原發性高血壓病患者血清轉化生長因子β1和凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體-1水平與血壓的相關性研究

孫志敏，郭力剛

近幾年來心腦血管疾病的發病率、致殘率日益增加，其已成為人類死亡的主要病因。原發性高血壓病為心腦血管疾病的重要危險因素，長期血壓升高除可引起心肌纖維化、心肌肥厚等心臟病理改變外，還可以引起動脈血管壁的增厚和硬化、僵硬度的增加以及順應性的降低[1-3]。轉化生長因子β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)是由單核細胞、內皮細胞和血管平滑肌細胞合成的公認的促纖維化細胞因子[4]。有關研究發現，高血壓患者的血清TGF-β1水平高于正常人群，且TGF-β1水平增高與高血壓靶器官的損害相關[5-6]。凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體-1(lectin-like oxidized low density lipoprotein receptor-1，LOX-1)是氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)的特異性受體，可結合OX-LDL，達到中和、降解OX-LDL的目的；并且其可介導內皮細胞活化、損傷和凋亡，使平滑肌細胞和巨噬細胞內脂質聚集，活化血小板，促進血栓形成。因此，血清中可溶性LOX-1(sLOX-1)水平與多種心血管疾病的進程有關[7]。LOX-1可能是高血壓的獨立危險因素，但其作用機制尚未完全明確[8]。本研究通過測定原發性高血壓病患者血清中TGF-β1、LOX-1水平的變化，探討兩者與高血壓的相關性。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2012年1—6月浙江省衢州市中心醫院門診初治的原發性高血壓病患者80例作為高血壓組。納入標準：(1)18周歲≤年齡<65周歲；(2)符合《2010年中國高血壓防治指南》中診斷分級標準[9]；(3)同意參加本研究并簽署知情同意書。排除標準：(1)繼發性高血壓患者；(2) 合并嚴重腦、心臟、肝臟、腎臟等疾病患者；(3)合并糖尿病、甲狀腺功能亢進等患者；(4) 合并惡性腫瘤、感染性疾病等患者；(3)有其他疾病不適于參加本研究的患者。另外按照年齡匹配原則選擇浙江省衢州市中心醫院同期接受體檢的健康者25例作為健康對照組。本研究經過浙江省衢州市中心醫院倫理委員會批準。高血壓組患者的性別構成、年齡、體質指數、血脂指標〔總膽固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)〕及血肌酐與健康對照組比較，差異均無統計學意義(P>0.05，見表1)。

1.2 方法 受試者清晨均常規測量血壓,包括收縮壓(systolic blood pressure，SBP)、舒張壓(diastolic blood pressure，DBP)，計算平均血壓(mean blood pressure，MBP)，并根據血壓水平對高血壓組患者進行分組：即SBP為140～159 mm Hg(1 mm Hg=0.133 kPa)和/或DBP為90～99 mm Hg為1級高血壓組，SBP為160～179 mm Hg和/或DBP為100～109 mm Hg為2級高血壓組，SBP≥180 mm Hg和/或DBP≥110 mm Hg 為3級高血壓組。若患者的SBP與DBP分屬不同的級別時，則以較高的分級為準。測量身高和體質量，計算體質指數。受試者均禁食12 h，并于次日清晨抽取肘靜脈血6 ml，分別置于2支分離膠管中，每管3 ml，3 000 r/min，離心5 min，離心半徑為20 cm，分離留取血清，其中1管用于血脂指標和血肌酐的測定；另外1管置于-70 ℃保存，用于測定血清TGF-β1、LOX-1水平。血脂指標和血肌酐的測定采用LX-20全自動生化分析儀(美國BECKMAN公司)；血清TGF-β1、LOX-1水平的測定采用酶聯免疫吸附法，TGF-β1試劑盒(上海西唐有限責任公司)和LOX-1試劑盒(上海銳聰科技發展有限公司)的板內、板間變異系數均<10%，操作均嚴格按照試劑盒說明書進行。

2 結果

2.1 高血壓組和健康對照組血壓及血清TGF-β1、LOX-1水平的比較 高血壓組患者的SBP、DBP、MBP及血清TGF-β1、LOX-1水平均高于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05，見表2)。

表1 高血壓組和健康對照組一般資料比較

注：*為χ2值；TC=總膽固醇，TG=三酰甘油，LDL-C=低密度脂蛋白膽固醇，HDL-C=高密度脂蛋白膽固醇

Table2 Comparison of the levels of blood pressure,TGF-β1and LOX-1 between hypertension group and control group

組別例數SBP(mmHg)DBP(mmHg)MBP(mmHg)TGF-β1(pg/ml)LOX-1(ng/ml)健康對照組25117±9 76±6 90±8 41328±367513254±1256高血壓組80171±11105±7127±854465±374551543±2387t值2195918379197871737260949P值00000000000000000000

注：SBP=收縮壓，DBP=舒張壓，MBP=平均血壓，TGF-β1=轉化生長因子β1，LOX-1=凝集素樣氧化低密度脂蛋白受體-1

2.2 不同血壓分級的高血壓患者血壓及血清TGF-β1、LOX-1水平的比較 高血壓組患者根據血壓水平分級：1級高血壓組24例，2級高血壓組27例，3級高血壓組29例。3組高血壓患者的SBP、DBP、MBP及血清TGF-β1、LOX-1水平比較，差異有統計學意義(P<0.05)。3級高血壓組患者的SBP、DBP、MBP及血清TGF-β1、LOX-1水平高于2級高血壓組，2級高血壓組患者的SBP、DBP、MBP及血清TGF-β1、LOX-1水平高于1級高血壓組，差異有統計學意義(P<0.05，見表3)。

Table3 Comparison of the levels of blood pressure,TGF-β1and LOX-1 in hypertensive patients with different stage

組別例數SBP(mmHg)DBP(mmHg)MBP(mmHg)TGF-β1(pg/ml)LOX-1(ng/ml)1級高血壓組24 154±8 94±4 114±6 48672±3143 32672±1785 2級高血壓組271704±9? 104±4? 126±7? 55469±3652? 49598±2369? 3級高血壓組291864±13?△116±6?△139±8?△58324±4128?△68972±2467?△F值667721131276348463161725165P值00000000000000000000

注：與1級高血壓組比較，*P<0.05；與2級高血壓組比較，△P<0.05

2.3 高血壓組患者血壓及血清TGF-β1、LOX-1水平的相關性分析 血清TGF-β1、LOX-1水平與SBP、DBP、MBP均呈正相關(P<0.05)；血清TGF-β1水平與血清LOX-1水平呈正相關(P<0.05)。

表4 高血壓組患者血壓及血清TGF-β1、LOX-1水平的相關性分析

Table4 Correlation between blood pressure and the levels of TGF-β1and LOX-1 in hypertensive patients

SBPr值 P值DBPr值 P值MBPr值 P值TGF-β1r值 P值TGF-β1067400010562000906140008--LOX-108250000065400030729000007100000

注：-不存在

3 討論

高血壓是一種以血流動力學改變為主要特征的全身血管性疾病，隨著人們生活水平的提高，高血壓的發病率日益增高，并且由此而導致的心腦血管疾病的發病率也越來越高[10]。但是到目前為止，高血壓的發病機制仍未完全明確。

TGF-β1是近年來發現的一種重要生長因子，屬于轉化生長因子-β超家族。TGF-β1是公認的促纖維化細胞因子，其以自分泌和旁分泌方式作用于成纖維細胞，誘導成纖維細胞表型改變，促進膠原、蛋白聚糖等細胞外間質(extracellular matrix，ECM)成分的合成[11-13]。TGF-β1由多種組織細胞合成，通過細胞表面的受體信號轉導途徑參與細胞增生、分化和代謝，對血管平滑肌細胞的增殖、成纖維細胞的增生、細胞外基質的沉積以及介導心血管疾病的發生起著重要作用[14]。本研究結果顯示，高血壓組患者血清TGF-β1水平高于健康對照組；不同血壓分級的高血壓患者血清TGF-β1水平明顯不同；3級高血壓組患者的血清TGF-β1水平高于2級高血壓組，2級高血壓組患者的血清TGF-β1水平高于1級高血壓組；并且血清TGF-β1水平與SBP、DBP、MBP呈正相關。提示TGF-β1在高血壓發生、發展過程中起重要作用，且隨著血壓升高血清TGF-β1水平升高。TGF-β1在原發性高血壓病發病中的作用與腎小球旁器腎素分泌增加對血管緊張素Ⅱ、血管內皮組織中內皮素表達的刺激有關[15]。此外，TGF-β1基因變異與高血壓及其靶器官損害的關系非常密切[16]。

目前關于LOX-1在高血脂和冠心病發生、發展過程中的作用報道較多，但是對于LOX-1在高血壓發病過程中的作用相關報道較少。LOX-1是分子量為50 kDa的Ⅱ型穿膜糖蛋白，由273個氨基酸組成，是首個被發現可以從細胞表面釋放的可溶性清道夫受體，血清LOX-1水平與受體的表達水平有關，反映了機體的疾病狀態。因此，血清LOX-1水平可預測多種心血管疾病的進程[17]。本研究結果顯示，高血壓組患者血清LOX-1水平高于健康對照組；3級高血壓組患者血清LOX-1水平高于2級高血壓組，2級高血壓組患者的血清LOX-1水平高于1級高血壓組；并且血清LOX-1水平與SBP、DBP、MBP呈正相關。提示LOX-1同樣在高血壓的發生、發展過程中起重要作用，且隨著血壓升高血清LOX-1水平升高。LOX-1對高血壓的影響可能與以下作用有關：(1) LOX-1表達增加可激活核因子-κB從細胞質進入細胞核，與靶基因的啟動子或增強子結合，誘導相關基因的表達，促進內皮細胞炎性改變和凋亡，從而導致血管內皮功能損傷等[18-19]；(2)OX-LDL可結合并激活LOX-1，可抑制血管舒張因子NO的合成和釋放，促進血管收縮因子內皮素的合成和釋放；(3)LOX-1通過腎素-血管緊張素-醛固酮系統(renin-angiotensin-aldosterone system，RAAS)在高血壓的發病中起重要作用[20]。此外，本研究結果還發現，高血壓患者血清TGF-β1水平與LOX-1水平呈正相關，但因本研究為臨床橫斷面研究，尚難確定二者間的因果關系，因此仍需設計合理、大樣本、長期隨訪的隊列研究來論證。

綜上所述，本研究顯示隨著血壓升高血清TGF-β1、LOX-1水平升高，血清TGF-β1水平與LOX-1水平的增高與高血壓患者血壓呈正相關，TGF-β1和LOX-1是高血壓的危險因素。因此，控制血清TGF-β1、LOX-1水平可能有利于降低高血壓患者的血壓水平，為高血壓的治療提供了參考依據。

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