偉力精子質(zhì)量檢測動態(tài)分析系統(tǒng)的臨床應(yīng)用

高燕紅　胡衛(wèi)　李娟

[摘要] 目的 比較國產(chǎn)偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)（WLJY-9000）與傳統(tǒng)的人工常規(guī)檢查（按WHO標(biāo)準(zhǔn)）兩種方法檢測參數(shù)的可信度。 方法 隨機(jī)選擇2011年5月～2012年2月來本院檢查的100例精液（捐獻(xiàn)者年齡25～45歲）標(biāo)本進(jìn)行檢測，并對兩種檢查參數(shù)如精子密度、活動率、活動力（a+b）等進(jìn)行分析比較。 結(jié)果 采用兩種檢測方法所得精子密度、精子活動率以及精子活力（a+b）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.9）；通過20×和40×兩種放大倍數(shù)的一致性測定數(shù)據(jù)顯示該檢測系統(tǒng)具有良好的重復(fù)性和一致性。 結(jié)論 該檢測系統(tǒng)有較好的準(zhǔn)確性、良好的重復(fù)性和一致性，可以代替人工檢測，為臨床診斷男性不孕不育和體外受精選配優(yōu)質(zhì)精子等提供了參考依據(jù)，在檢測過程中也有效避免了一些因人工主觀判斷所產(chǎn)生的誤差，具有多種人工檢測方法不具有的功能，也為臨床和科研中精液常規(guī)分析的科學(xué)化、規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化創(chuàng)造了條件。

[關(guān)鍵詞] 精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)；精子密度；精子活動率；精子活力

[中圖分類號] R446.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）02（a）-0098-03

精液分析是一項(xiàng)評估男性生育能力最基本和重要的檢查方法，以往的精子計數(shù)和主觀判斷已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床需要，直觀的形態(tài)分析越來越顯示出它的重要性，在男性不育癥的臨床診斷中有非常重要的價值[1]，為臨床治療和療效觀察提供了科學(xué)依據(jù)。目前我國大多數(shù)基層醫(yī)院依然在使用手工分析方法，由于受不同檢驗(yàn)操作人員的技術(shù)、經(jīng)驗(yàn)和方法等影響，造成了檢測結(jié)果的差異，降低了精液報告的客觀性和可比性[2]。WLJY-9000偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)巧妙地將現(xiàn)代先進(jìn)的計算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)運(yùn)用在精子質(zhì)量分析儀的臨床分析上，不但可對精液中的精子活力、活動率、密度和精子總數(shù)等進(jìn)行定量分析，還可對精子運(yùn)動速度和運(yùn)動軌跡特征進(jìn)行分析。另外，此系統(tǒng)還能向操作人員展現(xiàn)出精液中不該存在的一些病理因素，如超量的白細(xì)胞、紅細(xì)胞和活動的細(xì)菌等[3]。在臨床檢驗(yàn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，WLJY-9000偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)檢測出的精子密度、活動率、活動力（a+b）和精子總數(shù)與傳統(tǒng)的人工檢測方法相比具有良好的相關(guān)性和準(zhǔn)確性，可以代替人工檢測方法，為臨床提供更科學(xué)、客觀和準(zhǔn)確的參考依據(jù)。本研究采用偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)和傳統(tǒng)的人工檢測方法對同一份精液標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)，比較所得結(jié)果的相關(guān)性、準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年5月～2012年2月本院生殖科和男性專科門診提供的精液標(biāo)本100例（捐獻(xiàn)者年齡25～45歲），捐獻(xiàn)者禁欲3～7 d后，手淫法采集，將一次射出量裝入潔凈干燥玻璃試管內(nèi)[4]，立即保溫送檢后放置于37℃水浴箱保溫30～60 min（以標(biāo)本液化為準(zhǔn)，最遲不超過60 min）。

1.2 儀器

北京偉力公司W(wǎng)LJY-9000彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)，Olympus顯微鏡和Makler計數(shù)板。

1.3 方法

1.3.1 傳統(tǒng)手工分析方法 將處理好的精液標(biāo)本由有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按照WHO規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作，用微量吸管將處理好的標(biāo)本加樣到已經(jīng)37℃預(yù)溫的Makler計數(shù)板和干凈玻片上，計算精子數(shù)、密度、活力及活動率[5]。同時記錄精液總量、外觀、氣味、pH值和標(biāo)本液化時間，完善檢驗(yàn)報告。

1.3.2 質(zhì)量檢測系統(tǒng)分析方法 選擇同一精液標(biāo)本，不做稀釋處理，直接用微量吸管將定量的精液（≤5 μl）滴在清潔、預(yù)溫的計數(shù)板的精液池上，再蓋上專用蓋玻片后，置于系統(tǒng)的恒溫顯微鏡臺上，靜置約1 min[6]，待穩(wěn)定后，用專用顯微鏡進(jìn)行鏡檢，并通過顯微鏡上所連攝像頭將信息傳入精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)進(jìn)行分析。同時輸入精液總量、外觀、氣味、pH值和標(biāo)本液化時間，完善檢驗(yàn)報告。

1.3.3 檢測精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)的可重復(fù)性 對同一份標(biāo)本用20倍鏡和40倍鏡在同樣條件下連續(xù)檢測3次，計算精子密度、活動率和精子活力（a+b）百分率，以確定該系統(tǒng)的重復(fù)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料采用t檢驗(yàn)，計數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方法主要參數(shù)的比較

采用兩種檢測方法所得精子密度、精子活動率以及精子活力（a+b）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

表1 兩種檢測方法主要參數(shù)相關(guān)性的比較（n=100，x±s）

與手工檢測法比較，*P>0.05；與系統(tǒng)檢測法（40×）比較，#P>0.05

2.2 精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)可重復(fù)性的分析

通過統(tǒng)計結(jié)果可以看出，偉力精子檢測系統(tǒng)檢測的精子密度、活動率和活力（a+b）參數(shù)數(shù)值的變異系數(shù)都很小，且兩種放大倍數(shù)檢測系統(tǒng)的變異系數(shù)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），說明該檢測系統(tǒng)具有良好的重復(fù)性和一致性（表2）。

表2 精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)可重復(fù)性的分析（n=100）

3 討論

精液分析是評價男性生育功能、提供不育癥的診斷和療效觀察的依據(jù)，也是輔助診斷男性生殖系統(tǒng)疾病、輸精管結(jié)扎術(shù)后療效觀察的重要檢測項(xiàng)目，同時還為體外受精篩選優(yōu)質(zhì)精子提供參考依據(jù)[7]，準(zhǔn)確的精子計數(shù)和精子密度更能為準(zhǔn)確分析人工授精臨床妊娠率提供依據(jù)[9]。傳統(tǒng)的手工分析方法缺乏良好的客觀性，不同檢驗(yàn)人員分析的結(jié)果因?yàn)橹饔^判斷的不同有時差異較大，對精子活力的等級判斷缺少嚴(yán)格的量化指標(biāo)。在檢測過程中因?yàn)闆]有恒溫設(shè)施，在環(huán)境溫度低和檢測時間稍長時往往使檢測出的精子活力和活動率偏低[10]。

偉力精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)通過攝像機(jī)或錄像機(jī)與顯微鏡連接，確定和跟蹤單個精子的活動，根據(jù)設(shè)定的精子運(yùn)動的移位、精子大小和精子運(yùn)動的有關(guān)參數(shù)，對采集到的圖像進(jìn)行動態(tài)處理和分析[11]。其既可定量分析精子密度、精子活力、精子活動率，還可以分析精子運(yùn)動速度和運(yùn)動軌跡特征，同時還能發(fā)現(xiàn)一些其他的致病原因，為臨床診斷提供更高效、客觀和科學(xué)的服務(wù)。在進(jìn)行精液檢測分析中值得注意的是，進(jìn)行檢測用的計數(shù)板一定要提前預(yù)溫，如果未預(yù)溫將影響精子活力和活動率的測定。在電腦顯示屏上進(jìn)行抓圖時要將視野調(diào)至微暗，這有利于提高抓拍精子的準(zhǔn)確性。每次進(jìn)行圖片抓拍計數(shù)時一定要將誤抓的紅、白細(xì)胞和卵磷脂小體、原細(xì)胞等從計數(shù)的精子個數(shù)中除去，以免影響計算機(jī)最后對精子數(shù)、活動力、活動率的計數(shù)和統(tǒng)計。相信在先進(jìn)的儀器設(shè)備和人工的監(jiān)測下一定能給臨床提供一份準(zhǔn)確、可信的報告單。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 朱定安，夏順仁，王建峰.普通光鏡下精子動態(tài)分析精度的影響因素分析[A].21世紀(jì)醫(yī)學(xué)工程學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C].2001.

[2] 張維嘉.精子質(zhì)量分析儀的實(shí)用性[J].國外醫(yī)學(xué)·計劃生育分冊，1999，18（1）：63.

[3] 師作范，王曉亮.慢性前列腺炎對精液常規(guī)檢測結(jié)果的影響[J].中國社區(qū)醫(yī)師，2009，6（10）：76.

[4] 曹星星，李嘉陵，劉一美.精液常規(guī)檢測體會點(diǎn)滴[J].四川生理科學(xué)雜志，2000，3（22）：46-47.

[5] 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：225-227.

[6] 李文偉，馬驄.精液標(biāo)本置入精子質(zhì)量分析儀時間長短對精液常規(guī)各參數(shù)的影響[J].海軍總醫(yī)院學(xué)報，2006，3（19）：176.

[7] 容小翔.精液化驗(yàn)的三種意義[N].醫(yī)藥養(yǎng)生保健報，2008-3-17.

[8] 黃茜，許常龍，史秋雯.精子形態(tài)分析標(biāo)準(zhǔn)化研究進(jìn)展[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2013，20（18）：20-22.

[9] 蘇亮，羅平，羅江霞.精液常規(guī)參數(shù)與人工授精臨床妊娠率關(guān)系的研究[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2012，9（12）：49-51.

[10] 王軍，于靈.探討常規(guī)精液分析與計算機(jī)輔助精子分析的可比性[J].中國性科學(xué)，2012，21（8）：45-47，54.

[11] 熊立凡，劉成玉.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：244-246.

（收稿日期：2013-10-23 本文編輯：袁 成）

[摘要] 目的 比較國產(chǎn)偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)（WLJY-9000）與傳統(tǒng)的人工常規(guī)檢查（按WHO標(biāo)準(zhǔn)）兩種方法檢測參數(shù)的可信度。 方法 隨機(jī)選擇2011年5月～2012年2月來本院檢查的100例精液（捐獻(xiàn)者年齡25～45歲）標(biāo)本進(jìn)行檢測，并對兩種檢查參數(shù)如精子密度、活動率、活動力（a+b）等進(jìn)行分析比較。 結(jié)果 采用兩種檢測方法所得精子密度、精子活動率以及精子活力（a+b）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.9）；通過20×和40×兩種放大倍數(shù)的一致性測定數(shù)據(jù)顯示該檢測系統(tǒng)具有良好的重復(fù)性和一致性。 結(jié)論 該檢測系統(tǒng)有較好的準(zhǔn)確性、良好的重復(fù)性和一致性，可以代替人工檢測，為臨床診斷男性不孕不育和體外受精選配優(yōu)質(zhì)精子等提供了參考依據(jù)，在檢測過程中也有效避免了一些因人工主觀判斷所產(chǎn)生的誤差，具有多種人工檢測方法不具有的功能，也為臨床和科研中精液常規(guī)分析的科學(xué)化、規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化創(chuàng)造了條件。

[關(guān)鍵詞] 精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)；精子密度；精子活動率；精子活力

[中圖分類號] R446.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）02（a）-0098-03

精液分析是一項(xiàng)評估男性生育能力最基本和重要的檢查方法，以往的精子計數(shù)和主觀判斷已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床需要，直觀的形態(tài)分析越來越顯示出它的重要性，在男性不育癥的臨床診斷中有非常重要的價值[1]，為臨床治療和療效觀察提供了科學(xué)依據(jù)。目前我國大多數(shù)基層醫(yī)院依然在使用手工分析方法，由于受不同檢驗(yàn)操作人員的技術(shù)、經(jīng)驗(yàn)和方法等影響，造成了檢測結(jié)果的差異，降低了精液報告的客觀性和可比性[2]。WLJY-9000偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)巧妙地將現(xiàn)代先進(jìn)的計算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)運(yùn)用在精子質(zhì)量分析儀的臨床分析上，不但可對精液中的精子活力、活動率、密度和精子總數(shù)等進(jìn)行定量分析，還可對精子運(yùn)動速度和運(yùn)動軌跡特征進(jìn)行分析。另外，此系統(tǒng)還能向操作人員展現(xiàn)出精液中不該存在的一些病理因素，如超量的白細(xì)胞、紅細(xì)胞和活動的細(xì)菌等[3]。在臨床檢驗(yàn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，WLJY-9000偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)檢測出的精子密度、活動率、活動力（a+b）和精子總數(shù)與傳統(tǒng)的人工檢測方法相比具有良好的相關(guān)性和準(zhǔn)確性，可以代替人工檢測方法，為臨床提供更科學(xué)、客觀和準(zhǔn)確的參考依據(jù)。本研究采用偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)和傳統(tǒng)的人工檢測方法對同一份精液標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)，比較所得結(jié)果的相關(guān)性、準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年5月～2012年2月本院生殖科和男性專科門診提供的精液標(biāo)本100例（捐獻(xiàn)者年齡25～45歲），捐獻(xiàn)者禁欲3～7 d后，手淫法采集，將一次射出量裝入潔凈干燥玻璃試管內(nèi)[4]，立即保溫送檢后放置于37℃水浴箱保溫30～60 min（以標(biāo)本液化為準(zhǔn)，最遲不超過60 min）。

1.2 儀器

北京偉力公司W(wǎng)LJY-9000彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)，Olympus顯微鏡和Makler計數(shù)板。

1.3 方法

1.3.1 傳統(tǒng)手工分析方法 將處理好的精液標(biāo)本由有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按照WHO規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作，用微量吸管將處理好的標(biāo)本加樣到已經(jīng)37℃預(yù)溫的Makler計數(shù)板和干凈玻片上，計算精子數(shù)、密度、活力及活動率[5]。同時記錄精液總量、外觀、氣味、pH值和標(biāo)本液化時間，完善檢驗(yàn)報告。

1.3.2 質(zhì)量檢測系統(tǒng)分析方法 選擇同一精液標(biāo)本，不做稀釋處理，直接用微量吸管將定量的精液（≤5 μl）滴在清潔、預(yù)溫的計數(shù)板的精液池上，再蓋上專用蓋玻片后，置于系統(tǒng)的恒溫顯微鏡臺上，靜置約1 min[6]，待穩(wěn)定后，用專用顯微鏡進(jìn)行鏡檢，并通過顯微鏡上所連攝像頭將信息傳入精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)進(jìn)行分析。同時輸入精液總量、外觀、氣味、pH值和標(biāo)本液化時間，完善檢驗(yàn)報告。

1.3.3 檢測精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)的可重復(fù)性 對同一份標(biāo)本用20倍鏡和40倍鏡在同樣條件下連續(xù)檢測3次，計算精子密度、活動率和精子活力（a+b）百分率，以確定該系統(tǒng)的重復(fù)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料采用t檢驗(yàn)，計數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方法主要參數(shù)的比較

采用兩種檢測方法所得精子密度、精子活動率以及精子活力（a+b）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

表1 兩種檢測方法主要參數(shù)相關(guān)性的比較（n=100，x±s）

與手工檢測法比較，*P>0.05；與系統(tǒng)檢測法（40×）比較，#P>0.05

2.2 精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)可重復(fù)性的分析

通過統(tǒng)計結(jié)果可以看出，偉力精子檢測系統(tǒng)檢測的精子密度、活動率和活力（a+b）參數(shù)數(shù)值的變異系數(shù)都很小，且兩種放大倍數(shù)檢測系統(tǒng)的變異系數(shù)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），說明該檢測系統(tǒng)具有良好的重復(fù)性和一致性（表2）。

表2 精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)可重復(fù)性的分析（n=100）

3 討論

精液分析是評價男性生育功能、提供不育癥的診斷和療效觀察的依據(jù)，也是輔助診斷男性生殖系統(tǒng)疾病、輸精管結(jié)扎術(shù)后療效觀察的重要檢測項(xiàng)目，同時還為體外受精篩選優(yōu)質(zhì)精子提供參考依據(jù)[7]，準(zhǔn)確的精子計數(shù)和精子密度更能為準(zhǔn)確分析人工授精臨床妊娠率提供依據(jù)[9]。傳統(tǒng)的手工分析方法缺乏良好的客觀性，不同檢驗(yàn)人員分析的結(jié)果因?yàn)橹饔^判斷的不同有時差異較大，對精子活力的等級判斷缺少嚴(yán)格的量化指標(biāo)。在檢測過程中因?yàn)闆]有恒溫設(shè)施，在環(huán)境溫度低和檢測時間稍長時往往使檢測出的精子活力和活動率偏低[10]。

偉力精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)通過攝像機(jī)或錄像機(jī)與顯微鏡連接，確定和跟蹤單個精子的活動，根據(jù)設(shè)定的精子運(yùn)動的移位、精子大小和精子運(yùn)動的有關(guān)參數(shù)，對采集到的圖像進(jìn)行動態(tài)處理和分析[11]。其既可定量分析精子密度、精子活力、精子活動率，還可以分析精子運(yùn)動速度和運(yùn)動軌跡特征，同時還能發(fā)現(xiàn)一些其他的致病原因，為臨床診斷提供更高效、客觀和科學(xué)的服務(wù)。在進(jìn)行精液檢測分析中值得注意的是，進(jìn)行檢測用的計數(shù)板一定要提前預(yù)溫，如果未預(yù)溫將影響精子活力和活動率的測定。在電腦顯示屏上進(jìn)行抓圖時要將視野調(diào)至微暗，這有利于提高抓拍精子的準(zhǔn)確性。每次進(jìn)行圖片抓拍計數(shù)時一定要將誤抓的紅、白細(xì)胞和卵磷脂小體、原細(xì)胞等從計數(shù)的精子個數(shù)中除去，以免影響計算機(jī)最后對精子數(shù)、活動力、活動率的計數(shù)和統(tǒng)計。相信在先進(jìn)的儀器設(shè)備和人工的監(jiān)測下一定能給臨床提供一份準(zhǔn)確、可信的報告單。

[參考文獻(xiàn)]

[1] 朱定安，夏順仁，王建峰.普通光鏡下精子動態(tài)分析精度的影響因素分析[A].21世紀(jì)醫(yī)學(xué)工程學(xué)術(shù)研討會論文摘要匯編[C].2001.

[2] 張維嘉.精子質(zhì)量分析儀的實(shí)用性[J].國外醫(yī)學(xué)·計劃生育分冊，1999，18（1）：63.

[3] 師作范，王曉亮.慢性前列腺炎對精液常規(guī)檢測結(jié)果的影響[J].中國社區(qū)醫(yī)師，2009，6（10）：76.

[4] 曹星星，李嘉陵，劉一美.精液常規(guī)檢測體會點(diǎn)滴[J].四川生理科學(xué)雜志，2000，3（22）：46-47.

[5] 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程[M].3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：225-227.

[6] 李文偉，馬驄.精液標(biāo)本置入精子質(zhì)量分析儀時間長短對精液常規(guī)各參數(shù)的影響[J].海軍總醫(yī)院學(xué)報，2006，3（19）：176.

[7] 容小翔.精液化驗(yàn)的三種意義[N].醫(yī)藥養(yǎng)生保健報，2008-3-17.

[8] 黃茜，許常龍，史秋雯.精子形態(tài)分析標(biāo)準(zhǔn)化研究進(jìn)展[J].中國當(dāng)代醫(yī)藥，2013，20（18）：20-22.

[9] 蘇亮，羅平，羅江霞.精液常規(guī)參數(shù)與人工授精臨床妊娠率關(guān)系的研究[J].熱帶醫(yī)學(xué)雜志，2012，9（12）：49-51.

[10] 王軍，于靈.探討常規(guī)精液分析與計算機(jī)輔助精子分析的可比性[J].中國性科學(xué)，2012，21（8）：45-47，54.

[11] 熊立凡，劉成玉.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：244-246.

（收稿日期：2013-10-23 本文編輯：袁 成）

[摘要] 目的 比較國產(chǎn)偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)（WLJY-9000）與傳統(tǒng)的人工常規(guī)檢查（按WHO標(biāo)準(zhǔn)）兩種方法檢測參數(shù)的可信度。 方法 隨機(jī)選擇2011年5月～2012年2月來本院檢查的100例精液（捐獻(xiàn)者年齡25～45歲）標(biāo)本進(jìn)行檢測，并對兩種檢查參數(shù)如精子密度、活動率、活動力（a+b）等進(jìn)行分析比較。 結(jié)果 采用兩種檢測方法所得精子密度、精子活動率以及精子活力（a+b）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.9）；通過20×和40×兩種放大倍數(shù)的一致性測定數(shù)據(jù)顯示該檢測系統(tǒng)具有良好的重復(fù)性和一致性。 結(jié)論 該檢測系統(tǒng)有較好的準(zhǔn)確性、良好的重復(fù)性和一致性，可以代替人工檢測，為臨床診斷男性不孕不育和體外受精選配優(yōu)質(zhì)精子等提供了參考依據(jù)，在檢測過程中也有效避免了一些因人工主觀判斷所產(chǎn)生的誤差，具有多種人工檢測方法不具有的功能，也為臨床和科研中精液常規(guī)分析的科學(xué)化、規(guī)范化和標(biāo)準(zhǔn)化創(chuàng)造了條件。

[關(guān)鍵詞] 精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)；精子密度；精子活動率；精子活力

[中圖分類號] R446.1 [文獻(xiàn)標(biāo)識碼] A [文章編號] 1674-4721（2014）02（a）-0098-03

精液分析是一項(xiàng)評估男性生育能力最基本和重要的檢查方法，以往的精子計數(shù)和主觀判斷已遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能滿足臨床需要，直觀的形態(tài)分析越來越顯示出它的重要性，在男性不育癥的臨床診斷中有非常重要的價值[1]，為臨床治療和療效觀察提供了科學(xué)依據(jù)。目前我國大多數(shù)基層醫(yī)院依然在使用手工分析方法，由于受不同檢驗(yàn)操作人員的技術(shù)、經(jīng)驗(yàn)和方法等影響，造成了檢測結(jié)果的差異，降低了精液報告的客觀性和可比性[2]。WLJY-9000偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)巧妙地將現(xiàn)代先進(jìn)的計算機(jī)技術(shù)和圖像處理技術(shù)運(yùn)用在精子質(zhì)量分析儀的臨床分析上，不但可對精液中的精子活力、活動率、密度和精子總數(shù)等進(jìn)行定量分析，還可對精子運(yùn)動速度和運(yùn)動軌跡特征進(jìn)行分析。另外，此系統(tǒng)還能向操作人員展現(xiàn)出精液中不該存在的一些病理因素，如超量的白細(xì)胞、紅細(xì)胞和活動的細(xì)菌等[3]。在臨床檢驗(yàn)實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)，WLJY-9000偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)檢測出的精子密度、活動率、活動力（a+b）和精子總數(shù)與傳統(tǒng)的人工檢測方法相比具有良好的相關(guān)性和準(zhǔn)確性，可以代替人工檢測方法，為臨床提供更科學(xué)、客觀和準(zhǔn)確的參考依據(jù)。本研究采用偉力彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)和傳統(tǒng)的人工檢測方法對同一份精液標(biāo)本進(jìn)行檢驗(yàn)，比較所得結(jié)果的相關(guān)性、準(zhǔn)確性和重復(fù)性。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選擇2011年5月～2012年2月本院生殖科和男性專科門診提供的精液標(biāo)本100例（捐獻(xiàn)者年齡25～45歲），捐獻(xiàn)者禁欲3～7 d后，手淫法采集，將一次射出量裝入潔凈干燥玻璃試管內(nèi)[4]，立即保溫送檢后放置于37℃水浴箱保溫30～60 min（以標(biāo)本液化為準(zhǔn)，最遲不超過60 min）。

1.2 儀器

北京偉力公司W(wǎng)LJY-9000彩色精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)，Olympus顯微鏡和Makler計數(shù)板。

1.3 方法

1.3.1 傳統(tǒng)手工分析方法 將處理好的精液標(biāo)本由有經(jīng)驗(yàn)的檢驗(yàn)人員嚴(yán)格按照WHO規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程進(jìn)行操作，用微量吸管將處理好的標(biāo)本加樣到已經(jīng)37℃預(yù)溫的Makler計數(shù)板和干凈玻片上，計算精子數(shù)、密度、活力及活動率[5]。同時記錄精液總量、外觀、氣味、pH值和標(biāo)本液化時間，完善檢驗(yàn)報告。

1.3.2 質(zhì)量檢測系統(tǒng)分析方法 選擇同一精液標(biāo)本，不做稀釋處理，直接用微量吸管將定量的精液（≤5 μl）滴在清潔、預(yù)溫的計數(shù)板的精液池上，再蓋上專用蓋玻片后，置于系統(tǒng)的恒溫顯微鏡臺上，靜置約1 min[6]，待穩(wěn)定后，用專用顯微鏡進(jìn)行鏡檢，并通過顯微鏡上所連攝像頭將信息傳入精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)進(jìn)行分析。同時輸入精液總量、外觀、氣味、pH值和標(biāo)本液化時間，完善檢驗(yàn)報告。

1.3.3 檢測精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)的可重復(fù)性 對同一份標(biāo)本用20倍鏡和40倍鏡在同樣條件下連續(xù)檢測3次，計算精子密度、活動率和精子活力（a+b）百分率，以確定該系統(tǒng)的重復(fù)性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 13.0統(tǒng)計學(xué)軟件對相關(guān)數(shù)據(jù)進(jìn)行分析，計量資料采用t檢驗(yàn)，計數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩種檢測方法主要參數(shù)的比較

采用兩種檢測方法所得精子密度、精子活動率以及精子活力（a+b）差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）（表1）。

表1 兩種檢測方法主要參數(shù)相關(guān)性的比較（n=100，x±s）

與手工檢測法比較，*P>0.05；與系統(tǒng)檢測法（40×）比較，#P>0.05

2.2 精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)可重復(fù)性的分析

通過統(tǒng)計結(jié)果可以看出，偉力精子檢測系統(tǒng)檢測的精子密度、活動率和活力（a+b）參數(shù)數(shù)值的變異系數(shù)都很小，且兩種放大倍數(shù)檢測系統(tǒng)的變異系數(shù)差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05），說明該檢測系統(tǒng)具有良好的重復(fù)性和一致性（表2）。

表2 精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)可重復(fù)性的分析（n=100）

3 討論

精液分析是評價男性生育功能、提供不育癥的診斷和療效觀察的依據(jù)，也是輔助診斷男性生殖系統(tǒng)疾病、輸精管結(jié)扎術(shù)后療效觀察的重要檢測項(xiàng)目，同時還為體外受精篩選優(yōu)質(zhì)精子提供參考依據(jù)[7]，準(zhǔn)確的精子計數(shù)和精子密度更能為準(zhǔn)確分析人工授精臨床妊娠率提供依據(jù)[9]。傳統(tǒng)的手工分析方法缺乏良好的客觀性，不同檢驗(yàn)人員分析的結(jié)果因?yàn)橹饔^判斷的不同有時差異較大，對精子活力的等級判斷缺少嚴(yán)格的量化指標(biāo)。在檢測過程中因?yàn)闆]有恒溫設(shè)施，在環(huán)境溫度低和檢測時間稍長時往往使檢測出的精子活力和活動率偏低[10]。

偉力精子質(zhì)量檢測系統(tǒng)通過攝像機(jī)或錄像機(jī)與顯微鏡連接，確定和跟蹤單個精子的活動，根據(jù)設(shè)定的精子運(yùn)動的移位、精子大小和精子運(yùn)動的有關(guān)參數(shù)，對采集到的圖像進(jìn)行動態(tài)處理和分析[11]。其既可定量分析精子密度、精子活力、精子活動率，還可以分析精子運(yùn)動速度和運(yùn)動軌跡特征，同時還能發(fā)現(xiàn)一些其他的致病原因，為臨床診斷提供更高效、客觀和科學(xué)的服務(wù)。在進(jìn)行精液檢測分析中值得注意的是，進(jìn)行檢測用的計數(shù)板一定要提前預(yù)溫，如果未預(yù)溫將影響精子活力和活動率的測定。在電腦顯示屏上進(jìn)行抓圖時要將視野調(diào)至微暗，這有利于提高抓拍精子的準(zhǔn)確性。每次進(jìn)行圖片抓拍計數(shù)時一定要將誤抓的紅、白細(xì)胞和卵磷脂小體、原細(xì)胞等從計數(shù)的精子個數(shù)中除去，以免影響計算機(jī)最后對精子數(shù)、活動力、活動率的計數(shù)和統(tǒng)計。相信在先進(jìn)的儀器設(shè)備和人工的監(jiān)測下一定能給臨床提供一份準(zhǔn)確、可信的報告單。

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[11] 熊立凡，劉成玉.臨床檢驗(yàn)基礎(chǔ)[M].4版.北京：人民衛(wèi)生出版社，2008：244-246.

（收稿日期：2013-10-23 本文編輯：袁 成）