楊 芳
(湖南省常德市食品藥品檢驗所,湖南 常德 415003)
清潔級小鼠飼養管理的要求
楊 芳
(湖南省常德市食品藥品檢驗所,湖南 常德 415003)
綜述討論清潔小鼠飼養管理的要求,結合本單位的實踐,對清潔級動物有關的人員要求、飼養環境、相關的管理制度、一般飼養管理等方面的要求作了論述。
清潔級小鼠;飼養管理;要求
清潔級小鼠要求飼養在屏障環境中,由于其不攜帶人畜共患疾病、嚴重干擾實驗和主要潛在感染的病原體,能達到一般科研和檢驗基本要求[1],所以成為目前國內主要推廣使用的實驗動物[2]。筆者結合本單位實際情況,在人員要求、飼養環境、相關的管理制度、一般飼養管理等方面的要求進行了一些總結,現簡述如下。
動物管理人員尤其是負責人員應具有相應的學歷、經歷、資歷和能力才能勝任這一工作。技術人員及飼養人員在上崗前都要先進行崗前培訓。所有飼養人員及技術人員均需經過相應的專業技術培訓,經省實驗動物管理委員會考試合格,取得相應的崗位資格證書才可以上崗,培訓經歷和考核成績進入本人業務檔案。
2.1 環境設施的管理[3]
為了保證實驗的質量,小鼠必須飼養在屏障環境或IVC系統中。所以,必須加強環境設施的管理。
在建筑方面:總的要求保持恒定舒適的溫、濕度,保持新鮮、潔凈的室內空氣;保持安靜的環境;保持符合自然節律而柔和的光線。
在外周環境方面:要求遠離居民區、有害品污染區、高噪聲廠區或商業區,設施周圍不種植有花的植物。設施設計要合理,布局配置適當,符合實驗動物設施環境的國家標準,并通過省科技行政管理部門的驗收。每天用84消毒液擦拭走廊及窗臺、地面,每周徹底清掃、消毒一次。
在環境內部控制方面[4]:實驗動物生產間及實驗間的環境技術指標包括空氣潔凈級別達到7級、溫度20~26 ℃,日溫差≤4 ℃,相對濕度40%~70%,壓力差10~50 Pa,換氣次數:10~20次/小時;氣流速度≤0.18 m/s;動物照明15~20 Lx;晝夜明暗交替時間12/12或10/14;氨濃度≤14 mg/m3;噪音≤60 dB(A),沉降菌最大平均濃度cfu/0.5h 90 mm平皿:0~3。每日清理衛生,清理干凈后,用消毒液擦地。
2.2 設備管理
每周更換初效空氣過濾介質一次,每月更換中效空氣過濾介質一次。大風或揚塵天氣增加更換次數。高效空氣過濾器每年更換一次。定期檢修、保養空調、高壓鍋、送排風機等設備,并做詳細記錄。確保其正常運行。
3.1 實驗工作人員工作制度:實驗前要熟悉實驗室的各項規章制度,嚴格遵守各項制度,單行路線不許逆行。①非飼養人員嚴禁進入飼養區,飼養員嚴禁進入其他飼養區以防交叉感染設施,認真填寫人員飼養及實驗的進出記錄。②人員的進出:非工作人員不得進入,工作人員在進入飼養室要嚴格按照規章制度辦,進入屏障環境后應遵循清潔走廊—飼養間—污物走廊—更衣、換鞋—外界單向流動的原則。出屏障環境后再次檢查后方可離開。③物品的進出:進入屏障環境后應遵循飼養間—污物走廊—洗刷間—外界單向流動的原則。物品的存放時間不超過1周。④動物的進出:新引進的動物應遵循檢疫室—傳遞窗—清潔走廊—飼養間污物走廊—洗刷間—外界單向流動的原則。⑤飼養人員每天詳細記錄環境參數,以確保動物的最適宜環境。還要詳細記錄實驗觀察結果。
3.2 動物及飼料的采購制度
動物的采購由實驗人員提出購買申請,由動物實驗室購入合格的動物。動物購回后,由管理人員和實驗人員共同驗收,初步鑒定實驗動物質量。剛購入的動物要單獨飼養,適應環境后才能進行實驗。
飼料質量是實驗動物正常生長繁殖的重要環節。飼料要好的衛生質量,應飼喂全價營養顆粒飼料。飼料的營養成分應符合營養需求標準,并保持相對穩定。飼料在飼喂前要消毒滅菌,一般采用高溫高壓或6oCo照射。定期購入飼料,保管期不能太長。長期實驗要從購買動物的單位購入相同的飼料,并對其進行驗收,記錄備案。
3.3 動物飲水及墊料、籠具管理的制度
①飲水:小鼠的水代謝很快,應保證足夠的飲水。飲水標準應不低于城市生活飲水的衛生標準,動物的飲水應達到無菌的要求,也可用鹽酸將水酸化(pH值2.5~3.0)。②墊料及籠具:墊料是小鼠的鋪墊物起吸濕(尿)、保暖、被窩的作用[6]。因此墊料的材質應符合動物的健康和福利要求,選用具有良好的吸濕性、塵埃少、無異味、無毒性、無油脂的材料,墊料必須經高溫高壓滅菌處理。首選玉米秸稈,其次選擇非松木刨花。
籠具:現在我國普遍采用無毒塑料鼠盒,不銹鋼絲籠蓋、金屬籠架。對籠具消毒常用0.2%過氧乙酸。
4.1 軟件管理:要制定一套完整的規章制度及操作規程,并嚴格執行。
4.2 飼喂:小鼠屬于雜食性動物,胃容量小,有隨時采食的習性,是多餐習性的動物。夜間更為活躍,采取“少量勤添”的原則,成年小鼠每天的采食量為3~7 g。應每星期添料3~4次,在鼠籠的料斗內應經常有足夠量的飼料。
4.3 給水:飲用水應保證連續不斷,每周換水3~4次(最好是每天更換新鮮水);飲水設備采用專用飲水瓶。成年鼠每日飲水量一般為4~8 mL,要保證飲水的連續不斷,注意飲水瓶嘴是否有氣泡、不出水或漏水的現象;每次換水要連同水瓶和瓶嘴一起換下;并認真清洗水瓶和瓶嘴,然后消毒,嚴禁未經消毒的水瓶和瓶嘴繼續使用。避免在飲水瓶中反復添加飲水使用。
4.4 墊料及籠具更換:更換墊料及鼠盒的時間要根據籠內動物的數量、環境的濕度而定,一般每周更換墊料和清洗鼠籠1~2次,如遇飲水瓶滲漏應及時更換墊料及鼠盒,換出的鼠盒及時清洗,并用消毒液浸泡消毒,晾干后方可使用;墊料及時清理,并作無害化處理。
4.5 一般的體外健康檢查:每日要注意觀察動物,發現異常或死亡,及時向相關人員報告,然后再做出相應的處理。體外檢查包括以下內容:生活習性的觀察、身體狀態的觀察、精神及反應性觀察、皮膚及被毛觀察、飲食及飲食行為觀察、糞尿觀察、天然孔及分泌物、可視黏膜觀察、生長發育觀察。
4.6 衛生管理:飼料、籠具、墊料使用前必須消毒管理。動物室用具專用。工作服、口罩、拖鞋1周消毒清洗一次。認真搞好室內衛生消毒工作。每天要保持地面清潔,每周至少要用消毒水擦拭地面一次。每次換籠盒過程中要用消毒水擦拭籠架一次,墻壁用消毒水噴霧消毒一次。每周要對飼養間外的公共部分用紫外燈照射或消毒水噴霧2~3次。
4.7 記錄:有詳細的飼養觀察記錄,認真做好各項記錄工作,記錄工作一般包括近交譜系圖、品系記錄、個體記錄、繁殖記錄、環境記錄(溫度、濕度、天氣情況、設施運行狀況等)及工作日記、保證記錄資料的系統和完整。
5.1 小鼠膽小,易于受驚,對外界環境的改變反應敏感。在飼育間的一切工作均應輕柔,抓取動物不得粗暴,抓小鼠尾部,然后輕輕提起放到預定的位置。整個過程要做到準、輕、快。
5.2 將工作中或其他情況下逃離的動物淘汰,不得再放回籠內,掉在地上的飼料一律丟棄。嚴禁閑雜人員進入飼料間,飼料間一般謝絕參觀。
5.3 雄鼠喜斗毆:小鼠群體中性在成熟的雄鼠放在一起易發生斗毆,在雄性小鼠合籠時應注意。
5.4 要注意飼養密度:小鼠生長發育的快慢與品系,營養狀況、健康狀況、環境條件、母鼠哺乳只數和哺乳能力以及生產胎次均有密切關系。在飼養間嚴禁吐痰、大聲喧嘩、吸煙、進食和飲水。
5.5 對外來的動物要隔離,只有隔離觀察期滿且認定為合格后,才能進入飼養間飼養。不同品種、品系的小鼠不得混合飼養。
5.6 所有動物尸體要進行無害化管理。
從18世紀以來,小鼠開始成為實驗動物開始,人們對小鼠的飼養環境不斷進行改善,爭取做得更好,達到實驗的要求,確保實驗結果的準確,保證實驗工作人員安全和身體健康。有了清潔級動物飼養管理的經驗基礎,將有利于實現實驗動物的檢驗工作。
[1] 劉軍須,徐增年.實驗動物管理與使用[M].石家莊:河北科學技術出版社,2008.
[2] 王莉,劉軍須,王瑜,等.清潔小鼠科學飼養管理措施探討[J].醫學動物預防,2010,26(7):605-607.
[3] 陳主初,吳端生.實驗動物學[M].長沙:湖南科學技術出版社,2001.
[4] 中華人民共和國國家標準.實驗動物環境及設施.CB14925-2010[S].國家質量監督檢驗檢疫總局,2011.
[5] 付金鳳,丁芬.淺淡實驗動物小白鼠的飼養與管理[J].黑龍江醫藥,2011,24(5):766-769.
R-332
C
1671-8194(2014)18-0398-02