肝再生過程中膽汁酸對FXR的影響

晁祥嵩，國麟祺，丁 隆

(佳木斯大學附屬第一醫院，黑龍江 佳木斯 154003)

研究表明，小窩蛋白可通過脂類代謝促進肝臟的再生，而法尼酯衍生物受體FXR是一種膽汁酸受體，在膽汁酸代謝和膽固醇代謝中發揮重要作用，并有望成為降低膽固醇，治療某些心血管病及肝疾病的治療靶點。基于此，設計該實驗研究證實膽汁酸能夠通過對FXR的影響進而影響到肝再生的進程。FXR的起初的命名是由于其可以被生理水平的高濃度法尼酯激活，在1999年國外的3個獨立研究小組同時證實FXR的內源性配體是膽汁酸，至此，FXR被稱做膽汁酸受體而被廣泛深入研究。

1 材料與方法

1.1 材料

清潔級SD大鼠60只，雄性，6周齡，體重(160±18)g，分別從301醫院動物實驗中心購買。

1.2 動物模型建立及分組

大鼠模型建立在文獻所述方法的的基礎上，隨機將60只大鼠建立30%(A),50%(B),70%(C)大鼠肝切除模型，分別給予葡萄糖喂養(1組)及膽汁酸(2組)喂養，每組10只，分為6個實驗組，分別標記為A1，A2，B1，B2，C1，C2，在喂養之后的24h、48h以及72h等時間點進行相應的數據監測和記錄，并且根據數據的變化做好細致的比較。

1.3 標本采集

A1，B1，C1進行葡萄糖喂養，A2，B2，C2進行膽汁酸喂養，分別于24h，48h及72h進行實驗檢測，(1)通過測肝臟/體重比率來測定并比較上述6組大鼠的肝再生率；利用Child公式計算確定肝再生率，即(尸檢時的肝重量-手術時預計的殘肝重量)/切肝的肝重量×100%。(2)用western blotting技術檢測并比較各組大鼠的肝組織內FXR蛋白表達水平。

1.4 統計學處理

2 結果

2.1 各組大鼠肝再生率的比較

1組的大鼠肝再生率在各個時間點均顯著低于2組，記錄為：見表1。

其次，進行的是組內比較：通過比較發現，兩組內不同亞組的大鼠肝再生率均為A1>B1>C1和A2>B2>C2(P值均<0.05)。見表2、圖1。

表1 各組大鼠肝再生率的比較

表2 各組大鼠肝再生率的比較

圖1 各組大鼠肝再生率的比較

檢測FXR的表達變化，了解各個時期FXR表達變化的規律。通過實驗發現，首先，進行的是組內對比，兩組相比明顯可以發現，A組在不同時間點的FXR表達明顯低于B組，記錄，見表3。

其次，進行的是組內比較：通過比較發現，兩組內不同亞組的大鼠血清內膽酸存在差異，大鼠血清內膽酸在各個時間點的表現均為A1>B1>C1和A2>B2>C2(P值均<0.05)。見表4、圖2。

表3 各組大鼠肝組織內FXR蛋白水平的比較

表4 各組大鼠肝組織內FXR蛋白水平的比較

圖2 各組大鼠肝組織內FXR蛋白水平的比較

3 討論

物質代謝是細胞再生的根本，肝再生是細胞活化、脂肪代謝和細胞分裂三者協調作用的結果,早期的研究證實，FXR屬于核受體超家族的一員，可被內源性配體膽汁酸激活，在膽汁酸、糖和脂代謝中具有重要的作用，通過對本實驗數據的分析可見，膽汁酸通過對FXR的激活，進而起到促進肝再生的作用，隨著FXR及其相關通路的深入研究，FXR已從最初調節代謝延伸到可以調節細胞代謝甚至與惡性腫瘤的生長有所關聯，人們對其在肝再生過程中所起的重要作用愈加重視，可以認為，FXR是人體細胞的重要保護者，期待隨著研究FXR在肝再生過程中的作用及機制被進一步發現，可以為我們在肝臟手術、肝移植術及肝癌形成的復雜機制提供提供指導。

[1]Forman BM, Goode E, Chen J, et al.Identification of a nuclear receptor that is activated by farnesol metabolites[J].Cell, 1995, 81：687-693

[2]Parks DJ，Blanchard SG，Bledsoe PK，et al.Bile acids：natural ligands for an orphan nuclear receptor[J].Science，1999，284(5418)：1365-1368

[3]Makishima M，Okamoto AY，Repa JJ，et al.Identification of a nuclear receptor for bile acid[J].Science，1999，284(5418)：1362-1365

[4]Wang H，Chen J，Hollister K，et al.Endogenous bile acids are ligands for the nuclear receptor FXR/BAR[J].Mol Cell，1999，3(5)：534-553

[5]湯朝輝,周露婷,謝志芳,等.利用分葉順次肝切除術建立小鼠肝臟大部切除后再生模型[J].第二軍醫大學學報，2009,30(5)：524-526