TGF-β3、FN在絕經(jīng)后子宮肌瘤及肌壁組織中的表達及意義

申彩云 吳 蕾

(武警新疆總隊醫(yī)院婦產(chǎn)科,新疆 烏魯木齊 830091)

絕經(jīng)后婦女子宮肌瘤臨床治療中，常采用促性腺激素釋放激素類似物(GnRHa)，使得子宮肌瘤萎縮、變小；也有患者在進行激素類似物治療后出現(xiàn)肌瘤持續(xù)增長，并表現(xiàn)出臨床癥狀，具體原因仍難以準確解釋。有相關研究表明〔1〕，子宮肌瘤若存在于婦女絕經(jīng)前，則體內(nèi)多種生長因子，如轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β3、纖維連接蛋白(FN)均對子宮肌瘤產(chǎn)生重要作用，在TGF等作用下，肌細胞出現(xiàn)異常增殖，細胞外基質(zhì)也發(fā)生聚集，兩種因素共同作用，使得子宮肌瘤出現(xiàn)明顯增長；在細胞外基質(zhì)中，存在FN這類重要因子，其可以促進體內(nèi)多種腫瘤增殖。現(xiàn)階段，子宮肌瘤萎縮與婦女絕經(jīng)期后與子宮肌瘤內(nèi)多種因子如TGF-β3、FN表達水平與二者聯(lián)系的意義研究較少〔2〕。本文旨在探究非萎縮性與萎縮性子宮肌瘤中TGF-β3、FN的表達及其意義。

1 資料與方法

1.1臨床資料 選擇2010～2012年到本院就醫(yī)的絕經(jīng)后子宮肌瘤患者100例，年齡45～80歲，平均(53±2.1)歲。將研究對象按照是否出現(xiàn)萎縮性子宮肌瘤為標準分為兩組，非萎縮組64例，其分組標準〔3〕為絕經(jīng)前患者無子宮肌瘤或是子宮肌瘤體積較小，隨絕經(jīng)期結(jié)束，肌瘤持續(xù)增大，并無萎縮狀態(tài)，臨床癥狀逐漸明顯，后臨床觀察、影像學檢測確診為子宮肌瘤，作為手術指征；萎縮組36例，分組標準〔4〕為子宮肌瘤在絕經(jīng)前出現(xiàn)，但絕經(jīng)后肌瘤體積變小萎縮，臨床表現(xiàn)并不明顯，常在單純性卵巢囊腫、子宮脫垂或是盆腔炎癥等手術過程中發(fā)現(xiàn)，并最終切除。兩組患者均已絕經(jīng)1年或1年以上，且手術前并未服用激素類藥物等，由影像學檢查以及病理生理學確診為子宮肌瘤，對納入本次研究知情同意，排除嚴重肝腎疾病、肺部感染、精神疾病。

1.2TGF-β3及FN檢測及結(jié)果判定 運用免疫組化(SP)法，采用TGF-β3及FN一抗和免疫組化SP試劑盒對其進行檢測，具體操作方式〔5〕：將采集到的子宮肌瘤樣本做成蠟塊，并存檔；將標本進行連續(xù)切片，得到4 μm厚組織數(shù)張，作為備用材料，SP法取其中兩張進行染色。在本次實驗全過程，陽性對照選用已經(jīng)測定為陽性的切片，胎盤組織切片作為TGF-β3陽性對照切片，正常腎組織作為FN對照，陰性對照選擇PBC作為一抗代替品。TGF-β3、FN的半定量定性評分是采用免疫反應評分來測定其表達水平。切片觀察陽性結(jié)果表現(xiàn)是細胞質(zhì)、細胞膜以及細胞間質(zhì)中存在棕黃色顆粒，其中細胞質(zhì)中主要是TGF-β3表達；細胞內(nèi)以及細胞外基質(zhì)內(nèi)主要是FN表達。觀察結(jié)果評判依據(jù)主要是著色面積以及著色反應強度二者相結(jié)合，每張切片陽性強度按無著色、淡黃色、棕黃色和棕褐色分別計 0、1、2、3分，陽性著色面積按無著色、著色面積<25%、25%～50%、51%～75%、>75%分別計0、1、2、3、4 分，兩項評分之積作為最終結(jié)果。TGF-β3、FN表達量通過評分積表現(xiàn)。

1.3統(tǒng)計學方法 應用SPSS18.0軟件進行分析，計數(shù)資料用χ2表示，兩組間比較用t檢驗。

2 結(jié) 果

2.1兩組 TGF-β3 表達情況 在本次研究中，兩組研究對象生長因子檢測中，在肌瘤以及肌層壁中均有TGF-β3表達，胞質(zhì)著色明顯。非萎縮組TGF-β3 相對表達量比較中，子宮肌瘤中(3.68±1.94)明顯高于肌壁(2.25±1.48)(P<0.05)；萎縮組TGF-β3相對表達量中，子宮肌瘤中為2.91±1.91，肌壁組織為1.83±1.10(P>0.05)。在組間比較中，萎縮組TGF-β3相對表達量評分均大于非萎縮組，但無統(tǒng)計學差異(P>0.05)。

2.2兩組FN表達情況 FN陽性大多來自于所有觀察標本的細胞間質(zhì)部分，陽性表現(xiàn)主要是以棕褐色或淡黃色為主，形態(tài)主要是呈網(wǎng)狀或線狀分布，此外，F(xiàn)N也可在少數(shù)細胞內(nèi)部表達。非萎縮組FN相對表達量比較中，子宮肌瘤中(5.31±2.93)明顯高于肌壁(3.94±2.13)(P<0.05)；萎縮組FN相對表達量中，子宮肌瘤中為4.86±2.43，肌壁組織為4.46±2.67(P>0.05)。在組間比較中，萎縮壓組FN 相對表達量評分均大于非萎縮組，但無統(tǒng)計學意義(P>0.05)。

3 討 論

作為一種多肽類生長因子，TGF-β呈現(xiàn)一種多效性特點，且人體內(nèi)多數(shù)細胞內(nèi)存在轉(zhuǎn)換生長因子受體，幾乎所有細胞都可以產(chǎn)生TGF-β。其主要存在五種同工型，包括TGF-β1～TGF-β5，生殖系統(tǒng)內(nèi)主要表達的TGF-β亞型主要是產(chǎn)生于間充質(zhì)細胞的TGF-β3。TGF-β3主要表現(xiàn)的生物學功能有組織細胞的創(chuàng)傷修復、細胞增殖、分化、凋亡和遷移的生物調(diào)節(jié)、促進血管化進程、對免疫反應進行誘導、腫瘤相關疾病也與TGF-β3有關〔6〕，其中最主要生物學功能是促進細胞外基質(zhì)形成。現(xiàn)階段，針對TGF-β3的研究大多主要集中于其與婦女絕經(jīng)期前發(fā)生子宮肌瘤間的相關性，有相關研究結(jié)果顯示在婦女絕經(jīng)前，TGF-β3在子宮肌瘤腫瘤組織與正常平滑肌壁組織中表達水平比較中，前者內(nèi)TGF-β3水平遠高于后者。TGF-β3〔7〕發(fā)揮生物學作用的方式主要是通過旁分泌以及自分泌形式對正常子宮肌細胞增殖進行有效抑制，對于其肌瘤細胞增殖起重要推動作用，細胞外基質(zhì)的重要組成膠原蛋白也相應增加，此外FN、蛋白聚糖表達水平也升高。

本研究結(jié)果可知，子宮肌瘤可在絕經(jīng)后持續(xù)增長的重要原因之一很可能在于TGF-β3的作用。此外，還有相關研究表明〔8〕，采用GnRHa治療方式，可以顯著控制和縮小子宮肌瘤體積，在進行體內(nèi)TGF- β3水平檢測時，發(fā)現(xiàn)治療組內(nèi)TGF-β3表達水平明顯低于未治療組，據(jù)此可以猜測與GnRHa有關，GnRHa可以顯著提升血雌激素和孕激素水平，恢復到絕經(jīng)前水平，從而影響TGF-β3分泌。

FN作為一種大分子非膠原糖蛋白，主要分布于軟組織基質(zhì)、多數(shù)基膜以及全身體液，尤以血液內(nèi)較為廣泛，其中血漿細胞型FN，可分為可溶性、不可溶兩種類型，都是構(gòu)成細胞外基質(zhì)的重要組成，蛋白聚糖、膠原與細胞型FN等物質(zhì)是致密結(jié)構(gòu)的組成成分，還能對細胞外基質(zhì)形成以及創(chuàng)傷后修復起到重要重塑作用。在體內(nèi)大分子協(xié)助下，F(xiàn)N還可以對細胞骨架形成起到重要作用，此外還在細胞分化，甚至細胞的致癌性轉(zhuǎn)化方面發(fā)揮重要作用。有學者〔9〕研究發(fā)現(xiàn)，與瘢痕疙瘩形成類似，子宮肌瘤也通過細胞基質(zhì)蓄積以及紊亂結(jié)構(gòu)對腫瘤體積以及質(zhì)地造成影響，而FN正是參與肌瘤組織細胞基質(zhì)形成從而影響肌瘤生長過程；還有學者研究發(fā)現(xiàn)，F(xiàn)N細胞外基質(zhì)形成過程以及子宮肌瘤細胞功能中均有FN參與；絕經(jīng)前子宮肌瘤的一項研究結(jié)果表明〔10〕，在子宮肌瘤組織與正常子宮肌層中比較中，F(xiàn)N mRNA 表達量前者明顯高于后者。本研究表明FN表達水平提高對絕經(jīng)后子宮肌瘤增大有促進作用。

4 參考文獻

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