迪瑞H800尿液分析儀及FUS-200全自動尿有形成分分析儀復(fù)檢規(guī)則的驗證與結(jié)果分析

楊曉平，王健，孫燕，楊英超

(中國人民解放軍第一零七醫(yī)院檢驗科，山東煙臺264000)

迪瑞H800尿液分析儀及FUS-200全自動尿有形成分分析儀復(fù)檢規(guī)則的驗證與結(jié)果分析

楊曉平，王健，孫燕，楊英超

(中國人民解放軍第一零七醫(yī)院檢驗科，山東煙臺264000)

復(fù)檢規(guī)則；圖像分析；顯微鏡檢查；假陽性分析

近年來，自動化尿液檢測技術(shù)不斷更新，部分全自動尿有形成分分析儀具備了顯微成像分析功能，迪瑞FUS-200全自動尿有形成分分析儀即采用流動式顯微成像系統(tǒng)，在一定時間內(nèi)對每個標本拍攝650幅含有形成份的圖像，通過自動有形成分識別軟件進行分類，并將圖像上傳電腦，給操作者提供直觀的分析，這在一定程度上可減少顯微鏡鏡檢的工作量，提高工作效率。根據(jù)CNASCL41的要求，使用自動化儀器做有形成分篩查，假陽性應(yīng)小于5%，我們參考相關(guān)文獻[1]中推薦的三項規(guī)則聯(lián)合方法，對FUS-200尿有形成分分析儀的性能進行驗證，并結(jié)合圖像，分析假陽性的干擾因素。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑迪瑞H-800尿液分析儀及配套試劑，迪瑞FUS-200全自動尿有形成分分析儀及配套試劑，尿液分析儀省、全國衛(wèi)生部室間質(zhì)評均為合格，尿有形成分分析儀參照相關(guān)文獻[2]提供的方法進行了批內(nèi)、批間精密度CV值、攜帶污染率、準確度的驗證，均符合儀器要求范圍。

1.2 標本和步驟每日對迪瑞H-800尿液分析儀、迪瑞FUS-200全自動尿有形成分分析儀進行室內(nèi)質(zhì)控，質(zhì)控合格后進行尿液標本測定。取連續(xù)6日的病房及門診尿液共1200例，同時做尿干化學，尿沉渣分析和并根據(jù)鏡檢規(guī)則由經(jīng)驗豐富的檢驗人員進行圖像分析及顯微鏡鏡檢。

1.3 鏡檢規(guī)則參照相關(guān)文獻中的尿干化學聯(lián)合尿沉渣鏡檢規(guī)則，符合以下三種規(guī)則中任何一項，即進行顯微鏡鏡檢，見表1。

表1 H-800尿液分析儀聯(lián)合FUS-200全自動尿有形成分分析儀鏡檢規(guī)則

1.4 顯微鏡鏡檢陽性標準RBC＞3個/HP,WBC＞5個/HP,CAST＞1個/LP為鏡檢陽性；RBC＜3個/HP, WBC＜5個/HP,CAST＜1個/L為鏡檢陰性。圖像分析標準：分別檢查RBC、WBC、病理管型、透明管型等項目的采集圖像，并與顯微鏡鏡檢結(jié)果比較是否一致。

1.5 統(tǒng)計方法采用統(tǒng)計學四表格，設(shè)真陽性為a,假陽性為b,假陰性為c,真陰性為d，分別統(tǒng)計真陽性率、假陽性率、假陰性率、真陰性率。

2 結(jié)果

2.1 規(guī)則驗證根據(jù)表1中的鏡檢規(guī)則，本試驗共檢測1200例尿標本，以顯微鏡鏡檢為標準，真陽性率為95.88%，假陽性率為56.70%，假陰性率為4.12%，真陰性率為43.3%。其中，假陰性率＜5%,符合中國合格評定國家認可委員會CNAS-CL41的標準，因此，此規(guī)則可做為本實驗室的鏡檢規(guī)則。

2.2 假陽性比例本試驗中假陽性標本共529例，其中RBC假陽性257例，占48.6%；管型假陽性197例，占37.2%，WBC假陽性75例，占14.2%。RBC假陽性比例最高，管型假陽性次之，WBC假陽性比例較低。

2.3 假陽性結(jié)果分析分析529例RBC、WBC、和管型(透明管型和病理管型)假陽性標本的圖像，對干擾圖像分析的有形成分進行分類，可明確辯認的有形成分圖像經(jīng)與顯微鏡比對一致后列入RBC、WBC、管型假陽性形成的干擾因素(真菌、結(jié)晶、WBC、RBC、黏液絲、上皮細胞、滴蟲)的統(tǒng)計數(shù)據(jù)中進行統(tǒng)計，圖像不易辨認和與顯微鏡鏡檢不一致的列入不易辯認數(shù)據(jù)中統(tǒng)計。見表2。

表2 529例假陽性標本的干擾因素分析結(jié)果[n(%)]

2.3.1 RBC假陽性標本中，干擾圖像分析的因素有真菌、結(jié)晶和WBC。圖像分析系統(tǒng)把這幾種有形成分錯誤地分類到RBC中，導(dǎo)致RBC假陽性的產(chǎn)生。其中結(jié)晶所占比例最高，為58.7%，且多為小信封狀和啞鈴形的草酸鈣結(jié)晶；其次為WBC，占17.9%，當尿標本中同時有WBC和RBC存在時，應(yīng)特別注意兩者是否有互相干擾；真菌也是RBC假陽性形成的干擾因素，當圖像分析同時提示真菌存在時，應(yīng)特別注意是否對RBC分析形成干擾。在RBC假陽性圖像的分析中有11.7%不易辨認，主要是非晶形尿酸鹽及磷酸鹽、真菌、WBC、RBC、草酸鈣結(jié)晶等的混合物，此類需要進行顯微鏡鏡檢來辨認。

2.3.2 管型假陽性標本中，不論是病理管型還是透明管型，其干擾成份主要為黏液絲，占61.5%，其次是上皮細胞占15.2%，結(jié)晶占8.1%，應(yīng)注意的是當黏液絲和一些非晶形尿酸鹽或磷酸鹽同時存在時，小顆粒的結(jié)晶黏附在黏液絲上，常常會使儀器錯誤地分析成病理管型。

2.3.3 WBC假陽性標本中，RBC和結(jié)晶分別占41.3%和38.7%，結(jié)晶多為草酸鈣結(jié)晶，RBC多為腫脹或成團的RBC。此外還有少量滴蟲的干擾，占1.3%,因滴蟲體積大小和白細胞相仿，分析儀常錯誤地把滴蟲分析成WBC，造成WBC的假陽性而導(dǎo)致滴蟲的漏診。

2.4 假陰性分析本次試驗還有11例假陰性標本，其中RBC假陰性10例，經(jīng)顯微鏡鏡檢觀察，形態(tài)表現(xiàn)為小紅細胞、影紅細胞，出芽的紅細胞等，此類細胞可能因為體積小、血紅蛋白的溢出等導(dǎo)致紅細胞形態(tài)明顯變化而造成了儀器的漏檢。還有1例為管型的假陰性，考慮可能為管型數(shù)量較少導(dǎo)致的儀器分析漏診。

3 討論

近年來，隨著尿液檢測技術(shù)的不斷更新，全自動尿液干化學分析儀聯(lián)合尿有形成分分析儀已廣泛應(yīng)用于臨床，在很大程度上提高了尿液標本的檢測速度。其中尿干化學分析技術(shù)早已成熟。尿有形成份分析儀采用的測試原理為流式圖像法：經(jīng)流式技術(shù)處理獲得的單層尿液，經(jīng)顯微鏡放大后通過CCD拍照獲得圖像，然后有形成分被人工智能軟件單個識別后分類與計數(shù)。分類方法采用人工智能識別技術(shù)：拍到的每個視野中的有形成分，被單獨的分割開來，自動有形成分識別軟件可迅速地將有形成分粒子圖像的特征信息提取出來，并根據(jù)形態(tài)、紋理、統(tǒng)計、頻域等相關(guān)特征把有形成分識別分類計數(shù)。共可識別紅細胞、白細胞、鱗狀上皮細胞、非鱗狀上皮細胞、透明管型、病理管型、黏液絲、細菌、酵母菌、白細胞團、精子、結(jié)晶等共12類有形成份。但是目前此種檢測方法仍然不能完全代替顯微鏡鏡檢，各實驗室需制定適合于本實驗室的圖像復(fù)檢和顯微鏡鏡檢規(guī)則。如以單項目陽性作為鏡檢規(guī)則會具有較高的假陰性率，應(yīng)建立聯(lián)合鏡檢規(guī)則[3]，降低假陰性率。本實驗室參考相關(guān)文獻，選用三項規(guī)則聯(lián)合的方法，對1200例尿標本進行了檢測并對此規(guī)則進行驗證，假陽性率<5%,符合CNAS-CL41[4]的要求，可以此作為本實驗室的鏡檢規(guī)則。但本試驗中假陽性率高達56.70%，如全部進行顯微鏡鏡檢，將明顯增加工作量，降低工作效率，因此，本實驗對529例假陽性標本進行了分析后發(fā)現(xiàn)：通過圖像分析排除大部分假陽性后，RBC、管型、WBC假陽性需進行顯微鏡鏡檢的比例可分別降低至11.7%、15.2%、18.7%，且圖像分析方法簡單易行，速度明顯高于顯微鏡鏡檢，可提高工作效率。

值得注意的是雖然本試驗采用的鏡檢規(guī)則中假陰性率符合CNAS-CL41的標準，但假陰性給臨床帶來的隱患卻不容忽視，如何避免假陰性的發(fā)生，需要臨床經(jīng)驗豐富的檢驗人員結(jié)合病人的臨床表現(xiàn)和其它檢驗結(jié)果，來規(guī)避此類差錯的發(fā)生。

[1]徐群飛,魏丹丹,張世錕,等.尿液干化學和尿有形成分分析顯微鏡復(fù)檢規(guī)則的建立與驗證[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2013,31(4):311-313.

[2]何巍巍,梁曉君,潘斌,等.Sysmex UF-1000i全自動尿沉渣分析儀的性能評價分析[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2013,31(4):405-407.

[3]王蕾.三種方法聯(lián)合檢測尿液有形成分的比較和評價[J].實驗與檢驗醫(yī)學,2012,30(1):83-85.

[4]中國合格評定國家認可委員會.CNAS-CL41醫(yī)學實驗室質(zhì)量管理和能力認可準則在體液學檢驗領(lǐng)域的應(yīng)用說明[S].北京：2012.

R446.12+1

A

1674-1129(2014)04-0423-02

10.3969/j.issn.1674-1129.2014.04.019

2014-05-04；

2014-05-20)