AMI大鼠Ghrelin的變化及人Ghrelin對其影響

韓 峰，田國忠，李梅秀

(佳木斯大學,黑龍江 佳木斯 154007)

急性心力衰竭(acute heart failure，AHF)是一種嚴重、復雜而常見的臨床綜合征，然而其發病機制尚未闡明，更缺乏有效干預措施；AMI是近年來誘發AHF的主要心血管疾病以及死因[1]，特別是其發病率呈現年輕化的趨勢。不僅嚴重危害人類健康，而且帶來極大的社會負面影響，是醫學界亟待攻克的難題[1]。 生長激素釋放肽(growth hormone -releasing peptides，GHRPs)是70年代合成的一族可以強烈刺激生長激素(growth hormone，GH)釋放的寡肽，同時，又通過其廣泛分布的G-蛋白偶聯受體發揮獨立于生長素軸以外的多種生物活性，特別是其心血管保護效應倍受心力衰竭(heart failure, HF)生物學治療時代的廣泛關注，與合成的非肽類及人與哺乳動物體內具有的內源性28個氨基酸的同類物質被合稱為生長激素促分泌素(GHSs)，而天然Ghrelin正是GHSR的內源性配基[2，3]。本實驗通過研究導致AHF的AMI模型大鼠循環水平Ghrelin的變化及人Ghrelin對其影響，為揭示GHSR介導的心血管保護效應增添新資料。

1 材料與方法

1.1 實驗動物及分組

足3月齡清潔健康成年Wistar 雄性大鼠，60只，體重(300±50)g，購于哈爾濱醫科大學附屬第二醫院動物實驗中心 (許可證號：黑動字第80050-9)。實驗共分成5組：首先隨機抽取6只作為正常對照組、7只用于假手術組、其余均用于AMI模型組制作，合格模型再分成AMI模型組、AMI模型+Ghrelin組及AMI模型+[D-Lys3]-GHRP-6(GHSR阻滯劑)組，每組保證6～8只大鼠。

1.2 主要試劑及藥品

人Ghrelin購于PROSPEC -TANY生物技術有限公司(以色列)，GHSR阻滯劑D-Lys3-GHRP-6購于TOCRIS公司(美國)，大鼠Ghrelin ELISA 試劑盒購于上海朗頓生物科技有限公司，其余藥品均為國產分析純。

1.3 實驗方法

采用結扎大鼠冠狀動脈前降支方法制作AMI模型[4]，術前、術后以多道生理儀系統直接觀測心電、超聲復核AMI模型制作結果及AHF病程進展。AMI模型+人Ghrelin組及AMI模型+[D-Lys3]-GHRP-6組于術后15min內分別經大鼠尾靜脈一次注射人Ghrelin 25μg/kg或[D-Lys3]-GHRP-6 65μg/kg；其余各組都給予等體積生理鹽水尾靜脈注射。術后24h取大鼠內眥靜脈血離心后，用ELISA方法檢測大鼠血漿Ghrelin水平。使用大鼠Ghrelin ELISA試劑盒，嚴格按照說明書操作，酶標儀Gene5系統測得各組分吸光度OD值，計算所測各組大鼠血漿中Ghrelin含量水平。

1.4 統計學處理

2 結果

ELISA檢測大鼠血液組織Ghrelin水平結果，見表1。與正常組大鼠比較，其余4組大鼠血漿的Ghrelin水平均升高，但假手術組與正常組比較無統計學意義；以GHSR阻滯劑組最高(P<0.01)，人Ghrelin干預組比模型組低(P<0.05)。

表1 各組大鼠血漿所含Ghrelin ELISA檢測OD值及含量水平

*與正常對照組比較P<0.01；**與模型組比較P<0.05。

3 討論

隨著社會經濟生活的節奏日益加快，AHF發病率呈現急轉之上的趨勢，而AMI這一重要病因使得AHF的有效治療措施明顯匱乏，AMI乃至AHF這兩個因果病理過程的發生發展機制亦有待于進一步明確。因此，近年來醫學工作者正將AHF生物學治療納入攻關課題的中心，在這種形勢下，具有心血管保護效應的GHRPs成為新的遴選藥物Ghrelin的發現[3，5]使GHRPs發揮HF治療作用更加具有可行性，外源性的GHRPs與內源性天然Ghrelin在AMI、AHF病理進程中的變化規律有待追蹤。本研究結果顯示，AMI術后24h大鼠Ghrelin明顯升高，不能用其心臟保護效應解釋，是源于應激性升高抑或是保護性代償，此內在的機制有待于進一步研究數據闡明；人Ghrelin抑制其升高，此時給予的干預是起到了治療作用還是有害效果尚不能定論；GHSR阻滯劑卻增加這種升高趨勢，這從相反方面給我們出了新的解釋GHSR介導的GHRPs心血管效應提示[6，7]。

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