臨床免疫檢測中的常見問題及對策研究

令海英 常俊峰

1.甘肅省天水市武山縣中醫院，甘肅天水 741306;2.天水四〇七醫院，甘肅天水 741000

免疫結果是醫生對疾病診斷的一個重要依據，因此要必須提高免疫的檢驗質量。通過多年的臨床研究發現，影響檢驗結果出現誤差有很多因素，其中實驗室中的濕度和溫度，標本合格與否，標準品的質量，清洗過程等最為關鍵。由于免疫檢驗結果的重要性，因此對這些影響因素進行分析，提出相應的解決策略，使檢驗的準確性得以提高，才能保證臨床對疾病準確地診治。選取2011年3月—2013年4月我院免疫檢驗的相關資料進行研究，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2011年3月—2013年4月我院免疫檢測標本的13 個相關項目用酶聯免疫吸附試驗方法檢測的相關資料進行研究，檢驗的項目中有乙型肝炎的標志物，激素的標志物等13 個相關項目，其中樣本有1480 份。對實驗室進行相關的調查研究，內容有工作人員相關的素養，有學歷、資歷、從業時間、職稱、經驗等。對相關的儀器設備進行調研，包括洗液、維修、校正情況和操作的規范性。實驗室的濕度、溫度和衛生情況，試劑儲存，標準品的質量，標本合格與否，清洗過程等。對實驗操作的每個環節進行跟蹤，嚴格控制。

1.2 質量控制的方法

1.2.1 儀器設備的控制 在免疫檢測之前對相關的儀器進行校準和檢查。包括水浴箱、酶標儀、離心機，移液器、96 孔板也要定期檢查，減少和防止誤差的出現。

1.2.2 試劑的選擇 對試劑的有效時間和儲存條件需要認真核對，盡量減少各種因素造成對結果的影響。如果有自配的試劑，在檢測前要相應的鑒定，合格后再進行使用。

1.2.3 標本控制 標本采集嚴格按操作規程進行，包括采血時間、采血姿勢、止血帶使用方法，送檢時間等都要嚴格控制。若患者服用的藥物中有激素類的，要對采集時間更加嚴格，例如，促卵泡的激素、黃體激素以及生長激素，一定要特殊處理。

1.2.4 室內質量的控制 在檢測時選擇第三代的夾心法酶聯的測試盒，首先檢測相關的標記物，檢驗時注意規范的操作，避免出現污染的情況。

1.2.5 檢測后的控制 檢測工作完成后，工作人員要復查檢驗的結果，對于出現差異的數據要及時與相關科室核實。在檢測結果得出后要將檢驗結果和標本進行相應的保存，可以在需要時查詢。

1.3 統計學分析

對本文出現的數據均采用SPSS 14.0 統計學軟件進行檢驗，采用t 對計量資料進行檢驗，采用χ2計數資料進行檢驗，P﹤0.05差異有統計學意義。

2 結果

對相關結果進行多元線性的回歸分析，方程式為：y=0.604+0.003χ1+0.038χ2+0.039χ3+0.0 03χ4+0.015χ5+0.031χ6。關鍵的影響因素為實驗室的適度和溫度、標本和標準品的質量，清洗過程，試劑反應平衡常和操作人員的素質有關，由于影響較大，差異有統計學意義（P＜0.05），具體數據見表1。

表1 多元性的回歸結果

3 討論

只有在免疫檢驗中減少誤差，提高檢驗質量，才能為醫生對疾病的診斷提供科學有效的依據。因此在進行相關的免疫測定時，要按照相關的規定進行規范的操作[1]。通過對影響檢驗結果的相關因素進行分析后，采取一系列的控制策略。室內質量主要包括對樣本的可靠處理，以及結果報告和相應的解釋，在實驗報告中要保證簡潔性和完整性，在進行相關工作時要保證嚴謹的工作態度，避免出現應付的情緒[2]。在每個項目中都要有質控，無論自制還是購買的，根據具體的情況進行質控的選擇，有些項目沒有相應的質控品，因此要對混合血清進行自制。質控的頻率和使用的數量要根據檢測項目進行決定，不可以隨意進行相關的質控，否則也會對檢測結果造成負面的影響。

標準品質量出現變異較為常見現象，這就會造成檢驗結果的誤差。這種異常的情況大多是由于使用不當和運輸儲存造成的，對于一些需要冷凍保存的沒有進行及時的分裝，在多次凍融的情況下，出現逐步變質的情況[3]。在對凍干的標準品進行復融時要保持較緩的搖勻，最終將內容物進行完全的溶解，不要進行劇烈的振搖[4]。標準品較為適宜的保存溫度為4℃，有些工作人員使用不按照規范進行，一般會將整盒取出，在室溫環境中進行放置，隨用隨取，沒有對時間進行良好的控制，反復幾次后，就會導致定標出現部分變質的現象，因此操作人員在每次對標準品進行取用時，每次僅取一次量。因此要對標準品選擇定標，從而減少其出現變異的情況[5]。實驗室工作人員會在相同情況下得出不同的結果，對于操作不熟練的工作人員，會增加實驗結果出現失誤的情況。因此要對操作人員進行充分的培訓，定時進行操作上的指導和學習，還要進行相關的測試，促進操作人員業務學習的積極性。通過多年的臨床研究發現，酶標板在4℃使放入孵箱，與25℃時放入孵箱，會出現10 min 的差異，而將實驗室的溫度設置為18～25℃，能夠得到較為準確的檢測結果。當室內的濕度小于40%時，會出現較為明顯的靜電現象，而且塑料材質的器皿會出現帶電微粒，這樣容易使樣品出現污染的情況，因此室內的濕度一般設置為30%～60%[6]。由此說明對實驗室的環境進行良好的設置較為重要。在研究中表明，平衡時間小于30min 和大于30min 具有較大的差異，因此說明檢測結果與試劑的平衡時間有較為密切的關系，從而需要將試劑在室溫中進行30min 的平衡，使試劑的溫度和室溫保持一致。其中標本的質量也有較大的影響，要避免標本采集使出現細菌污染、凝聚不全、溶血和貯存較長時間的情況，減少外源性因素的干擾。清洗過程為影響因素中較為重要的一種，當檢驗完成后要及時倒出洗液，并對洗液桶選擇蒸餾水進行洗凈，防止造成假陽性的出現。對檢測使用的設備要定期進行維修、校準，保證檢驗結果的準確性。對水浴箱和加樣器都要在計量校準后才可使用。只有對上述的各種情況進行嚴格的控制，才能減少導致檢測結果失誤的相關因素，提高檢測結果的可靠性，進而提高臨床醫生對疾病診斷的準確性。由于檢驗結果有出現假陽性等的可能，若患者的具體體征與檢驗結果有較大的差異時，第一時間與檢驗人員進行溝通，為了保證對疾病準確的診斷，可進行相關復檢。

綜上所述，在臨床免疫檢測中要按照相關的規定進行規范的操作，尤其把握實驗室中的濕度和溫度，試劑反應的平衡時常，標準品以及標本的質量，操作人員的素質和清洗過程，只有對上述情況進行嚴格控制，才能減少檢測中的失誤，提高檢驗結果的準確性。

[1]葛明,姚建林,張東浩.基于SERS 標記免疫檢測的再生性研究[J].光譜學與光譜分析,2013,30(27)：173-174.

[2]楊壽旺,李睿,周振達,等.ELISA 質控存在的問題探討[J].中國國境衛生檢疫雜志,2012,34(15)：134-135.

[3]劉爽,王偉,劉小雷.一種高通量免疫檢測抗生素殘留方法的建立[J].中國抗生素雜志,2012,37(23)：131-132.

[4]董莉,張保平,王永祥,等.參加室間質評加強免疫檢驗項目的質量控制[J].內蒙古醫學院學報2012,32(17)：146-147.

[5]曹瑋,崔顏,顧仁敖.臨床免疫檢測中存在的問題及對策分析[J].白求恩軍醫學院學報,2012,10(4)：114-115.

[6]李金明,張佳音,王浩杰.臨床免疫檢驗的質量保證[J].中華檢驗醫學雜志，2011,29(11)：105-106.