)在腸道的表達[30]。

2．5 抗高尿酸血癥作用

Chen等[15]研究了菝葜中落新婦苷對高尿酸血癥和腎病大鼠的作用機制，結果表明落新婦苷能通過增加尿中尿酸(Uur)水平及尿酸排泄分數(FEUA)，顯著降低血清尿酸(Sur)，但不抑制黃嘌呤氧化酶(XOD)活性水平;能使血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)水平恢復正常，抑制轉化生長因子－β1(TGF－β1)和結締組織生長因子(CTGF)的表達及尿酸鈉(MSU)、PGE2和IL－1的形成。

2．6 神經保護作用

Ban等[16－17]從菝葜中分離出原兒茶酸、兒茶素、表兒茶素，發現其均能抑制淀粉樣β蛋白誘導的Ca2+濃度升高，抑制谷氨酸的釋放、活性氧(ROS)的生成及Caspase－3的活性。Ban等[18]進一步研究了菝葜提取物對NMDA誘導的培養大鼠皮質神經元損害及大鼠中腦動脈閉塞引起的腦缺血(MCAO)的神經保護作用，結果表明，菝葜提取物及有效成分均能抑制NMDA誘導的Ca2+濃度升高，抑制NMDA誘導的ROS的產生，降低MCAO引起的腦梗死面積，減少皮質、海馬、海馬CA3區錐體細胞層的病理改變。

3 結語

菝葜在臨床上應用廣泛，特別是治療慢性盆腔炎等婦科慢性炎癥疾病。近年的研究發現，菝葜有抗炎、鎮痛、抗腫瘤、抗氧化、免疫抑制等多種生物活性。對于菝葜化學成分的研究也越來越廣泛，發現了白藜蘆醇、山柰酚－7－O－β－D－葡萄糖苷、柚皮素等多種活性成分，但關于菝葜發揮藥效的基礎物質及其作用機理還需進一步研究。闡明菝葜活性成分及其作用機制有助于開發單體活性成分，研制療效確切、質量可控的新型藥物，符合中藥現代化的發展方向。

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