三種不同方法檢測(cè)乙型肝炎表面抗原的臨床應(yīng)用及比較

宋 莉

達(dá)州市中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川達(dá)州 635000

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒(HBV)引起的一種世界性疾病，是一種嚴(yán)重危害人類的傳染性疾病[1]。在我國(guó)，乙型肝炎患者多，覆蓋面廣，且我國(guó)人口眾多，已經(jīng)成為世界上乙型肝炎攜帶者最多的國(guó)家。據(jù)分析顯示，健康人群中，攜帶乙型肝炎病毒的大約占到10%～15%[2]。所以，如何檢測(cè)乙型肝炎病毒就成為了至關(guān)重要的問題，目前，檢測(cè)方法主要有三種，時(shí)間分辨熒光分析法、酶聯(lián)免疫吸附法、膠體金法。本文通過探討三種檢測(cè)方法的不同效果，從而分析三種方法的優(yōu)劣和準(zhǔn)確性，為以后應(yīng)用更加科學(xué)的檢驗(yàn)方法提供依據(jù)。

1 對(duì)象與方法

1.1 研究對(duì)象

選擇我院自2012年1月—2012年11月期間住院收治的132例患者乙肝的血清作為標(biāo)本進(jìn)行分析，其中男74例，女58例，年齡31～78歲，平均年齡（48.46±5.96）歲。

1.2 研究方法

采用對(duì)照研究的方法，選取同期我院138例非乙肝患者作為對(duì)照組，其中男72例，女66例，年齡34～74歲，平均年齡（49.46±4.16）歲。132例乙肝患者作為觀察組，兩組患者的血清均采用時(shí)間分辨熒光分析法、酶聯(lián)免疫吸附法、膠體金法等三種方法進(jìn)行檢測(cè)，所有儀器及試劑的操作均按相應(yīng)的說明書及實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)程進(jìn)行，檢測(cè)完畢后記錄檢測(cè)結(jié)果，對(duì)比三種方法的監(jiān)測(cè)結(jié)果，探討其臨床應(yīng)用價(jià)值。

1.3 實(shí)驗(yàn)儀器與結(jié)果判定

時(shí)間分辨熒光免疫分析法檢測(cè)試劑為HBsAg 定量檢測(cè)試劑盒（上海新波生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)），儀器為SYM-810（上海新波生物技術(shù)有限公司提供），則根據(jù)試劑盒內(nèi)提供的不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)品制作標(biāo)準(zhǔn)曲線同時(shí)測(cè)定樣本濃度并記錄結(jié)果。

酶聯(lián)免疫吸附法檢測(cè)試劑為ELISA 法定性試劑盒（北京萬泰生物藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)），儀器為RT-6000 酶標(biāo)儀（深圳雷杜），則用酶標(biāo)儀進(jìn)行測(cè)定并記錄試驗(yàn)結(jié)果；

膠體金法采用由艾康生物技術(shù)（杭州）有限公司提供的試劑，參照說明書中判定方法并于實(shí)驗(yàn)后10～20min 內(nèi)判讀結(jié)果。其中，靈敏度＝實(shí)驗(yàn)組實(shí)際檢出陽性數(shù)／理論檢出陰性數(shù)；特異性＝對(duì)照組實(shí)際檢出陰性數(shù)／全部受檢的未患病者總數(shù)；假陰性率＝1－靈敏度；假陽性率＝1－特異性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS 17.0 為統(tǒng)計(jì)學(xué)分析軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析處理，計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義[3]。

2 結(jié)果

2.1 檢測(cè)結(jié)果

經(jīng)過檢測(cè)，三種檢測(cè)方法的準(zhǔn)確度由高到低分別為時(shí)間分辨熒光分析法＞酶聯(lián)免疫吸附法＞膠體金法。三組組見比較結(jié)果差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），具體檢出例數(shù)見表1。

表1 三種檢測(cè)方法檢測(cè)結(jié)果

2.2 靈敏度、特異性、假陽性及假陰性比較

三種方法的靈敏度與特異度為辨熒光分析法＞酶聯(lián)免疫吸附法＞膠體金法，三組組見比較結(jié)果有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P＜0.05），詳見表2。

表2 三種檢測(cè)方法的靈敏度、特異性、假陽性、假陰性（%）

3 討論

我國(guó)是HBV 感染的高發(fā)區(qū)，其傳染性強(qiáng)、傳播途徑多、流行面廣、發(fā)病率高[4]。其感染會(huì)導(dǎo)致血漿中出現(xiàn)特異性的乙型肝炎病毒表面抗原（HBsAg）及其他系列特性的血清標(biāo)志物[5]。因此，血清中檢出HBsAg 是乙型肝炎的早期診斷指標(biāo)之一。但由于試劑、儀器、方法學(xué)等存在差異，在HBV 感染初期，血漿中HBsAg 的濃度較低，不同方法在檢測(cè)結(jié)果方面存在差異，會(huì)造成一定程度的誤診或漏診，甚至引發(fā)一系列醫(yī)療糾紛[6]。

根據(jù)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行分析，三種方法均可達(dá)到檢驗(yàn)效果，但準(zhǔn)確度卻不大相同。膠體金法的特點(diǎn)是操作簡(jiǎn)單、成本低廉，采用高度特異性抗體抗原反應(yīng)及免疫層析分析技術(shù)，且檢測(cè)試劑穩(wěn)定，便于保存，且具有檢測(cè)速度快的特點(diǎn)[7]，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示此種方法準(zhǔn)確率較低，判定的誤差較大，故此種方法只可作為初步篩選的依據(jù)。酶聯(lián)免疫吸附法是目前我國(guó)應(yīng)用最普遍的檢測(cè)方法，敏感性高、特異性強(qiáng)，是適合與較大批量的血清的檢測(cè)方法[8]。國(guó)產(chǎn)酶聯(lián)免疫吸附法的試劑中檢測(cè)乙型肝炎表面抗原的最低檢出量是0.5ng/L，但是如果達(dá)到0.15ng/L，就會(huì)具有傳染性，而且當(dāng)血樣中HBsAg 濃度過高時(shí)，易引起鉤狀效應(yīng)，造成假陰性結(jié)果[9]。時(shí)間分辨熒光分析法是20 世紀(jì)80年代應(yīng)用于臨床的檢測(cè)技術(shù)，也是近年來新發(fā)展起來的一種檢測(cè)方法，該方法采用了電光學(xué)發(fā)光技術(shù)和磁性微珠包被等技術(shù)，具有更高的檢測(cè)性能，可精確地檢測(cè)出濃度低的HBsAg，大大的減少了檢測(cè)過程中可能出現(xiàn)的誤差。但該方法作為臨床上來講，成本較高，且儀器價(jià)格較貴，對(duì)實(shí)驗(yàn)室的硬件和檢測(cè)水平的要求大大提高了。

綜上所述，膠體金法檢測(cè)方便快捷，可滿足急診和床旁檢驗(yàn)的基本要求，但準(zhǔn)確度不高。酶聯(lián)免疫吸附法準(zhǔn)確度高于膠體金法，可適用于批量的流行病學(xué)調(diào)查時(shí)使用。時(shí)間分辨熒光分析法能準(zhǔn)確的檢測(cè)出乙型肝炎表面抗原，誤差小，無放射性污染，是目前公認(rèn)的最好的檢測(cè)方法，值得臨床進(jìn)一步推廣和研究。

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[2]肖宏，張文宏.乙型肝炎病毒表面抗原和e 抗原定量檢測(cè)對(duì)聚乙二醇干擾素治療慢性乙型肝炎療效的預(yù)測(cè)價(jià)值[J].微生物與感染，2012,7（4）：255-259.

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